简介:目的研究过表达Tenomodulin(TNMD)对NIH3T3和C3H10T1/2细胞系肌腱相关分子表达的作用。方法体外培养NIH3T3和C3H10T1/2细胞系,利用脂质体法在两种细胞系中分别转染pCAGGS空载体和pCAGGS-TNMD表达载体,G418进行稳定筛选。RT-PCR确认成功转染后,利用倒置相差显微镜观察细胞形态,同时定量PCR检测肌腱相关基因的表达情况。结果两种细胞系转染后细胞形态均无明显改变。基因水平上,NIH3T3细胞过表达TNMD后,collagenⅥ和biglycan显著降低,collagenⅠ没有显著差别。而在C3H10T1/2细胞中,collagenⅠ和biglycan显著升高,collagenⅥ没有显著差别。结论过表达TNMD对NIH3T3和C3H10T1/2细胞系的细胞形态没有影响,但能影响肌腱相关基因的表达情况。
简介:摘要目的观察血管内皮生长因子C(VEGF-C)及其受体3(VEGFR-3)在食管癌组织中的表达,探讨其意义。方法采用免疫组织化学法检测食管鳞癌和癌旁食管组织中的VEGF-C、VEGFR-3的表达。结果食管鳞癌组织中VEGF-C和VEGFR-3表达阳性率分别为70.3%(23/46),76%(23/46),癌旁组织中表达阳性率分别为20%,14%,两者比较有统计学意义,P均<0.05。VEGF-C和VEGFR-3的表达与食管癌的淋巴结转移、浸润深度有关,但与肿瘤组织分化程度无关。结论VEGF-C、VEGFR-3的表达与食管鳞癌的发展,淋巴结转移有相关性。
简介:BACKGROUND:Studieshavesuggestedthatfibronectinleucine-richtransmembraneprotein3(FLRT3)isrelatedtoinjuryandregenerationofthenervoussystem.However,theexpressionandbiologicalcharacteristicsoftheseproteinsremainpoorlyunderstood.OBJECTIVE:ToobtainFLRT3C-terminalgenefragments,toeffectivelyexpressandpurifythetargetproteins.DESIGN,TIMEANDSETTING:AnobservationalstudyofcellularandmolecularbiologywasperformedatthelaboratoryofHistologyandEmbryologyinXiangyaSchoolofMedicine,CentralSouthUniversitybetweenOctober2007andJune2008.MATERIALS:ThreeSpragueDawleyadultratswereusedtoextracttotalRNAfromratbrains.ThepGEX4T3andEscherichiacoli(E.coli)JM109werepurchasedfromPromega.E.coliBL21wasprovidedbyNovagen.METHODS:FLRT3proteincodingC-terminalDNAfragments,atalengthof786bp,wereamplifiedusingRT-PCRtechniquefromrattotalRNA.TheamplifiedproductswereclonedintotheexpressionvectorpGEX4T3.ArecombinantexpressionvectorwasthenconstructedandintroducedintoE.coliBL21.IsopropyI-D-thiogalactopyranosidewasappliedtoinduceexpressionofrecombinantGSTfusionproteins,followedbyisolation,purification,andrenaturationofinclusionbodiesthatcomprisedrecombinantproteins.Finally,thepurifiedrecombinantproteinwasobtained.MAINOUTCOMEMEASURES:DeterminationofFLRT3C-terminalDNAsequence;expressionoftargetproteinswasassayedbySDS-PAGEelectrophoresis;purifiedrecombinantproteinwasidentifiedwithWesternblotmethods.RESULTS:FLRT3proteincodingC-terminalDNAfragments,atalengthof786bp,weresuccessfullyharvestedthroughRT-PCRamplification,andwerethenclonesintotheprokaryoticexpressionvectorpGEX4T3.Theresultsofthesequencewereconsistentwiththeknowngenesequence.SDS-PAGEanalysisdemonstratedthattherewasaspecificproteinbandintherecombinantGSTfusionproteinsatarelativemolecularmassof56,600.Therecombinantproteinwasobservedintheinclusionbody,andh
简介:摘要目的探讨股骨远端解剖型锁定接骨板治疗股骨远端C3型骨折的临床疗效。方法采用股骨远端解剖型锁定接骨板治疗股骨远端C3型骨折45例,观察其疗效。结果45例均获18-24个月的随访,参照Kotmert评价标准优33例,良10例,可1例,差1例,优良率95.6%。结论股骨远端解剖型锁定接骨板是治疗股骨远端C3型骨折的理想内固定方式,值得推广。
简介:摘要目的检测新生儿窒息血清IgA、IgG、IgM、C3、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)水平变化。方法分别选取窒息新生儿48例和16名正常新生儿,采用免疫比浊法检测血清IgA、IgG、IgM、C3和hs-CRP的水平。结果新生儿窒息组与正常对照组C3和IgG差异无统计学意义(P>0.05),IgA、IgM和hs-CRP两组差异有统计学意义(P<0.01);轻度窒息组和重度窒息组患儿血清IgG、hs-CRP水平差异有统计学意义(P<0.01),而血清IgA、IgM、C3水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论新生儿窒息可使机体血清IgA、IgM水平下降,hs-CRP水平升高,对IgG影响不大;新生儿窒息程度与IgG、hs-CRP有一定关系。
简介:摘要目的探讨抗核抗体与SLE患者疾病活动度分析及与补体C3、C4水平的关联性。方法收集我院系统性红斑狼疮患者,根据患者疾病活动程度分为活动组和缓解组。对比系统性红斑狼疮组和对照组抗核抗体阳性率及补体C3、C4水平;活动组和缓解组抗核抗体阳性率及补体C3、C4水平;抗核抗体与补体C3、C4水平相关性。结果系统性红斑狼疮组抗核抗体阳性率及补体C3、C4水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);活动组抗核抗体阳性率高于缓解组,补体C3、C4水平低于缓解组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论通过测定抗核抗体、补体C3、C4水平可以预测SLE患者疾病活动度程度,同时抗核抗体水平的波动与补体C3、C4有较好的相关性。
简介:摘要目的探讨磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路、活性氧簇(ROS)、醛酮还原酶家族1成员C3(AKR1C3)在瘢痕疙瘩形成中的可能作用及机制。方法从昆明医科大学第一附属医院皮肤科收集9例瘢痕疙瘩组织标本(男6例,女3例,年龄24~40岁),以及6例进行其他手术的志愿者正常皮肤组织标本(男4例,女2例,年龄20~45岁),部分行组织包埋,部分行成纤维细胞原代培养。(1)免疫组织化学检测瘢痕疙瘩和正常皮肤组织中AKT(丝氨酸磷酸化位点473)[p-AKT(S473)]、AKT(苏氨酸磷酸化位点308)[p-AKT(T308)]和AKR1C3的蛋白相对表达量。(2)CCK-8法检测不同浓度(0、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50 mmol/L)PI3K特异性抑制剂2-吗啉代-8-苯基色酮(LY294002)对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的抑制作用,并筛选出LY294002最佳的实验浓度。(3)以ROS检测试剂盒分别检测不同浓度(0、4、6、8、10、12 mmol/L)ROS抑制剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)和15 mmol/L LY294002对瘢痕疙瘩成纤维细胞内ROS水平的影响。(4)将瘢痕疙瘩或正常皮肤成纤维细胞分为对照组(正常培养不进行任何处理)、二甲基亚砜(DMSO)组(0.002% DMSO处理)、LY294002组(15 mmol/L LY294002处理)和NAC组(6 mmol/L NAC处理),定量PCR(qPCR)和蛋白质印迹法分别检测成纤维细胞中AKT mRNA、AKR1C3 mRNA及p-AKT(S473)、p-AKT(T308)和AKR1C3蛋白的表达水平。采用SPSS 20.0软件进行统计学分析,数据以±s表示,两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析,两两多重比较采用SNK-q检验,P<0.05表示差异有统计学意义。结果(1)免疫组织化学检测结果显示,瘢痕疙瘩组织中p-AKT(S473)、p-AKT(T308)和AKR1C3的蛋白表达水平分别为16.75±3.30、16.20±1.56、26.69±2.50,均显著高于正常皮肤组织的4.02±1.50、1.82±0.50、1.47±1.07(P<0.01)。(2)瘢痕疙瘩成纤维细胞经不同浓度LY294002干预24 h后,15~50 mmol/L LY294002组成纤维细胞增殖抑制率显著高于对照组(0 mmol/L组)(P<0.01)。LY294002最佳实验浓度为15 mmol/L。(3)不同浓度NAC作用于瘢痕疙瘩成纤维细胞1 h后,各组间ROS水平差异有统计学意义(P<0.01),且6 mmol/L NAC组ROS水平(0.72±0.03)最低。15 mmol/L LY294002组ROS水平显著低于对照组(0 mmol/L组)(0.80±0.01 vs. 0.86±0.01,P<0.01)。(4)qPCR检测结果表明,瘢痕疙瘩成纤维细胞对照组中AKT、AKR1C3 mRNA表达量分别为1.38±0.09、1.40±0.05,明显高于正常皮肤成纤维细胞的0.97±0.10、0.98±0.03(P<0.01);经15 mmol/L LY294002处理后,瘢痕疙瘩成纤维细胞AKT mRNA表达量明显低于正常皮肤(0.73±0.05 vs. 0.89±0.06,P<0.01);经6 mmol/L NAC处理后,瘢痕疙瘩成纤维细胞AKR1C3 mRNA低于正常皮肤(0.43±0.05 vs. 0.86±0.03,P<0.01)。蛋白质印迹法检测结果显示,瘢痕疙瘩成纤维细胞中p-AKT(S473)、p-AKT(T308)、AKR1C3蛋白表达量分别为1.19±0.21、0.92±0.04、0.73±0.08,明显高于正常皮肤的0.24±0.06、0.33±0.05、0.31±0.05(P<0.01);经15 mmol/L LY294002和6 mmol/L NAC处理后,瘢痕疙瘩成纤维细胞中p-AKT(S473)蛋白表达量分别为0.92±0.04、0.80±0.20, p-AKT(T308)蛋白表达量分别为0.42±0.04、0.81±0.05,均明显高于正常皮肤(0.23±0.03、0.22±0.05,0.30±0.06、0.32±0.05),但瘢痕疙瘩成纤维细胞AKR1C3蛋白表达量(0.23±0.05)在15 mmol/L LY294002处理后低于正常皮肤(0.30±0.07),在6 mmol/L NAC处理后(0.33±0.07)高于正常皮肤(0.28±0.06)(P>0.05)。结论活化的PI3K/AKT信号通路和AKR1C3促进了瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖及瘢痕疙瘩形成。同时,瘢痕疙瘩成纤维细胞内AKR1C3的升高可加速ROS升高。
简介:目的:观察以雷贝拉唑、奥美拉唑、泮托拉唑为基础的三联3d疗法治疗幽门螺杆菌感染的疗效。方法:180例伴幽门螺杆菌感染的消化性溃疡及糜烂性胃炎患者,随机分为6组,进行三联3d疗法。选用雷贝拉唑10mg、奥美拉唑20mg、泮托拉唑40mg,分别配伍克拉霉素500mg、呋喃唑酮100mg(3dRCF组、3dOCF组、3dPCF组)及阿莫西林1g、呋喃唑酮100mg(3dRAF组、3dOAF组、3dPAF组),均为2次/d口服。用药后30d复查胃镜、^14C呼气试验及病理检查,了解6组H.pylori根除率、药物不良反应及溃疡、糜烂愈合情况。结果:H.pylori根除率:ITT分析及PP分析3dRCF组、3dRAF组之间差异均无统计学意义。6组不良反应均少见。6组溃疡及糜烂愈合情况均较好,P〉0.15。结论:以雷贝拉唑为基础的短程3d疗法治疗幽门螺杆菌感染疗效确定,根除率高、不良反应小,是有前途的根除H.pylori的方法。
简介:摘要目的观察分析恩替卡韦提高老年代偿期乙肝肝硬化患者补体C3、C4水平的作用。方法选取我院2015年1月-207年3月收治的96例乙肝肝硬化患者作为本次的研究对象,随机分为治疗组和对照组,每组48例,对照组实施常规的治疗措施,治疗组在对照组的基础上加用恩替卡韦进行治疗。所有患者均治疗6个月后,比较两组的临床疗效以及治疗前后补体C3、C4水平变化。结果与对照组比较,治疗组患者的临床总有效率显著提高(93.75%VS75.00%),差异有统计学意义(P<0.05);经过治疗后,治疗组患者补体C3、C4水平均明显提高,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,治疗组补体C3、C4水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论恩替卡韦能够提高老年代偿期肝硬化患者补体C3、C4水平,提高临床疗效,值得在临床上广泛推广应用。
简介:目的探讨血浆或脑脊液中的C-X3-C趋化因子配体1(CX3CL1)是否可作为判断中枢神经系统感染的指标。方法以2015年12月至2016年5月复旦大学附属儿科医院新生儿病房中疑诊中枢神经系统感染行腰椎穿刺检查的新生儿为感染组,根据临床表现,脑脊液常规、生化和培养结果分为中枢感染亚组、败血症亚组和非败血症亚组。以同一时期复旦大学附属妇产科医院产科病房健康新生儿为对照组,根据出生体重分为〈2000、~2500、~3000、~3500和〉3500g亚组,根据孕周分为〈33、~35、~37、~39和〉39周亚组。对照组取新生儿在出生后的脐带血;感染组于急性期或稳定期行腰椎穿刺检查,24h后取静脉血标本。采用Luminex技术检测血或脑脊液标本中的CX3CL1水平,比较各组及其亚组间的差异。结果对照组69例,感染组24例。中枢感染(化脓性脑膜炎)亚组8例,败血症亚组10例,非败血症亚组6例(脑积水2例,泌尿系统感染1例,新生儿惊厥2例、高胆红素血症伴食管气管瘘1例)。对照组脐血CX3CL1水平为(97.8±13.3)pg·mL^-1,脐血CX3CL1水平在不同体重亚组以及不同孕周亚组间差异无统计学意义,P均〉0.05。CX3CL1水平在感染组血浆(95.1±8.2)pg·mL^-1和对照组脐血比较差异无统计学意义(P=0.299)。CX3CL1水平感染组脑脊液中(210.0±11.9)pg·mL^-1高于血浆,差异有统计学意义(P〈0.001)。感染组中的中枢感染亚组、败血症亚组和非败血症亚组脑脊液CX3CL1水平分别为(243.1±13.3)、(208.2±20.1)和(168.7±20.6)pg·mL^-1,3组间差异有统计学意义(P=0.046);中枢感染亚组与非败血症亚组比较,差异有统计学意义(P=0.016);败血症亚组与非败血症亚组比较(P=0.180)、中枢感染亚组与败血症亚组比较(P=0.169),差异均无统计学意义。结论健康新生儿脐带血和感染新生儿外周血CX3CL1表达水平相对稳定
简介:摘要目的比较3种内固定方式治疗股骨远端Müller分型C2、C3型骨折的疗效。方法回顾性分析2013年2月至2017年2月期间宁波市第六医院创伤骨科收治的58例股骨远端Müller分型C2、C3型骨折患者资料。根据内固定方式不同分为3组:单切口锁定钢板组(A组)21例,男13例,女8例;年龄为(50.6±12.9)岁。双切口锁定钢板联合重建钢板组(B组)18例,男11例,女7例;年龄为(53.5±13.0)岁。单切口锁定钢板联合重建钢板组(C组)19例,男10例,女9例;年龄为(48.1±12.2)岁。比较3组患者的手术时间、术中出血量、术中C型臂透视次数、骨折愈合时间、术后并发症发生率、膝关节活动度及膝关节功能等。结果3组患者术前一般资料比较差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。3组患者术中C型臂透视次数、随访时间及术后并发症发生率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。但A组、C组患者的手术时间[(96.7±16.4)、(101.9±16.5)min]和术中出血量[(237.8±47.5)、(253.6±46.6)mL]显著少于B组患者[(114.9±20.1)min、(290.1±60.9)mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。B组、C组患者的骨折愈合时间[(6.9±1.6)、(6.6±1.7)个月]显著短于A组患者[(8.4±1.9)个月],术后12个月膝关节活动度(91.7°±16.7°、90.9°±14.4°)显著大于A组患者(78.8°±14.4°),术后12个月膝关节功能恢复优良率[77.8%(14/18)、73.7%(14/19)]显著高于A组患者[57.1%(12/21)],差异均有统计学意义(P<0.05)。结论采用股骨远端前外侧切口外侧应用锁定钢板、前侧附加重建钢板固定治疗股骨远端Müller分型C2、C3型骨折,固定坚强、对周围软组织损伤相对较小,兼具单切口锁定钢板和双切口内外侧锁定钢板固定的优点,术后患者膝关节功能恢复良好。
简介:目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中醛酮还原酶1C3(AKRlC3)表达及其临床意义。方法收集2013年1月至2016年3月88例手术切除的NSCLC组织及83例癌旁正常组织,采用实时荧光定量PCR(QPCR)法检测上述组织中的AKRlC3表达水平,分析AKRlC3表达与NSCLC临床病理参数(性别、年龄、TNM分期、肿瘤大小、组织学类型及淋巴结转移)的关系;根据随访资料分析AKRlC3表达与预后的关系,采用受试者工作特征曲线(ROC)评价AKRlC3表达在NSCLC早期诊断中的效能。结果NSCLC组AKRlC3表达水平为0.187±0.175,低于癌旁正常组织的1.079±0.384,差异有统计学意义(P〈0.05);AKRlC3诊断NSCLC的曲线下面积为0.982(95%CI:0.966~0.998)。AKRlC3表达与NSCLC性别、年龄、组织学类型及淋巴结转移无关,与肿瘤大小及TNM分期有关。肿瘤大小〉3em的AKRlC3表达量为0.095+0.055,低于肿瘤大小≤3em的0.340±0.201,而Ⅲ、Ⅳ期的AKRlC3表达量为0.094±0.058,低于I、Ⅱ期的0.265±0.202,差异有统计学意义(P〈0.05)。全组NSCLC患者的中位总生存期(OS)为17.60个月。AKRlC3高表达者的中位0s为20.60个月,高于低表达者的11.90个月,差异有统计学意义(P〈0.05);I+Ⅱ期患者的中位OS为21.65个月,高于Ⅲ+Ⅳ期的16.20个月,差异有统计学意义(P〈0.05);肿瘤大小≤3em者的中位OS为18.40个月,高于〉3em者的15.70个月,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论AKRlC3在NSCLC组织中表达降低,且与TNM分期、肿瘤大小及预后有关,可能与NSCLC发生发展有关,在NSCLC诊断及病情评估有一定价值。
简介:目的探讨采用微创内外侧切口双钢板内固定治疗C3型股骨远端骨折的临床疗效.方法对2009年3月~2012年12月采用微创内外侧切口双钢板内固定治疗C3型股骨远端骨折25例患者进行回顾性分析,包括记录手术时间,术中出血量,手术并发症,骨折愈合时间,内固定失效,及末次随访膝关节功能.结果手术时间110~150分钟,平均125分钟;术中出血量400~600ml,平均480ml.术后伤口无感染、皮肤坏死发生,均Ⅰ期愈合.25例均获得随访,随访时间12~36个月,平均25个月.X线显示平均术后6个月骨折愈合,无内固定物断裂及松动事件发生.22例患者达到骨折解剖复位.患者末次随访时,2例开放性骨缺损患者关节僵硬(0~50°),其他患者膝关节平均活动范围为2~120°.膝关节功能采用美国特种外科医院膝关节评分标准,优9例,良11例,可3例,差2例,优良率80%.结论采用微创内外侧切口双钢板内固定治疗股骨远端C3型骨折,能较好的暴露骨折,达到骨折内固定的坚强固定,满足早期功能锻炼的要求.微创操作减少了软组织并发症,利于骨折愈合.
简介:摘要目的探讨血清IgA/C3比值在IgA肾病诊断和疗效评价中的价值。方法抽取2017年11月至2019年5月在山西白求恩医院就诊的60例肾病患者作为研究对象进行回顾性研究,其中IgA肾病32例,非IgA肾病28例。IgA肾病32例中Ⅰ、Ⅱ级(轻度)4例,Ⅲ级(中度)18例,Ⅳ、Ⅴ级(重度)10例;行透析治疗7例,非透析治疗25例。分析IgA肾病和非IgA肾病、IgA肾病不同病理分级及透析前后患者血清IgA/C3值变化。结果IgA肾病患者血清IgA/C3比值(2.83±1.02)高于非IgA肾病患者(2.10±0.84),差异有统计学意义(P<0.05)。不同病理分级IgA肾病患者血清IgA/C3比值比较,差异未见统计学意义(P>0.05)。与透析前比较,IgA肾病患者透析后血清IgA值上升、血清C3值下降,透析后血清IgA/C3比值(3.02±1.53)高于透析前(2.51±1.10),差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清IgA/C3比值在IgA肾病患者体内明显升高,此可与非IgA肾病相鉴别,血清IgA/C3比值可用于透析后疗效的监测。