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301 个结果
  • 简介:应用AFLP、SRAP、RAPD、SSR同工酶等5种标记构建326个标记位点白菜遗传图谱和81个DH株系群体,采用MapQTL5软件与MQM作图法对白菜叶片数与单株重进行QTL定位遗传效应分析。结果表明,通过个不同年份试验,10个连锁群上共检测到20个QTL,主要分布R5、R9连锁群上:控制叶片数5个,控制单株重15个;其中,获得年稳定表达QTL共6个:控制叶片数有1个,控制单株重5个;另外,估算了单个QTL遗传贡献率和加性效应,发现各QTL加性效应各不相等,各位点遗传贡献率介于9.4%~39.6%之间;控制叶片数控制单株重QTL位点表现为紧密连锁或相似的位置,主要集中R5连锁群上,这与二者性状表型值相关系数很高相致。这将为白菜品种改良中产量等性状分子标记辅助选择提供理论依据。

  • 标签: 大白菜 DH群体 白菜叶片数 单株重 QTL
  • 简介:本研究利用以0—153父本和SGK9708母本构建196个陆地棉重组自交系(F6:8)材料对棉籽油含量和蛋白质含量进行了遗传分析和QTL定位。通过四个环境下群体材料棉籽油含量和蛋白质含量分析表明棉籽油含量和蛋白质含量均为典型数量性状,其中棉籽油含量存在超低亲本超亲分离,而其蛋白质含量呈现超高亲本超亲分离。相关性分析显示棉籽油含量和蛋白质含量呈极显著负相关,同步提高棉籽含量较为困难。基于包含186个标记,总长827.84cM,标记间平均距离4.45cM,覆盖棉花基因组18.6%遗传连锁图谱,应用WinQTLcart2.5软件对四个环境下棉籽油含量和蛋白质含量进行了QTL定位,共检测到8个油含量QTLs,解释表型变异5.42%~13.15%,其中稳定QTL1个。4个蛋白质含量QTLs,解释表型变异4.35%~14.93%。本研究结果可为进行陆地棉种子营养品质性状分子遗传改良奠定基础。

  • 标签: 陆地棉 重组自交系 棉籽油分 蛋白质 QTL
  • 简介:橡胶树起源热带雨林,对低温敏感。中国橡胶树(Heveabrasiliensis)种植受到严重低温胁迫影响,而CBF/DREB1(C-repeatbindingfactor/dehydrationresponsiveelementbindingfactor1)是低温信号通路中重要转录因子,但目前橡胶树中仅克隆到HbCBF1。本研究从橡胶树中克隆出个新CBF家族基因HbCBF2和HbCBF3。经测序,HbCBF2和HbCBF3别编码了234个和242个氨基酸。氨基酸序列分析表明HbCBF2和HbCBF3均含有CBF家族特有个短肽序列包括个保守DNA结合结构域和NLS簇。通过构建进化树发现HbCBF2、HbCBF3与HbCBF1以及拟南芥中CBF序列同源性很高。将HbCBF2和HbCBF3构建到pGEX4T-1原核表达载体上,Transetta(DE3)中进行表达。SDS-PAGE电泳检测它们蛋白质表达量51.8kD和53kD,与预期致。对蛋白诱导条件进行优化,构建融合表达质粒pGEX4T-1-CBF2和pGEX4T-1-CBF3,28℃、IPTG浓度0.4mmol/L情况下表达量最佳。实验纯化蛋白和研究HbCBF2和HbCBF3橡胶树中功能提供理论帮助。

  • 标签: 巴西橡胶树 CBF 原核表达
  • 简介:对香蕉束顶病毒(BBTV)广州分离MGHDNA组分6全序列进行了克隆序列分析。对来自广州、海南、台湾、澳大利亚印度BBTV组分6进行了分析,结果表明:BBTV组分6都含有CR-SL(stem-loopcommonregions),CR-M(majorcommonregions)结构等典型特征序列。BBTV组分6核苷酸全序列、开放阅读框(ORF)核苷酸、CR-M核苷酸序列及其氨基酸序列系统进化树结果显示,BBTV分离可分为2个组群:亚洲组和南太平洋组。CR-M结构2个组群间有明显差异,南太平洋组分离CR-M结构中有段不完全保守16个核苷酸重复序列,而在亚洲组分离中这个序列并不重复。对BBTV组分6蛋白质进行了二级结构预测和理化性质分析发现,这2个类群蛋白质二级结构有差异,但是理化性质无明显差异。

  • 标签: 香蕉束顶病毒 DNA组分6 克隆 分离物
  • 简介:干旱应答元件结合蛋白(dehydrationresponsiveelementbindingprotein,DREB),植物应对干旱、盐碱和低温胁迫反应中起非常重要调控作用。利用已知甘蔗栽培种DREB2转录因子序列,设计引物,按照同源克隆方法,获得了2个割手密DREB2基因组DNA序列,分别命名为SsDREB2-a和SsDREB2-f(GenBank登录号分别为:KU963272和KU963277)。序列分析结果表明,SsDREB2-a基因序列全长1578bp,SsDREB2-f基因序列全长1729bp,2个基因均包含1个内含子和2个外显子。SsDREB2-a和SsDREB2-f基因cDNA序列全长分别为824bp和971bp,均编码262个氨基酸。序列比对分析显示,2个基因序列相似性96.6%,编码蛋白相似性98.9%,存在3个氨基酸变异位点。系统进化分析结果显示,割手密DREB2转录因子与高粱、牛鞭草、斑茅、玉米等植物DREB2转录因子同源关系最近。基因获得步了解DREB2基因表达与割手密抵御非生物胁迫能力之间关系奠定了基础。

  • 标签: 割手密 DREB2 基因克隆 比较分析
  • 简介:真核生物起始因子(eIF)种类多复杂,广泛参与真核生物翻译起始进程,并在植物生长发育调控过程中发挥重要功能。本研究前期通过酵母双杂交从水稻cDNA文库筛选到个可能调控根系生长发育起始因子,CDS全长828bp,该基因编码水稻eIF3g亚基,命名为OseIF3g1。利用RT-PCR技术进行克隆,将该基因全长CDS通过BamHⅠ和SmaⅠ酶切位点连接至植物表达载体pBI121,经双酶切验证后确认已成功构建转基因过表达载体,该基因后续遗传转化相关功能研究提供基础。

  • 标签: 水稻 eIF3g亚基 基因克隆 载体构建
  • 简介:对大豆花叶病毒SMV抗性遗传研究直是大豆抗病遗传研究热点之。本研究以哈91R3—301×黑农41组合构建了遗传群体,其F2离单株SSR标记基因型基本符合1:2:1比例,说明这个群体没有偏分离。根据F3株系病情指数分布推测SMV3F2成株抗性似乎由多基因控制。根据SSR分子标记基因型和F23株系对SMV3抗病性表型结果连锁分析,推测Satt296是与大豆花叶病毒(SMV)3号株系抗性主基因连锁分子标记,应用Joinmap作图软件将该标记定位在D1b连锁群上,这结果与部分文献报道研究结果致。本研究获得与抗性基因连锁分子标记在其他RIL群体中验证得到了初步证实,推测定位在D1b连锁群上抗性座位可能是控制SMV3主基因之,该标记可望应用于大豆抗SMV3分子标记辅助选择。

  • 标签: 大豆 大豆花叶病毒 SMV3抗性遗传 SSR标记
  • 简介:本研究以6个月巨桉无性系GL1苗木试验材料,外源施加赤霉素到巨桉茎部,通过组织化学分析其对木质部发育影响。外施GA3浓度1.0-10.0mg/L时能够显著促进桉树茎伸长,外施1.0mg/LGA3时,新生木质部中纤维细胞数量显著增加,而纤维细胞直径没有变化,组织化学分析表明木质部细胞增加主要是通过细胞分裂增加纤维细胞数量方式,新生木质部导管分子数量和直径并没有显著增加。同时GA3处理会引起新生木质部中S-木质素和G-木质素含量降低,GA3并不能显著促进巨桉新生木质部细胞中纤维细胞和导管分子伸长。这些研究说明赤霉素通过调控细胞分裂和次生细胞壁成分合成来调控巨桉次生木质部发育。

  • 标签: 赤霉素 巨桉 木质部 纤维细胞 导管分子
  • 简介:WRKY转录因子是高等植物中最重要转录因子基因家族之,植物应对生物胁迫(病原菌和病毒等)和非生物胁迫(干旱,盐害,冷害和热害等)等系列逆境应答进程中发挥重要作用。目前高等植物中WRKY转录因子调控植物应答生物胁迫和非生物胁迫中相关功能进行了总结。目前已经报道WRKY转录因子功能基础上,分析了不同植物中WRKY转录因子逆境应答模式和功能特征,未来探索作物WRKY转录因子逆境应答调控机理奠定基础。

  • 标签: 植物 WRKY转录因子 胁迫应答 功能
  • 简介:本研究以普通小麦品种‘中国春’染色体组DNA封阻,用生物素(biotin-16-dUTP)标记大麦染色体组DNA作为探针,通过基因组原位杂交法解析了来自杂交组合CS×(CS+Betzes2H)杂种后代X99-13遗传组成,此材料含有42条染色体,其中1条大麦染色体,2条小麦-大麦易位染色体和39条小麦染色体,鉴定为小麦-大麦代换易位系。以小麦第二部同源群短臂探针psr131进行RFLP分析,结果表明此代换易位系是涉及小麦染色体2B和大麦染色体2H代换易位。步选育小麦-大麦2H纯合易位系利用其上α-淀粉酶抑制蛋白基因打下了坚实物质基础。

  • 标签: 小麦 大麦 代换易位系 GISH RFLP
  • 简介:DREB类转录因子是类植物中特有的,非生物逆境胁迫中起重要作用调控因子。本研究以割手密材料,采用同源基因克隆方法克隆获得2个DREB2类转录因子基因SsDREB2-1和SsDREB2-2(GenBank登录号分别为KU963264和KU963265)。序列分析表明,这2个基因长度分别为814bp和709bp,分别编码262和227个氨基酸;预测其蛋白质分子量分别为28.66kD和24.95kD,等电点(PI)分别为5.42和6.47。氨基酸亲水/疏水性分析表明,这2个转录因子属于亲水性蛋白。多序列比对分析表明,基因序列相似性98.7%。原核表达分析表明,这2个基因编码区能正常表达出目的蛋白,说明得到2个基因为功能基因而非假基因。

  • 标签: 割手密 DREB 基因克隆 原核表达
  • 简介:解析穗粒数、小穗数和粒重及其QTLs间遗传关联,有利于大麦穗发育遗传和标记辅助选择研究。本研究采用SPSS19.0软件分析了25份试验材料小穗数、千粒重和穗粒数表型差异,以及不同性状及其QTLs间遗传关联性。结果表明小穗数等3个性状具有显著或极显著差异,育种品种小穗数和穗粒数与地方品种没有明显差异,大多数育成品种千粒重显著或极显著高于地方品种,二棱大麦小穗数、穗粒数和千粒重没有显著差异,但六棱大麦具有显著或极显著差异;小穗数与穗粒数极显著正相关,偏相关系数0.835;试验材料中共检测到4个小穗数QTLs、6个穗粒数QTL和6个千粒重遗QTLs,16个QTLs分别位于1H、2H和4H等6条染色体上,其中QSn-4HS等8个QTLs具有增效作用、其余QTLs具有减效作用。与标记HVM40-258bp连锁QTL对小穗数和穗粒数具有因多效特性性。小穗数等3个穗部性状分别受遗传效应不同QTLs控制,QTL多效性导致了小穗数与穗粒数关联遗传。

  • 标签: 大麦品种(或品系) 穗部性状差异 SSR标记 关联分析 QTLs检测
  • 简介:Gigantea(GI)是植物进行正常生命活动重要基因,编码种新细胞核蛋白。研究发现该基因参与着植物开花、生理节律变化、耐逆作用等多个分子调控反应。本文综述了GI控制植物开花、生理节律调控以及耐氧化、耐冻、耐盐碱和耐干旱等非生物胁迫条件下功能与作用最新研究进展,阐述了GI不同类型植物中功能异同性,以期步了解GI结构与功能,以及开展后续相关研究提供参考和建议。

  • 标签: Gigantea 开花 生理节律 非生物逆境
  • 简介:为了研究M9矮化砧和八棱海棠砧YUCCA10a基因结构特征及其嫁接树体表达特征,从M9矮化砧和八棱海棠砧中克隆了YUCCA10a基因,对该基因进行了序列分析以及不同时期2种砧木嫁接“烟富3定量表达分析。通过分析表明,该基因编码序列为1149bp,推导编码382个氨基酸,预测蛋白质分子量94285.29Da,理论等电点5.08。实时荧光定量PCR结果表明,5月和10月份M9矮化砧嫁接“烟富3”中YUCCA10a基因相对表达量明显低于八棱海棠砧,2种砧木嫁接“烟富3”中YUCCA10a基因在10月份相对表达量略高于5月份。本试验结果研究M9矮化砧和八棱海棠砧YUCCA10a基因结构特征和砧木对嫁接“烟富3”影响机理方面提供理论依据。

  • 标签: YUCCA10a 苹果砧木 克隆 定量表达
  • 简介:白粉是威胁我国小麦生产最主要病害之。筛选和培育抗病品种是防治小麦白粉条安全有效途径。Pm21是目前最有效抗白粉主效基因之,加快其小麦育种中应用,对我国小麦生产具有重要意义。本研究目的在于将普通小麦——簇毛麦易位系92R137中抗白粉基因Pm21导入农艺性状好、产量较高、较易感白粉农大系列小麦品种中。92R137与农大系列小麦品种回交代利用Pm21SCAR1265标记进行检测,筛选山含有抗白粉基因Pm21单株,进行辅助育种应用研究,经次回交和标记辅助选择,从农大3291/92R137//农大3291:组合后代中选出具有Pm21基冈产量性状好品系13个,从农大3214/92R137H农大3214^2组合选出9个,从农大3213/92R137//农大3213。组合选出35个,从农大3197/92R137//农大3197^2组合选出8个,从农大3383/92R137//农大3383^2组合选出15个,从农大3308/92R137//农大3308^2组合选出2个共计82个进入初步产量鉴定,根据初步产量结果和农艺性状表现选出9个优系参加2005年秋播产量试验。

  • 标签: 标记辅助选择 普通小麦 白粉病抗性 Pm21基因
  • 简介:鉴定合成或通过高通量随机组合方法获得潜在功能片段生物学功能需要套高效便捷酵母表达专用载体。酵母表达载体pYES2多克隆位点处不含起始密码子,通过设计含有ATG和EcoRⅠ酶切位点特异性引物扩增段Intron,利用In-Fusion重组技术(Clontech)将该片段构建至酵母表达载体pYES2,得到个含有ATG重组酵母表达载体pYES2-ATG。为了检测该载体功能,扩增不含起始密码子DNA序列nlea,该序列由本实验室设计合成,具有潜在耐盐功能。构建重组表达载体pYES2-ATG-nlea酵母中进行功能鉴定。研究结果表明,半乳糖诱导后,含pYES2-ATG-nlea重组酵母菌株耐盐能力明显高于含pYES2-ATG空质粒菌株,表明该载体系统添加了起始密码子nlea成功表达,具有耐盐性,同时也证明改造载体系统可用于没有起始密码子编码区序列功能筛选和鉴定。pYES2-ATG酵母载体系统不影响原始载体基本功能元件表达,同时能使不含起始密码子编码区序列酵母中正常表达,大规模进行多个基因功能鉴定中具有重要应用价值。

  • 标签: 起始密码子 酿酒酵母 pYES2 In-Fusion重组技术
  • 简介:研究黄金茶出芽早分子机制,本研究采用SMART-RACE技术,获得了与解除休眠相关转录因子CsDAM2基因全长eDNA序列,并进步对该氨基酸序列进行了生物信息学分析。研究发现CsDAM2基因全长1386bp,序列分析表明,该序列含有个完整编码区,大小657bp,编码区GC含量50.45%。此编码区可以编码分子量24.86kD亲水性蛋白,该蛋白由218个氨基酸组成,理论等电点(pI)8.96。黄金茶CsDAM2蛋白有11个磷酸化位点,属跨膜蛋白,与毛白杨DAM3相似性71%,与已登录茶树MADS.box蛋白致性35%。本研究步揭示黄金茶春芽萌发早分子机制提供了理论依据。

  • 标签: 黄金茶 CsDAM2基因 全长克隆 序列分析
  • 简介:本研究利用SSR标记对15份葡萄种质进行了遗传多样性分析。从30对SSR引物中筛选出11对多态性引物,共扩增出107条带。每对引物可检测到等位位点数4~22,多态率75%~100%。根据SSR扩增结果,利用NTSYSpc2.10e软件进行Jaccard相似性系数分析,15份葡萄种质遗传相似系数0.20~0.98,平均遗传相似系数0.398。UPGMA聚类分析结果表明,遗传相似系数0.29处,15份葡萄材料可分为2大类群。第类包含7份山葡萄资源,2个山欧杂交品种,第二类包含3个欧亚种品种、2个欧美杂种品种和1个美洲杂种品种。由此可见,山葡萄与欧亚种、美洲杂种亲缘关系较远,欧亚种与美洲种之间亲缘关系较近。此外,引物Vmc9a2.1、VMC4F3、VMC4A1、Scu14vv分别在欧亚种‘无核白’、‘山葡萄雄株’(雄1-2,雄1-3)、山葡萄‘左山二’、山葡萄‘双丰’扩增出条特性条带,这利用SSR标记鉴定葡萄品种或品系提供了基础数据。

  • 标签: 葡萄 SSR 遗传多样性