简介:摘要目的探究分析淋巴细胞结合增强因子(LEF1)和钙黏蛋白相关蛋白(CTNNB1)表达水平与食管癌细胞周期阻滞、细胞凋亡、放射抵抗的关系及相关作用机制。方法构建LEF1、CTNNB1重组表达质粒和空载质粒,分别转染食管癌细胞,采用RT-PCR实验检测质粒转染效率;分别采用克隆形成实验、CCK8实验、流式细胞周期实验、流式细胞凋亡实验、Western Blot实验检测转染前后食管癌细胞放射抵抗能力、增殖能力、细胞周期变化、细胞凋亡能力的差异。结果pGEX-LEF1+pCMV6-CTNNB1组(下称实验组)食管癌细胞克隆集落细胞存活率明显优于其他各组(P<0.05);实验组细胞在72 h、96 h、120 h时增殖能力明显优于pGEX+pCMV6组、pGEX-LEF1+pCMV6组及pCMV6-CTNNB1+pGEX组细胞(P<0.05);实验组细胞中发生G2期阻滞细胞占比明显优于其他各组(P<0.05);实验组食管癌细胞凋亡比例明显低于pGEX+pCMV6组、pGEX-LEF1+pCMV6组及pCMV6-CTNNB1+pGEX组水平(P<0.05);实验组食管癌细胞中Bax、Caspase3蛋白表达水平明显低于pGEX+pCMV6组、pGEX-LEF1+pCMV6组及pCMV6-CTNNB1+pGEX组水平(P<0.05),实验组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显优于其他各组细胞(P<0.05)。结论LEF1、CTNNB1可通过介导Wnt信号通路,调控放射后食管癌细胞的增殖和G2期细胞阻滞,通过减少细胞凋亡,提高细胞的放射抵抗能力。
简介:摘要目的探讨高压氧(HBO)联合紫杉醇(PTX)对体外培养的人胃癌AGS细胞株增殖、活性氧水平(ROS)及细胞周期的影响。方法体外培养人胃癌AGS细胞完成后,将细胞分为4组:对照组、PTX组、HBO组和HBO+PTX组。采用CCK-8法检测HBO和PTX联用对胃癌AGS细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测细胞内ROS水平和细胞周期阻滞情况,Western blotting实验检测AGS细胞内细胞周期相关蛋白的表达水平。结果HBO+PTX组AGS细胞存活率明显低于对照组和HBO组(P<0.01),也低于PTX组(P<0.05);HBO+PTX组AGS细胞内ROS水平明显高于对照组和HBO组(P<0.01),也高于PTX组(P<0.05)。PTX将AGS细胞周期阻滞在S期(P<0.05),同时发现HBO+PTX组S期占比略高于PTX组(P>0.05)。HBO+PTX组Cyclin A1表达量明显低于其他3组(P<0.05或P<0.01),CDK2表达量低于对照组和HBO组(P<0.05),略低于PTX组(P>0.05)。结论HBO能够有效增强PTX对AGS细胞的增殖抑制作用,提高AGS细胞内ROS水平,并阻滞细胞周期,从而抑制AGS细胞的分裂与增殖。
简介:摘要目的探讨高压氧(HBO)处理胃癌AGS细胞对伊立替康(ITC)耐药性的影响及其调控机制。方法体外培养胃癌AGS细胞,按照实验设计分为:对照组、HBO组、ITC组及HBO+ITC组。采用CCK-8法检测ITC联合HBO对胃癌AGS细胞增殖率的影响,流式细胞术检测AGS细胞凋亡率的变化,Western blotting实验检测AGS细胞内凋亡及耐药相关蛋白表达量的变化。结果HBO+ITC组AGS细胞的增殖率明显低于对照组和HBO组(P<0.01),也低于ITC组(P<0.05)。HBO+ITC组AGS细胞凋亡率明显高于对照组和HBO组(P<0.01),也高于ITC组(P<0.05)。ITC组和HBO+ITC组凋亡及耐药相关蛋白Bcl-2、caspase-9和P-gp在AGS细胞内的表达量明显降低,而Bad、caspase-3和PARP表达量明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与对照组和HBO组比较,ITC组p-JNK表达量升高,STAT3表达量降低(P<0.01);与ITC组比较,HBO+ITC组p-JNK表达量升高,STAT3表达量降低(P<0.05或P<0.01)。结论HBO能够协同ITC抑制胃癌AGS细胞的增殖,通过调控JNK/STAT3信号通路影响AGS细胞凋亡,并在一定程度上改善其耐药性。
简介:摘要目的分析泮托拉唑联合氨甲苯酸治疗急性上消化道出血(AUGIH)的临床效果。方法抽取2019年1月至2020年12月商丘市第一人民医院收治的60例AUGIH患者为研究对象,以随机数字表法分为观察组和对照组,每组30例。两组均接受常规治疗,在此基础上,对照组采用泮托拉唑治疗,观察组采用泮托拉唑联合氨甲苯酸治疗,均治疗3 d。比较两组的临床指标(止血时间、输血量、住院时间及再出血率);比较两组治疗前及治疗后3 d的炎症指标[超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平]及Blatchford评分;比较两组治疗期间的不良反应发生率。结果与对照组比较,观察组止血、住院时间较短,输血量较少(P<0.05);两组再出血率比较差异未见统计学意义(P>0.05)。治疗后3 d,两组血清hs-CRP、TNF-α、IL-6水平及Blatchford评分均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生率比较差异未见统计学意义(P>0.05)。结论泮托拉唑联合氨甲苯酸治疗AUGIH可提高止血效率,减少输血量,降低炎症反应,改善患者病情程度,缩短住院时间。
简介:摘要目的检测食管癌组织中细胞命运决定因子(DACH1)基因的甲基化状态,分析其与患者临床病理特征及预后的关系。方法收集104例食管癌患者的肿瘤组织、癌旁组织和正常食管黏膜组织标本,用甲基化特异性PCR检测DACH1基因的甲基化状态。采用单因素分析和多因素Logistic回归模型分析其与患者临床病理特征的相关性;用Kaplan-Meier生存曲线分析食管癌患者DACH1甲基化状态与预后生存期的关系。结果食管癌肿瘤组织中DACH1基因的甲基化率为30.77%(32/104),高于癌旁组织的1.92%(2/104)和正常食管黏膜组织的0%(0/104)(P<0.05)。食管癌组织中DACH1甲基化状态与患者的年龄、性别、病理类型无关(P>0.05),而与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。肿瘤的分化程度、TNM分期、淋巴结转移是DACH1基因甲基化状态的独立风险因素且均与DACH1基因甲基化状态相关。截止至2020年3月,104例食管癌患者中共死亡89例。其中DACH1基因甲基化的食管癌患者中位生存时间为22个月,低于DACH1基因未甲基化者的34个月(P<0.05)。结论食管癌中存在的DACH1甲基化过程可能参与食管癌的发生发展。患者的肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移是DACH1基因甲基化状态的独立风险因素。DACH1基因未甲基化的患者具有更长的预后生存期。
简介:摘要目的探讨miR-181a-5p靶向羧基末端区域小磷酸化酶样蛋白(carboxy-terminal domainsmall phosphatase-like, CTDSPL)基因介导TGF-β信号通路对胃肠道间质瘤发生发展的影响。方法选择2016年1月至2019年12月于商丘市第一人民医院行手术治疗的胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)患者作为研究对象,术中取患者的肿瘤组织和癌旁正常组织。分析患者的临床病理资料;采用定量实时聚合酶联反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测CTDSPL基因mRNA和miR-181a-5p的表达量;采用western blot法检测CTDSPL基因及TGF-β信号通路相关因子的蛋白表达水平。将人胃肠道间质瘤细胞系(GIST-T1)分别转染miR-181a-5p mimic、miR-181a-5p inhibitor和CTDSPL过表达载体。MTT检测各组细胞增殖活力,Transwell检测各组细胞侵袭,流式细胞术检测各组细胞凋亡。结果相对于癌旁组织,GIST患者的肿瘤组织中miR-181a-5p及TGF-β信号通路相关因子表达增强,CTDSPL表达被抑制。肿瘤大小、浸润深度和改良NIH分级与GIST肿瘤组织CTDSPL基因mRNA表达量有关(P均<0.05)。相对于Blank组,敲除miR-181a-5p或过表达CTDSPL能抑制癌细胞增殖活力和侵袭,诱导细胞凋亡,而miR-181a-5p mimic对GIST-T1细胞的作用能被CTDSPL过表达挽救。结论miR-181a-5p可通过下调CTDSPL基因表达水平,激活TGF-β信号通路促进GIST的发生、发展。