简介:摘要目的评价铁死亡在脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞线粒体损伤模型中的作用。方法常规培养小鼠RAW264.7细胞,按随机数字表法将培养的细胞分为4组(n=6):对照组(Con组)、脂多糖组(LPS组)、脂多糖+铁死亡激动剂Erastin组(LPS+E组)和脂多糖+铁死亡抑素Ferrostatin-1组(LPS+F组)。LPS组给予终浓度为1 μg/ml的LPS进行孵育6 h;LPS+E组给予终浓度为1 μg/ml的LPS和浓度为1 mmol/L的含Erastin培养液进行孵育6 h;LPS+F组给予终浓度为1 μg/ml的LPS和浓度为1 mmol/L的含Ferrostatin-1培养液进行孵育6 h。采用Clark氧电极法及JC-1法分别测定线粒体呼吸控制率(RCR)及线粒体膜电位(MMP),透射电镜下观察细胞内线粒体改变情况,采用Western blot法测定细胞内铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、长链酯酰辅酶A合成酶4(ACSL4)的表达,采用荧光探针法测定活性氧族(ROS)和Fe2+含量,采用硫代巴比妥酸(TBA)法测定丙二醛(MDA)含量。结果与Con组比较,LPS组RCR和MMP均降低(P均<0.05),GPX4表达下调(P<0.05),ACSL4表达上调(P<0.05);线粒体出现线粒体膜增厚、线粒体皱缩、线粒体嵴消失等铁死亡表现,细胞内Fe2+含量升高(P<0.05),ROS含量升高(P<0.05),MDA含量升高(P<0.05)。与LPS组比较,LPS+E组RCR和MMP降低(P<0.05),GPX4表达下调(P<0.05),ACSL4表达上调(P<0.05),Fe2+含量、ROS含量和MDA含量均升高(P均<0.05)。LPS+F组RCR和MMP升高(P<0.05),GPX4表达上调(P<0.05),ACSL4表达下调(P<0.05),出现铁死亡变化的线粒体增加(P<0.05),Fe2+含量、ROS含量和MDA含量均降低(P均<0.05)。结论铁死亡增强LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤。
简介:摘要目的探讨微创手术治疗职业司机腰椎间盘突出症的临床效果。方法于2015年6月1日至2018年12月30日,选择入院治疗的126例职业为司机的腰椎间盘突出症患者,依据治疗方式分为观察组(经皮椎间孔镜治疗,共59例患者)及对照组(常规保守治疗,共67例患者),回顾性分析两组患者在治疗前后的视觉模拟评分(VAS评分)、日本骨科协会评估治疗分数(JOA评分)、住院时间、下床时间、住院费用、复发率。计量资料用±s表示,组间比较采用t检验,计数资料进行描述性分析。结果治疗前,两组患者的性别、年龄、VAS评分、JOA评分差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后,与对照组比较,观察组患者VAS评分较低、JOA评分较高、下床时间较短、平均住院时间减少、平均住院费用较高、6个月及1年后复发率均较低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论司机的腰椎间盘突出症采用经皮椎间孔镜疗法治疗较常规保守治疗的临床效果更好。
简介:摘要目的评价缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在氢抑制脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞炎症反应中的作用。方法体外培养小鼠RAW264.7巨噬细胞,按照随机数字表法分为4组(n=24):对照组(C组)、LPS组(L组)、富氢液+LPS组(H+L组)和富氢液+LPS +HIF-1α抑制剂二甲氧基雌二醇(2ME2)组(H+L+M组)。L组加入LPS 1 μg/ml孵育6 h;L+H组先加LPS,换培养基为0.6 mmol/L富氢液共孵育6 h;H+L+M组先给予2ME2 10 μmol/L孵育30 min,然后加入LPS和富氢液孵育6 h。采用Western blot法测定HIF-1α、Beclin-l、BNIP3和LC3的表达;采用ELISA法检测上清液TNF-α、IL-6和IL-1β的浓度,采用透视电镜观察细胞自噬小体数量。结果与C组比较,L组上清液TNF-α、IL-6和IL-1β浓度升高,巨噬细胞HIF-1α、Beclinl和BNIP3表达上调,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高,自噬小体数量增多(P<0.05);与L组比较,H+L组上清液TNF-α、IL-6和IL-1β浓度降低,巨噬细胞HIF-1α、Beclin-l、BNIP3表达上调、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值增高,自噬小体数量增多(P<0.05);与H+L组比较,H+L+M组上清液TNF-α、IL-6和IL-1β的浓度降低,巨噬细胞HIF-1α、Beclin-l和BNIP3表达下调,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值降低,自噬小体数量减少(P<0.05)。结论HIF-1α介导细胞自噬激活参与了氢抑制LPS诱导小鼠巨噬细胞炎症反应的过程。
简介:摘要目的研究神经病理性疼痛(NP)大鼠模型中是否存在神经细胞的铁死亡,探究O3治疗NP的机制。方法选取60只雄性SD大鼠,随机平均分为3组:神经病理性疼痛模型组(NP组)、假手术组(Sham组)及臭氧组(O3组)。NP、O3组采用坐骨神经结扎术构建神经病理性疼痛模型;Sham组行假手术。O3组术后,在损伤处局部注射15 μl O3(40 μg/ml),NP和Sham注射等量空气,均为术后1次/d。于术前1 d(T0)及术后1、3、7、14 d(T1~T4)测定模型大鼠的机械缩足反应阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL)。取大鼠脊髓节段,采用Western Blot检测T1~T4时的谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)的表达水平,采用免疫荧光技术检测T4时脊髓背角内NeuN+神经元细胞数,采用透射电镜分析T4时脊髓背角内铁死亡特异性改变,采用铁死亡试剂盒检测T1~T4时脊髓背角内铁沉积情况。结果与Sham组相比,NP组和O3组大鼠:T2~T4时MWT降低,TWL缩短;T4时脊髓背角NeuN+神经元数量减少;T4时神经细胞线粒体出现铁死亡特异性改变;T2~T4时神经组织内铁含量增高。与Sham组相比,NP组大鼠GPX4水平降低,ACSL4水平升高。与NP组比较,O3组大鼠:T2~T4时MWT升高,TWL延长;T2~T4时GPX4水平升高,ACSL4水平降低;T4时脊髓背角NeuN+神经元细胞数量增加;T4时神经细胞线粒体萎缩程度改善;T2~T4时神经组织内铁含量降低。上述结果均有统计学意义(均P<0.05)。结论O3可能通过抑制铁死亡的形式,治疗神经病理性疼痛。
简介:摘要目的探讨CT引导下背根神经节(DRG)行连续射频(CRF)和脉冲射频(PRF)对胸背部带状疱疹后神经痛(PHN)患者的疗效和安全性。方法收集2013年1月至2018年12月天津医科大学第二医院疼痛治疗中心确诊的胸背部PHN患者116例,将其分为倍他米松组(B组,n=37)、连续射频热凝组(CRF组,n=39)、脉冲射频调控组(PRF组,n=40)。根据疼痛范围及脊神经节段性分布确定神经痛受累节段,3组均在CT引导下经皮椎间孔内穿刺,B组给予复方倍他米松,CRF组和PRF组分别对DRG行连续射频和脉冲射频各360 s,同时注射复方倍他米松。于治疗前和治疗后1、7 d及1、3个月时进行视觉模拟评分(VAS),治疗后3个月时评价优良率和有效率,以及观察并发症情况。结果与治疗前比较,B组治疗后1和7 d时VAS降低、CRF组和PRF组治疗后1、7 d及1、3个月时VAS降低;与B组比较,CRF组和PRF组治疗后1、7 d及1、3个月时VAS降低(P均<0.05)。B组、CRF组和PRF组治疗后3个月有效率分别为51%(19/37例)、85%(33/39例)和83%(33/40例),优良率分别为22%(8/37例)、72%(28/39例)和63%(25/40例)。CRF组中13例出现神经支配区感觉减退,5例出现痛性麻木,1例出现神经损伤伴同侧下肢感觉和运动障碍;PRF组6例出现神经支配区感觉稍减退,B组5例出现神经支配区感觉稍减退。结论CT引导下经皮穿刺椎间孔内近DRG行CRF和PRF复合复方倍他米松给药治疗胸背部PHN疗效均优于单纯复方倍他米松给药,PRF术后并发症发生率低于CRF,安全性较高。