摘要
摘要目的探讨人表皮生长因子受体4(HER4)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达意义及其对NSCLC细胞生物学行为的影响。方法选取2015年1月至2017年1月长治市人民医院呼吸与危重症医学科收治的经手术切除并经病理学证实的84例NSCLC患者的肿瘤组织及癌旁正常组织，男55例，女29例，年龄(54.58±9.67)岁，年龄范围为33～75岁。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测肺癌组织和癌旁正常肺组织中HER4的表达，分析HER4与患者临床病理特征的相关性，通过Kaplan-Meier生存曲线分析HER4与NSCLC预后的关系。HER4-siRNA转染H522细胞系沉默HER4的表达，采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、侵袭小室(Transwell)法，流式细胞术检测细胞增殖、迁移和侵袭及凋亡情况。蛋白免疫印迹(Western blot)检测HER4和间质上皮转化(EMT)相关蛋白的表达。结果NSCLC组织中HER4 mRNA的表达水平(3.80±0.64)显著高于癌旁正常肺组织(2.07±0.57)，NSCLC细胞系H522中HER4 mRNA的表达水平(1.45±0.12)也显著高于人正常肺上皮细胞系BEAS-2B(0.78±0.06)，差异有统计学意义(P<0.05)。将NSCLC患者按照HER4表达水平的中位值分为高表达组和低表达组，两组肿瘤淋巴结转移(TNM)分期、淋巴结转移比较，差异有统计学意义(P<0.05)。进一步采用Kaplan-Maier法分析两组生存函数，结果显示低表达组总体生存期为(40.14±2.58)个月，优于高表达组的(30.45±2.58)个月，差异有统计学意义(P<0.05)。低表达组5年生存率[38.1%(16/42)]高于高表达组[23.8%(10/42)]，差异有统计学意义(P<0.05)。HER4-siRNA及阴性载体转染细胞后，RT-qPCR检测发现，HER4-siRNA组中HER4 mRNA的相对水平(0.52±0.04)低于空白组(1.00±0.01)和阴性组(0.96±0.06)，Western blot检测显示，HER4-siRNA组中HER4蛋白表达水平(0.64±0.04)低于空白组(1.16±0.09)和阴性组(1.12±0.08)，差异有统计学意义(P<0.05)。MTT试验结果显示，转染后，HER4-siRNA组H522细胞的增殖活性低于阴性组和空白组，差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell法检测结果显示，与空白组和阴性组相比，HER4-siRNA组中迁移和侵袭的细胞数量明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测结果显示，HER4-siRNA组上皮标志蛋白E-cadherin的表达水平显著高于空白组和阴性组，N-cadherin和Vimentin的表达水平则显著低于空白组和阴性组，差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术结果显示，HER4-siRNA组中细胞凋亡率为(12.48±1.02)%，高于空白组(2.25±0.28)%和阴性组(2.69±0.35)%，差异有统计学意义(P<0.05)。结论HER4可能是潜在的NSCLC预后和治疗的新的靶点。但关于HER4在NSCLC细胞的增殖、转移和凋亡中具体的作用机制，尚有待深入研究。
出版日期
2020年08月25日（中国期刊网平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
