简介：摘要目的探讨内皮前体细胞（endothelial progenitor cell，EPC）来源外泌体对高氧诱导的新生大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞（type Ⅱ alveolar epithelial cells，AECⅡ）损伤的干预作用。方法使用全外泌体分离试剂盒从大鼠EPC培养液中提取外泌体，将体外培养的新生大鼠AECⅡ分为对照组、高氧组、干预组。对照组为空气+5%CO2培养，高氧组为95%O2+5%CO2培养，干预组培养基中加入0.1 mg/ml EPC来源外泌体，并予95%O2+5%CO2培养。于2、4、6 d使用细胞增殖及毒性检测试剂盒检测AECⅡ活力、流式细胞仪检测AECⅡ凋亡。结果透射电镜观察EPC培养上清中分离的外泌体均符合外泌体的形态学特征。Dil标记EPC来源外泌体后与AECⅡ共培养24 h，在荧光显微镜下可观察到AECⅡ胞浆中有Dil荧光，提示EPC来源外泌体可以被AECⅡ摄取进入胞浆。与对照组相比，高氧组AECⅡ活力受损，细胞凋亡增加，并且损伤程度随高氧时间延长而加重（P<0.001）。EPC来源外泌体干预组细胞损伤程度低于高氧组（P<0.001）。与对照组相比，干预组在高氧4 d、6 d时的细胞活力低于对照组（P值分别为0.029、0.005），在高氧6 d时的细胞凋亡高于对照组（P=0.007）。结论EPC来源外泌体干预可减轻高氧诱导对AECⅡ的损伤，但不能完全逆转损伤。

简介：摘要目的分析靶向乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的嵌合抗原受体(CAR)-T细胞对表达HBsAg的肝癌细胞的杀伤作用。方法构建HBsAg-CAR基因，通过慢病毒载体将其转导入T细胞(健康捐献者的血液中获取)，制备HBsAg-CAR-T细胞。制备CD19-CAR-T细胞作为Mock组，未转导的T细胞为Untransduced组。上述三种效应细胞分别与肝癌细胞共同培养，检测三组细胞对肝癌细胞的杀伤作用及抗肿瘤细胞因子(肿瘤坏死因子-α、干扰素-γ、白细胞介素2等)释放水平。建立免疫缺陷NPG小鼠PLC/PRF/5肝癌皮下成瘤模型，随机分组，尾静脉注射HBsAg-CAR-T细胞(实验组，n＝5)或未转导的T细胞(对照组，n＝5)，注射后第15天测量肿瘤体积。结果体外培养过程中，HBsAg-CAR-T细胞具有较高的增殖能力及存活率，CAR的表达稳定。与表达HBsAg的肝癌细胞共培养后，HBsAg-CAR-T组释放的抗肿瘤细胞因子明显高于Mock组及Untransduced组，差异均有统计学意义(均P<0.05)；HBsAg-CAR-T组对HBsAg表达阳性的肝癌细胞的杀伤率明显高于Mock组及Untransduced组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。实验组NPG小鼠肿瘤体积为(250.8±62.8)mm3，低于对照组小鼠肿瘤体积(757.5±102.6)mm3，差异有统计学意义(P<0.05)。结论HBsAg-CAR-T细胞能够特异性识别并杀伤HBsAg阳性肝癌细胞，并释放高水平的抗肿瘤细胞因子。

简介：摘要患儿8月龄起病以脾脏、淋巴结和腮腺肿大为突出表现，伴反复发热、窦肺感染、贫血和血小板减少，外周血多克隆性B细胞增殖。基因检出半胱天冬酶募集结构域11基因第5外显子新发杂合变异（c.368C>T，p.G123D），父母为野生型，诊断NF-κB相关B细胞增殖和T细胞失能性疾病。经10年利妥昔单抗治疗，淋巴增殖控制良好。

简介：摘要自体造血干细胞移植(auto-HSCT)被广泛应用于血液系统疾病的临床治疗，但仍有部分患者面临治疗失败。人体外周血中造血干细胞(HSC)含量极少，必须通过动员才能促使HSC从骨髓释放到外周血。HSC动员是auto-HSCT的关键过程，其动员效率和采集量对auto-HSCT成功，以及移植后转归均有重大影响。由于动员能力差导致的外周血CD34+细胞计数低是auto-HSCT失败的主要原因之一。auto-HSCT中回输HSC数量不足，可能影响患者的长期预后。在采集前使用新型HSC动员剂普乐沙福抢先治疗，可有效降低HSC动员失败率。笔者拟就auto-HSCT现状、HSC动员现状、外周血CD34+细胞计数在HSC采集中的作用进行综述，旨在为临床中外周血HSC动员不佳患者的识别和指导合理的普乐沙福抢先干预提供理论依据。

简介：摘要嵌合抗原受体（CAR）-T细胞免疫治疗是近年来肿瘤治疗领域一个举世瞩目的重大成果。流式细胞术（FCM）在CAR-T细胞免疫治疗相关检验的每一个步骤中都起到非常重要的作用，包括靶点筛查、CAR-T细胞产品成分鉴定、毒性预估、微小残留病（MRD）检测、免疫功能评价、免疫微环境研究等。为了深刻认识FCM在CAR-T细胞免疫治疗这一新兴领域的作用，规范每一项应用中的操作，进一步促进其在CAR-T细胞免疫治疗中的应用，中国中西医结合学会检验医学专业委员会制定了此专家共识。

简介：摘要目的探讨血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤（AITL）累及胃肠道的临床病理学特点、诊断及预后。方法收集郑州大学第一附属医院2021年9月诊断的1例肠道活检的AITL，复习临床特点，行HE染色、免疫组织化学、EB病毒编码的RNA（EBER）原位杂交、T细胞受体（TCR）基因重排（BIOMED2法）及二代测序检测1 166个基因，并复习总结文献中报道的AITL累及胃肠道的特征。结果患者女，53岁，肠镜示回盲部至直肠多发结节状、息肉样隆起；HE示典型AITL的形态，肿瘤主要浸润黏膜固有层，局部侵及黏膜下层，未见固有腺体侵犯及黏膜表面溃疡；免疫组织化学：肿瘤细胞表达T系标志物（CD3、CD4、CD5）及滤泡辅助T细胞标志物（PD-1及CXCL13），CD21示滤泡树突状细胞网增生紊乱，Ki-67阳性指数约40%；EBER原位杂交见散在细胞阳性；二代测序检测发现3组融合基因：EIF4E3-FOXP1、RP11-434C1.1-ETV6、RP11-380O24.1-SRGAP3。随访2个月，患者化疗1个疗程后因肠出血死亡。结论胃肠道部位AITL罕见，常为淋巴结AITL累及所致，患者预后差，形态学及免疫表型与淋巴结AITL相似，结合患者临床表现、组织学特点及基因检测可避免漏诊及误诊。

简介：摘要富于上皮样组织细胞成分的结外NK/T细胞性淋巴瘤，鼻型（ENKTL）十分罕见，尤其在小活检组织中应提高警惕，需充分结合临床、影像学评估、免疫组织化学染色和原位杂交EB病毒编码的小RNA原位杂交以避免误诊和漏诊。本文报道2例形态上易误诊的ENKTL，并复习相关文献，以期加强对该疾病少见特征的认识。

简介：摘要目的探讨核因子白细胞介素3调节因子(NFIL3)对人乳腺癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法采用慢病毒载体构建过表达及敲减NFIL3乳腺癌细胞系BT549和Hs578T(中国科学院上海细胞库)，以荧光定量聚合酶链反应(PCR)及蛋白印迹实验(Western blot)进行验证。通过细胞计数试剂盒(MTT)检测细胞增殖、小室细胞迁移实验(Transwell)和侵袭实验以及动物模型裸鼠皮下荷瘤和鼠尾静脉肺转移实验，验证NFIL3对乳腺癌细胞增殖和侵袭能力。组间比较采用t检验及One-way ANOVA检验。结果MTT细胞增殖实验证实，过表达NFIL3组与对照组相比促进细胞增殖(BT549-对照4.37±0.27比BT549-NFIL3 5.98±0.31，t＝6.783，P<0.01；Hs578T-对照4.75±0.32比Hs578T-NFIL3 6.05±0.39，t＝4.463，P<0.05)，敲减NFIL3抑制细胞增殖(BT549-PLKO 4.17±0.20比BT549-sh1 2.83±0.29，t＝6.557，P<0.01；BT549-PLKO 4.17±0.20比BT549-sh2 3.11±0.17，t＝4.943，P<0.01；Hs578T-PLKO 4.11±0.31比Hs578T-sh1 3.11±0.21，t＝12.540，P<0.01；Hs578T-PLKO 4.11±0.31比Hs578T-sh2 3.01±0.23，t＝10.930，P<0.01)；Transwell细胞迁移证实，过表达NFIL3组与对照组比较促进细胞迁移[BT549-对照(198.00±28.03)个比BT549-NFIL3 (397.00±52.10)个，t＝10.640，P<0.01；Hs578T-对照(294.00±32.01)个比Hs578T-NFIL3 (598.00±46.11)个，t＝17.130，P<0.01]，敲减NFIL3抑制细胞迁移[BT549-PLKO (178.00±23.11)个比BT549-sh1 (41.01±15.12)个，t＝9.820，P<0.01；BT549-PLKO (178.00±23.11)个比BT549-sh2 (56.10±24.27)个，t＝10.430，P<0.01；Hs578T-PLKO (197.60±21.13)个比Hs578T-sh1 (69.80±19.96)个，t＝8.403，P<0.01；Hs578T-PLKO (197.60±21.13)个比Hs578T-sh2 (58.00±14.26)个，t＝8.042，P<0.01]；Transwell细胞侵袭证实，过表达NFIL3组与对照组比较促进细胞侵袭[BT549-对照(74.6±23.14)个比BT549-NFIL3 (142.50±28.30)个，t＝5.874，P<0.01；Hs578T-对照(103.20±28.14)个比Hs578T-NFIL3 (183.70±22.14)个，t＝7.110，P<0.01]，敲减NFIL3抑制细胞侵袭[BT549-PLKO (89.13±19.86)个比BT549-sh1 (37.45±15.63)个，t＝9.062，P<0.01；BT549-PLKO (89.13±19.86)个比BT549-sh2 (50.17±17.12)个，t＝8.067，P<0.01；Hs578T-PLKO (135.10±16.52)个比Hs578T-sh1 (47.10±16.30)个，t＝6.747，P<0.01；Hs578T-PLKO (135.10±16.52)个比Hs578T-sh2 (58.45±14.13)个，t＝6.598，P<0.01]。过表达NFIL3组与对照组比较促进裸鼠皮下肿瘤生长[Hs578T-对照(0.126±0.017) g比Hs578T-NFIL3 (0.301±0.098) g，t＝3.934，P<0.01]，敲减NFIL3组抑制裸鼠皮下肿瘤生长[Hs578T-PLKO (0.190±0.078) g比Hs578T-sh (0.040±0.019) g，t＝4.168，P<0.01]；过表达NFIL3组与对照组比较，增加鼠尾静脉肺转移瘤形成数量[Hs578T-对照(1.45±0.98)个比Hs578T-NFIL3(4.12±1.79)个，t＝4.137，P<0.01]，敲减NFIL3组减少鼠尾静脉肺转移瘤形成数量[Hs578T-PLKO(1.53±1.21)个比Hs578T-sh(0.34±0.27)个，t＝3.035，P<0.05]。结论NFIL3在乳腺癌细胞系中具有促进癌细胞增殖、迁移和侵袭的能力。

简介：摘要目的观察白细胞介素-33(IL-33)在胆囊癌组织中的表达，并探讨沉默IL-33的表达对胆囊癌细胞增殖、侵袭和上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法收集20例通过手术切除的胆囊癌组织标本，采用免疫组织化学技术检测组织中IL-33的表达，然后将IL-33小干扰RNA(siRNA)转染进人胆囊癌GBC-SD细胞，通过实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)法筛选出沉默效率较高的一条siRNA用于后续实验。将实验分为IL-33 siRNA组、未转染组(Blank组)和阴性对照组(NC组)，通过细胞计数试剂盒(CCK-8)法和Transwell小室法分别探索siRNA沉默IL-33后对胆囊癌细胞增殖和侵袭能力的影响。通过蛋白质印迹(Western blot)法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达水平。率的比较采用χ2检验，两组以上数据采用单因素方差分析，使用Bonferroni法进行组间两两比较。结果IL-33在胆囊癌组织中的阳性表达率(90%)高于正常组织(40%)，差异有统计学意义(χ2＝8.901，P<0.05)。IL-33 siRNA组胆囊癌细胞在24、48、72 h的吸光度值和侵袭数目显著低于Blank组和NC组(24 h吸光度值分别为1.25±0.07、1.49±0.05、1.48±0.08，48 h吸光度值分别为1.51±0.02、2.15±0.10、2.08±0.02，72 h吸光度值分别为1.80±0.05、2.38±0.07、2.31±0.10，侵袭数目分别为50.25±9.29、243.00±24.32、217.25±14.97)，差异有统计学意义(F＝12.150、101.400、41.790、145.700，P<0.05)。IL-33 siRNA组中Vimentin的表达低于Blank组和NC组(0.66±0.01、0.87±0.06、0.86±0.04)，差异有统计学意义(F＝24.710，P<0.05)，IL-33 siRNA组中E-cadherin的表达高于Blank组和NC组(0.32±0.02、0.12±0.01、0.17±0.02)，差异有统计学意义(F＝121.000，P<0.05)。结论IL-33在胆囊癌肿瘤组织中高表达。siRNA沉默IL-33表达后，胆囊癌细胞的增殖和侵袭能力均受到了抑制，同时减弱了EMT过程。

简介：摘要目的探究LncRNA ANCR在人脑胶质瘤组织中的表达及其与细胞恶性增殖间的关系。方法收集2017年1月5日至2018年9月30日临沂市中心医院神经外科45例高级别脑胶质瘤组织作为高级别组、13例低级别脑胶质瘤组织作为低级别组、10例正常脑外伤组织作为正常组，荧光定量PCR技术（qPCR）检测组织中ANCR及潜在的eIF4B的表达。体外采用慢病毒转染shRNA表达载体，在人高级别脑胶质瘤U251细胞中构建对照细胞及ANCR干扰细胞株，作为本研究的对照组、实验1组及实验2组细胞，qPCR检测细胞中ANCR、eIF4B及下游分子c-Myc mRNA的表达水平，蛋白印迹实验（Western blot）检测eIF4B及c-Myc蛋白表达水平，CCK-8实验检测细胞相对增殖能力变化，平板集落形成实验检测细胞克隆形成能力变化。使用SPSS 21.0进行统计分析，组间比较采用方差分析，组内比较使用SNK-q两两比较法。结果高级别脑胶质瘤、低级别脑胶质瘤及正常脑外伤组织中ANCR mRNA的表达水平分别为0.710±0.125、2.033±0.312及3.408±0.296，而eIF4B mRNA的表达水平为0.176±0.019、0.268±0.022及0.426±0.028，ANCR及eIF4B在高级别脑胶质瘤组织中表达高于低级别脑胶质瘤及正常脑组织（P<0.001），ANCR在低级别脑胶质瘤组织中表达高于正常脑组织（P=0.013）。ANCR与eIF4B mRNA两者差异具有统计学意义（P<0.001）。对照组、实验1组及实验2组ANCR mRNA的表达分别为1.000±0.021、0.202±0.057及0.300±0.016；对照组、实验1组及实验2组eIF4B mRNA的表达分别为1.000±0.078、0.452±0.012及0.526±0.037；对照组、实验1组及实验2组c-Myc mRNA的表达分别为1.000±0.053、0.688±0.067及0.564±0.089，实验1组及实验2组细胞中ANCR、eIF4B及c-Myc mRNA及蛋白分子表达显著低于对照组细胞（P<0.001）；实验1组及实验2组细胞在72 h及96 h增殖能力显著降低，克隆形成能力显著减弱（P<0.001）。结论ANCR在高级别脑胶质瘤组织中表达显著上调，且与eIF4B表达正相关，体外干扰ANCR可介导eIF4B及c-Myc mRNA及蛋白分子的表达下降，进而抑制脑胶质瘤细胞的增殖能力。

简介：摘要目的探讨外周血循环肿瘤细胞（CTC）分型检测在肝细胞癌（以下简称肝癌）微血管侵犯术前预测中的应用价值。方法采用回顾性病例对照研究方法。收集2018年9月至2020年9月郑州大学人民医院收治的102例肝癌患者的临床病理资料；男71例，女31例；中位年龄为57岁，年龄范围为29~80岁。观察指标：（1）手术情况。（2）肝癌患者CTC检出及微血管侵犯情况。（3）CTC分型检测结果与预测肝癌微血管侵犯的最佳截断值。（4）影响肝癌微血管侵犯的相关因素分析。（5）不同间质型循环肿瘤细胞（M-CTC）计数的肝癌患者临床病理特征比较。正态分布的计量资料以x±s表示，组间比较采用独立样本t检验；偏态分布的计量资料以M（范围）或M（Q1，Q3）表示，组间比较采用非参数秩和U检验。计数资料以绝对数或百分比表示，组间比较采用χ2检验。采用受试者工作特征（ROC）曲线确定评估肝癌微血管侵犯风险的最佳截断值。单因素和多因素分析均采用Logistic回归模型。结果（1）手术情况：102例患者顺利完成手术，其中局部肝切除17例、肝段切除43例、肝叶切除22例、半肝切除13例、扩大半肝切除7例。102例患者手术时间为235（147，293）min、术中出血量为300（110，500）mL。（2）肝癌患者CTC检出及微血管侵犯情况：102例患者中，上皮型循环肿瘤细胞（E-CTC）、混合型循环肿瘤细胞（H-CTC）、M-CTC、3类循环肿瘤细胞总数（T-CTC）计数检出阳性例数分别为36、86、30、89例。术后病理学检查结果显示：102例患者中，40例微血管侵犯阳性，62例微血管侵犯阴性。40例微血管侵犯阳性患者中，E-CTC、H-CTC、M-CTC、T-CTC计数分别为0（0，1）、4（2，5）、1（0，2）、5（3，8）个/5 mL，62例微血管侵犯阴性患者中，上述指标分别为0（0，1）、3（1，5）、0（0，0）、3（2，6）个/5 mL，两类患者M-CTC、T-CTC计数情况比较，差异均有统计学意义（Z=-4.83，-2.96，P<0.05）。（3）CTC分型检测结果预测肝癌微血管侵犯的最佳截断值：采用ROC曲线确定M-CTC计数、T-CTC计数在肝癌微血管侵犯风险预测的最佳截断值分别为1个/5 mL、4个/5 mL，曲线下面积分别为0.70［95%可信区间（CI）为0.60~0.81，P<0.05］、0.67（95%CI为0.57~0.78，P<0.05），特异度分别为75.8%、60.0%，灵敏度分别为62.9%、72.5%。（4）影响肝癌微血管侵犯的相关因素分析：单因素分析结果为甲胎蛋白、天冬氨酸氨基转移酶、肿瘤最大径、肿瘤数目、肿瘤边缘、巴塞罗那临床肝癌（BCLC）分期、M-CTC计数、T-CTC计数是影响肝癌微血管侵犯的相关因素（优势比=3.13，0.43，4.92，5.65，2.54，2.93，8.25，4.47，95%CI为1.34~7.33，0.19~0.98，2.09~11.58，2.35~13.63，1.13~5.75，1.27~6.74，3.13~21.75，1.88~10.61，P<0.05）。多因素分析结果显示：肿瘤最大径>5 cm，肿瘤数目多发，M-CTC计数≥1个/5 mL是影响肝癌微血管侵犯的独立危险因素（优势比=2.97，4.14，4.36，95%CI为1.01~8.70，1.14~15.02，1.36~13.97，P<0.05）。（5）不同M-CTC计数的肝癌患者临床病理特征比较：依据M-CTC计数的最佳截断值，将102例肝癌患者分为30例高M-CTC（M-CTC计数≥1个/5 mL）和72例低M-CTC（M-CTC计数<1个/5 mL）。30例高M-CTC患者肝炎、甲胎蛋白>400 μg/L、天冬氨酸氨基转移酶>35 U/L、肿瘤边缘不规则、肿瘤最大径>5 cm、肿瘤数目多发、微血管侵犯阳性的患者例数分别为22、17、13、21、18、16、22例；72例低M-CTC患者上述指标例数分别为35、18、48、26、25、21、18例，两类患者比较，差异均有统计学意义（χ2=5.25，9.42，4.80，9.79，5.55，5.35，20.75，P<0.05）。结论外周CTC上皮-间质亚型可用于术前预测肝癌微血管侵犯。肿瘤最大径>5 cm，肿瘤数目多发，M-CTC计数≥1个/5 mL是肝癌微血管侵犯的独立危险因素。

简介：摘要目的探讨黄连素体外诱导人脐带间充质干细胞(hUMSCs)向神经细胞分化的作用。方法体外对hUMSCs进行培养，以不同浓度黄连素(分4组：对照组即0 mg/L组、50 mg/L组、100 mg/L组和200 mg/L组)诱导其向神经样细胞分化，显微镜下观察细胞形态改变并记录，并通过细胞免疫化学及免疫荧光技术检测细胞表面神经标志物巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。组间比较采用重复测量数据的方差分析。结果经黄连素诱导72 h，细胞呈典型神经细胞样形态，且80%以上细胞表达神经细胞特异性标志物Nestin、NSE、GFAP。不同药物浓度作用下，神经样细胞分化率随时间变化情况为，200 mg/L组阳性细胞率在诱导48 h即可达峰值，高于100 mg/L组和50 mg/L组[(81.4±5.8)%比(50.4±4.7)%比(3.6±2.3)%，F＝25.806，P<0.05]，差异有统计学意义，但诱导72 h后明显下降，阳性表达细胞出现漂浮凋亡；100 mg/L组阳性细胞率在诱导72 h达到峰值，高于200 mg/L组和50 mg/L组[(87.7±4.6)%比(57.7±7.7)%比(14.3±5.3)%，F＝24.815，P<0.05]，差异有统计学意义，且高表达可持续维持3 d，诱导120 h后仍高达(85.2±5.0)%；50 mg/L组阳性细胞率一直相对较低，在诱导6 d达到峰值，低于100 mg/L组、高于200 mg/L组[(15.8±6.5)%比(64.5±6.6)%比(8.3±4.0)%，F＝22.516，P<0.05]，差异有统计学意义。结论黄连素体外可诱导hUMSCs向神经样细胞分化，浓度为100 μg/ml时诱导最为明显，且存活时间最长。

简介：摘要细胞外囊泡（EV）是大多数真核细胞分泌的纳米级颗粒，在细胞间的物质转运和信息传递中扮演重要角色，参与炎症、血管生成、抗原呈递、细胞凋亡及分化等生物学过程。间充质干细胞（MSC）培养上清液中富含EV，EV可调控创面愈合和组织修复的关键步骤——新血管形成，而糖尿病溃疡迁延不愈与创面血管网络的形成受阻密切相关。该文就MSC来源EV在促进糖尿病溃疡血管生成中的作用进行综述，以期为糖尿病溃疡治疗提供一种新思路。

简介：摘要目的探讨环状RNA(circRNA）＿0128846对人非小细胞肺癌（NSCLC）细胞放射抵抗的影响及机制。方法应用GEO数据库筛选、采用荧光实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测在人NSCLC细胞A549及其放射抵抗细胞（A549R）中差异表达最显著的circRNA作为目标circRNA，qRT-PCR检测其在人支气管上皮细胞Beas-2B及人NSCLC细胞A549、H460、H1299、H1975中的表达水平。在A549细胞中转染目标circRNA过表达载体，在A549R细胞中转染目标circRNA沉默载体，并检测以上细胞经8 Gy X射线照射后的克隆形成能力。应用人类环状RNA数据库和circinteractome数据库预测目标circRNA下游的miRNA，qRT-PCR检测A549R细胞中目标circRNA沉默后表达水平上升最显著的miRNA作为目标miRNA。qRT-PCR检测A549细胞中过表达目标circRNA后目标miRNA的表达情况；通过双荧光素酶报告基因分析人胚肾细胞293T中过表达目标miRNA后目标circRNA的表达情况；qRT-PCR检测目标miRNA在A549、A549R细胞中的表达水平。在A549细胞中转染目标miRNA抑制剂以沉默目标miRNA，在A549R细胞中转染目标miRNA模拟物以过表达目标miRNA，并检测以上细胞经8 Gy X射线照射后的克隆形成能力；将过表达目标circRNA的A549细胞进行8 Gy X射线照射并在该细胞中过表达目标miRNA，检测细胞的克隆形成能力。组间数据的比较采用独立样本t检验。结果qRT-PCR检测结果显示，circRNA_0128846为目标circRNA，且其在人NSCLC细胞A549、H460、H1299、H1975中的相对表达水平均高于人支气管上皮细胞Beas-2B（t=6.200、7.903、6.010、6.132，均P<0.01）。过表达circRNA_0128846的A549细胞经照射后的克隆形成能力增强（0.22%对0.45%，t=4.427，P<0.05）；沉默circRNA_0128846后A549R细胞经照射后的克隆形成能力降低（0.23%对0.10%，t=3.780，P<0.05）。qRT-PCR检测结果显示，miR-1183为目标miRNA，在A549细胞中过表达circRNA_0128846显著下调miR-1183的表达（t=6.002，P<0.01）；双荧光素酶报告基因分析证实过表达miR-1183可显著下调circRNA_0128846的表达（t=4.562，P<0.05）；miR-1183在A549R细胞中的相对表达水平显著低于亲本A549细胞（t=6.025，P<0.01）。过表达miR-1183显著降低A549R细胞经照射后的克隆形成能力，沉默miR-1183显著增强A549细胞经照射后的克隆形成能力（0.26%对0.15%、0.21%对0.31%，t=3.671、3.293，均P<0.05），且过表达miR-1183显著降低了过表达circRNA_0128846对A549细胞克隆形成能力的促进作用（1.90%对1.20%，t=6.325，P<0.01）。结论circRNA_0128846作为miR-1183的吸附海绵，可抑制miR-1183的表达进而抑制其放疗增敏作用，从而促进人NSCLC细胞的放射抵抗。

简介：摘要目的探讨海风藤提取物(KPSE)对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的软骨细胞损伤的保护作用及其机制。方法采用IL-1β处理大鼠软骨细胞建立软骨细胞损伤模型。0.1、1.0、10.0 mg/ml浓度KPSE与10 ng/ml IL-1β处理细胞(分别记为KPSE-L+IL-1β组、KPSE-M+IL-1β组、KPSE-H+IL-1β组)。将anti-miR-con、anti-miR-499a、miR-con、miR-499a mimics转染至软骨细胞并加入10 ng/ml的IL-1β培养(分别记为IL-1β+anti-miR-con组、IL-1β+anti-miR-499a组、IL-1β+miR-con组、IL-1β+miR-499a组)。分别将anti-miR-NC、anti-miR-499a转染至软骨细胞后加入10 mg/ml的KPSE及10 ng/ml的IL-1β培养(分别标记为anti-miR-NC+KPSE-H+IL-1β组、anti-miR-499a+KPSE-H+IL-1β组)。噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium，MTT)法检测细胞活力，酶联免疫吸附法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、IL-6表达，蛋白质印迹法检测裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(cleaved-Caspase-3)表达，实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测微小核糖核酸-499a(miR-499a)表达。两组间比较行t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用SNK-q检验。结果KPSE+L+IL-1β组、KPSE+M+IL-1β组、KPSE+H+IL-1β组细胞吸光度值显著高于IL-1β组(0.50±0.05、0.73±0.07、0.79±0.08比0.38±0.03)，cleaved-Caspase-3表达(0.71±0.07、0.57±0.05、0.48±0.04比0.83±0.08)、细胞凋亡率[(22.43±2.17)%、(16.38±1.54)%、(9.85±0.91)%比(27.86±2.61)%]、TNF-α[(61.02±6.23)、(40.56±3.57)、(30.15±2.86) pg/ml比(86.37±8.12) pg/ml]、IL-1β[(516.76±41.05)、(362.45±32.87)、(214.59±20.54) pg/ml比(637.15±53.32) pg/ml]和IL-6表达[(531.52±51.68)、(418.36±40.53)、(246.28±21.08) pg/ml比(584.11±55.05) pg/ml]显著低于IL-1β组，差异有统计学意义(F＝83.568、70.682、103.211、291.687、402.183、250.447，P<0.05)。KPSE+L+IL-1β组、KPSE+M+IL-1β组、KPSE+H+IL-1β组细胞miR-499a表达显著高于IL-1β组(0.53±0.05、0.78±0.07、0.93±0.09比0.34±0.03)，差异有统计学意义(F＝130.619，P<0.05)。IL-1β+miR-499a组细胞吸光度值显著高于IL-1β+miR-con组(0.78±0.06比0.37±0.02)，cleaved-Caspase-3表达(0.37±0.03比0.82±0.09)、细胞凋亡率[(11.56±1.04)%比(26.91±2.45)%]、TNF-α[(43.05±4.06) pg/ml比(85.61±8.17) pg/ml]、IL-1β[(317.81±27.54) pg/ml比(637.01±58.68) pg/ml]、IL-6表达[(264.59±24.13) pg/ml比(578.30±51.04) pg/ml]显著低于IL-1β+miR-con组，差异有统计学意义(t＝24.431、14.653、20.178、12.297、10.563、17.138，P<0.05)。anti-miR-499a+KPSE+H+IL-1β组细胞吸光度值显著低于anti-miR-NC+KPSE+H+IL-1β组(0.38±0.04比0.78±0.06)，cleaved-Caspase-3表达(0.78±0.07比0.46±0.04)、细胞凋亡率[(19.63±1.52)%比(10.23±1.01)%]、TNF-α[(63.22±6.24) pg/ml比(32.57±3.16) pg/ml]、IL-1β[(456.97±43.81) pg/ml比(204.61±18.26) pg/ml]、IL-6表达[(398.74±34.12) pg/ml比(257.19±22.41) pg/ml]显著高于IL-1β+miR-con组，差异有统计学意义(t＝16.133、12.041、17.599、13.431、15.125、25.022，P<0.05)。结论KPSE可降低IL-1β诱导的软骨细胞损伤，其机制可能与上调miR-499a表达有关。

简介：摘要目的探讨微小核糖核酸876-5p(micro ribonucleic acid-876-5p, miR-876-5p）通过靶向叉头盒蛋白M1(forkhead box M1，FOXM1）对儿童髓母细胞瘤（medulloblastoma ，MB）细胞增殖的影响。方法收集2018年1月至2020年10月在湖南省儿童医院进行手术治疗的30例MB患儿临床资料，其中男21例，女9例，年龄为（10.42±2.17）岁，范围为5~14岁。通过qPCR检测肿瘤组织和癌旁组织标本中miR-876-5p和FOXM1、TAp73、Beclin1、Livin、Cyclin D1在mRNA水平的表达情况；通过CCK8和Transwell实验观察过表达miR-876-5p后对MB细胞的增殖和侵袭能力的影响；通过qPCR和WB实验检测过表达miR-876-5p前后，FOXM1、TAp73、Beclin1、Livin、Cyclin D1在蛋白或mRNA水平表达的变化。结果miR-876-5p在MB中表达显著降低（P<0.001），过表达miR-876-5p能够显著抑制MB细胞的增殖和侵袭能力（P<0.01）。FOXM1在MB中表达上调，其表达与miR-876-5p呈负相关（r=-0.527，P=0.013 ）。在MB细胞中过表达miR-876-5p能够抑制FOXM1的表达。此外，在MB中，miR-876-5p的表达与TAp73和Beclin1呈正相关（r=0.506，P=0.008；r=0.535，P=0.003），与Livin和Cyclin D1 mRNA呈负相关（r=-0.496，P= 0.011；r=-0.574 ，P=0.005 ）。与之相反，FOXM1的表达与TAp73和Beclin1呈负相关（r=-0.554 ，P=0.007 ；r=-0.497，P=0.016 ），与Livin和Cyclin D1呈正相关（r=0.502，P=0.009 ；r=0.476，P=0. =0.015 ）。此外，miR-876-5p在MB细胞中可以下调Livin和Cyclin D1的表达，上调TAp73在Beclin1的表达。结论miR-876-5p具有抑制MB增殖和侵袭的作用，而FOXM1可能促进MB增殖和侵袭。miR-876-5p可能通过靶向调控FOXM1促进机体内抑癌基因的表达并抑制致癌基因表达，最终抑制MB细胞增殖和侵袭。

简介：摘要目的探讨细胞自噬在七氟醚致老年小鼠海马区神经元细胞凋亡中的作用机制。方法18月龄BL/C57小鼠16只，按随机数字表法分为两组（每组8只）：七氟醚组和对照组。七氟醚组吸入47.5%空气+2.5%七氟醚+50%氧气3 h，对照组吸入50%空气+50%氧气3 h。建模后24 h进行新物体识别实验，随后断头取海马组织，尼氏染色检测海马神经元细胞凋亡情况，Western blot法检测海马神经元细胞自噬相关蛋白[微管关联蛋白（microtubule-associated protein, LC）3Ⅱ/LC3Ⅰ、Becline-1、p62蛋白]水平。另取18月龄BL/C57小鼠18只，按随机数字表法分为3组（每组6只）：七氟醚+3-甲基腺嘌呤组（M组，吸入麻醉前2 h经腹腔注射3-甲基腺嘌呤）、七氟醚+雷帕霉素组（R组，吸入麻醉前24 h和2 h经腹腔注射雷帕霉素）、七氟醚+生理盐水组（N组，吸入麻醉前2 h经腹腔注射生理盐水100 μl）。经腹腔注药及七氟醚处理后，尼氏染色检测海马神经元细胞凋亡情况，Western blot法检测海马神经元细胞自噬相关蛋白（LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Becline-1、p62蛋白）水平。结果与对照组比较，七氟醚组小鼠新物体识别率和辨别系数降低（P<0.05），海马神经元细胞凋亡增加（P<0.05），LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Becline-1水平升高（P<0.05），p62蛋白水平降低（P<0.05）。与N组比较：M组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Becline-1水平降低（P<0.05）、p62蛋白水平升高（P<0.05），海马神经元细胞凋亡增加（P<0.05）；R组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Becline-1水平升高（P<0.05），p62蛋白水平降低（P<0.05），海马神经元细胞凋亡降低（P<0.05）。结论老年小鼠经七氟醚吸入麻醉后对新物体的识别率和辨别系数均降低，海马神经元细胞凋亡增加，同时存在细胞自噬的激活，并负反馈抑制神经元细胞凋亡，发挥神经保护机制。

简介：【摘要】目的 阐述益气升白汤对于NSCLC患者化疗后急性白细胞减少症的临床效果。方法 选取2020年1月-2021年4月我院收治的患者20例，根据治疗方法对照组和研究组各10例，对照组给予传统治疗，研究组给予益气升白汤治疗，通过观察患者的生理与心理指标以此来分析治疗方法的有效性。结果 研究组患者的WBC情况以及治疗满意度明显优于对照组（P

简介：【摘要】目的 阐述益气升白汤对于NSCLC患者化疗后急性白细胞减少症的临床效果。方法 选取2020年1月-2021年4月我院收治的患者20例，根据治疗方法对照组和研究组各10例，对照组给予传统治疗，研究组给予益气升白汤治疗，通过观察患者的生理与心理指标以此来分析治疗方法的有效性。结果 研究组患者的WBC情况以及治疗满意度明显优于对照组（P

简介：