简介:摘要目的探讨抑制素Beta A(INHBA)在胃癌组织中表达与临床病理资料相关性及对胃癌细胞增殖、侵袭转移能力的影响及机制。方法利用GEPIA公共数据库验证INHBA在胃癌及癌旁组织中mRNA表达情况及与患者病理分期及预后的关系,利用Kaplan-Meier Plotter在线数据库分析INHBA与患者临床预后的关系;病理标本行免疫组化验证INHBA在胃癌与癌旁组织中蛋白表达水平及其表达水平与患者临床病理分期相关性;体外实验中,利用四唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖能力,利用划痕实验检测细胞迁移能力,利用transwell小室实验检测细胞侵袭转移能力,利用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测INHBA表达与上皮-间质样转化(EMT)相关蛋白的表达相关性。结果GEPIA数据库及Kaplan-Meier Plotter在线数据库分析显示,与正常组织相比,INHBA mRNA在多种癌症组织中高表达,在胃癌组织中显著高表达(P<0.05);INHBA mRNA的高表达与胃癌临床分期及不良预后相关(P<0.05);免疫组化结果显示,胃癌组织中INHBA的染色评分显著高于癌旁组织(P<0.05),并且其表达水平与患者临床TNM分期有关(P<0.05);MTT、划痕实验、transwell小室结果显示,INHBA过表达可以促进胃癌细胞增殖、迁移和侵袭转移能力,而干扰INHBA的表达可以抑制细胞增殖、迁移和侵袭转移能力;Western blot结果显示,INHBA过表达后CDH1的表达量明显下调,而CDH2的表达量上调;抑制INHBA表达后CDH1的表达量明显上调,而CDH2的表达量下调。结论INHBA在胃癌组织中较癌旁组织高表达,其表达水平与患者肿瘤进展及不良预后相关,INHBA可以促进胃癌MGC-803细胞系的增殖、迁移及侵袭能力,其机制可能与INHBA促进细胞EMT有关。
简介:摘要目的研究微小RNA(miR)-513a-3p调控己糖激酶2(HK2)对结直肠癌细胞增殖和糖代谢的影响。方法2019年5月至2020年2月分别用miR-513a-3p模拟物、miR-513a-3p抑制物和miR对照物转染结直肠癌SW480细胞,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-513a-3p在结直肠癌SW480细胞、正常结直肠细胞及各结直肠癌SW480细胞转染后的表达水平;CCK-8法检测miR-513a-3p对细胞增殖的影响;Brd/PI掺入实验检测miR-513a-3p对糖代谢的影响;蛋白质印迹法检测HK2表达水平。结果结直肠癌SW480细胞miR-513a-3p表达水平明显低于正常结直肠细胞(0.43 ± 0.06比1.00 ± 0.02),差异有统计学意义(t = 7.024,P = 0.003)。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物后miR-513a-3p表达水平明显高于转染miR对照物和转染miR-513a-3p抑制物(1.18 ± 0.24比0.45 ± 0.04和0.22 ± 0.03),转染miR对照物后miR-513a-3p表达水平明显高于转染miR-513a-3p抑制物,差异均有统计学意义(P<0.05)。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物24、48、72和96 h细胞增殖能力明显低于转染miR对照物,转染miR-513a-3p抑制物24、48、72和96 h细胞增殖能力明显高于转染miR对照物,差异均有统计学意义(P<0.05)。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物后葡萄糖摄取量及乳酸和硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)表达水平明显低于转染miR对照物(1.02 ± 0.04比1.90 ± 0.06、0.88 ± 0.03比1.45 ± 0.04和0.16 ± 0.02比0.86 ± 0.06),转染miR-513a-3p抑制物后葡萄糖摄取量及乳酸和TXNIP表达水平明显高于转染miR对照物(2.35 ± 0.09比1.90 ± 0.06、1.67 ± 0.08比1.45 ± 0.04和2.01 ± 0.15比0.86 ± 0.06),差异均有统计学意义(P<0.05)。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物后HK2表达水平明显低于转染miR对照物(0.20 ± 0.01比1.02 ± 0.04),差异有统计学意义(t = 8.367,P<0.05);转染miR-513a-3p抑制物后HK2表达水平明显高于转染miR对照物(1.91 ± 0.07比1.02 ± 0.04),差异有统计学意义(t = 4.279,P<0.05)。结论miR-513a-3p对于结直肠癌细胞的增殖和糖代谢有明显的抑制作用,并且其调控机制与miR-513a-3p抑制细胞中HK2蛋白的表达有关。
简介:摘要:建筑业发展下工程技术不断创新,合理的技术应用能够提高工程项目建设效率,保证工程质量、安全,减少成本费用投入。文章对施工技术及现场施工管理的重要性进行分析,探讨施工技术要点与现场管理措施。
简介:摘要目的研究微小RNA(miR)-513a-3p调控己糖激酶2(HK2)对结直肠癌细胞增殖和糖代谢的影响。方法2019年5月至2020年2月分别用miR-513a-3p模拟物、miR-513a-3p抑制物和miR对照物转染结直肠癌SW480细胞,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-513a-3p在结直肠癌SW480细胞、正常结直肠细胞及各结直肠癌SW480细胞转染后的表达水平;CCK-8法检测miR-513a-3p对细胞增殖的影响;Brd/PI掺入实验检测miR-513a-3p对糖代谢的影响;蛋白质印迹法检测HK2表达水平。结果结直肠癌SW480细胞miR-513a-3p表达水平明显低于正常结直肠细胞(0.43 ± 0.06比1.00 ± 0.02),差异有统计学意义(t = 7.024,P = 0.003)。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物后miR-513a-3p表达水平明显高于转染miR对照物和转染miR-513a-3p抑制物(1.18 ± 0.24比0.45 ± 0.04和0.22 ± 0.03),转染miR对照物后miR-513a-3p表达水平明显高于转染miR-513a-3p抑制物,差异均有统计学意义(P<0.05)。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物24、48、72和96 h细胞增殖能力明显低于转染miR对照物,转染miR-513a-3p抑制物24、48、72和96 h细胞增殖能力明显高于转染miR对照物,差异均有统计学意义(P<0.05)。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物后葡萄糖摄取量及乳酸和硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)表达水平明显低于转染miR对照物(1.02 ± 0.04比1.90 ± 0.06、0.88 ± 0.03比1.45 ± 0.04和0.16 ± 0.02比0.86 ± 0.06),转染miR-513a-3p抑制物后葡萄糖摄取量及乳酸和TXNIP表达水平明显高于转染miR对照物(2.35 ± 0.09比1.90 ± 0.06、1.67 ± 0.08比1.45 ± 0.04和2.01 ± 0.15比0.86 ± 0.06),差异均有统计学意义(P<0.05)。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物后HK2表达水平明显低于转染miR对照物(0.20 ± 0.01比1.02 ± 0.04),差异有统计学意义(t = 8.367,P<0.05);转染miR-513a-3p抑制物后HK2表达水平明显高于转染miR对照物(1.91 ± 0.07比1.02 ± 0.04),差异有统计学意义(t = 4.279,P<0.05)。结论miR-513a-3p对于结直肠癌细胞的增殖和糖代谢有明显的抑制作用,并且其调控机制与miR-513a-3p抑制细胞中HK2蛋白的表达有关。
简介:摘要目的探讨生长分化因子15(GDF-15)在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达及临床意义。方法收集2019年1月至2月在湖南中医药大学第一附属医院行甲状腺癌根治术的3例PTC患者的肿瘤组织及淋巴结转移灶组织,使用高通量测序筛选差异表达基因;收集20例PTC患者肿瘤原发灶及淋巴结转移灶,用于验证测序结果;另收集20例PTC原发灶及癌旁组织(距肿瘤边缘>2 cm),用于验证目的基因在肿瘤组织及癌旁组织的表达情况;同时收集湖南中医药大学第一附属医院2014年1月至12月行甲状腺癌根治术PTC患者病理标本64例,其中31例患者伴淋巴结转移。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测GDF-15的表达情况,验证测序结果;采用免疫组织化学法检测GDF-15蛋白在PTC原发灶、癌旁组织以及淋巴结转移灶组织中表达水平。根据GDF-15蛋白在PTC患者原发灶组织中的表达,将其分为高表达组(35例)与低表达组(29例),分析GDF-15表达水平与患者临床病理特征的关系;Kaplan-Meier法分析两组患者5年无瘤生存率。结果3例PTC原发灶与转移灶组织mRNA高通量测序结果显示,前10位差异表达基因为CDH2、CDF15、DKK1、GLIPR1、PCDH7、ID3、FBN1、MYPN、UBASH3B、CCDC80。20例PTC原发灶组织及癌旁组织中GDF-15 mRNA表达量分别为4.1±0.5、2.8±0.3,差异有统计学意义(t=2.220,P=0.032)。另20例PTC原发灶及淋巴结转移灶组织中GDF-15 mRNA表达量分别为3.1±0.4、5.8±0.7,差异有统计学意义(t=3.556,P=0.001)。免疫组织化学结果显示,GDF-15在癌旁组织、PTC原发灶及转移灶中免疫组织化学评分分别为(4.0±0.3)分、(6.1±0.3)分和(9.0±0.4)分,PTC原发灶与癌旁组织、转移灶与癌旁组织、转移灶与原发灶组织GDF-15蛋白表达比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。GDF-15高表达组与低表达组患者肿瘤长径、肿瘤T分期、肿瘤N分期构成比比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);GDF-15高表达组患者5年无瘤生存率为60%,低表达组为83%,差异有统计学意义(P=0.033)。结论GDF-15在癌旁组织、PTC组织及淋巴结转移灶组织中表达逐渐增高,且其表达水平与患者肿瘤进展、复发、转移相关,可作为潜在的临床判断预后的预警分子及治疗靶点。
简介:摘要目的探讨抑制素Beta A(INHBA)在胃癌组织中表达与临床病理资料相关性及对胃癌细胞增殖、侵袭转移能力的影响及机制。方法利用GEPIA公共数据库验证INHBA在胃癌及癌旁组织中mRNA表达情况及与患者病理分期及预后的关系,利用Kaplan-Meier Plotter在线数据库分析INHBA与患者临床预后的关系;病理标本行免疫组化验证INHBA在胃癌与癌旁组织中蛋白表达水平及其表达水平与患者临床病理分期相关性;体外实验中,利用四唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖能力,利用划痕实验检测细胞迁移能力,利用transwell小室实验检测细胞侵袭转移能力,利用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测INHBA表达与上皮-间质样转化(EMT)相关蛋白的表达相关性。结果GEPIA数据库及Kaplan-Meier Plotter在线数据库分析显示,与正常组织相比,INHBA mRNA在多种癌症组织中高表达,在胃癌组织中显著高表达(P<0.05);INHBA mRNA的高表达与胃癌临床分期及不良预后相关(P<0.05);免疫组化结果显示,胃癌组织中INHBA的染色评分显著高于癌旁组织(P<0.05),并且其表达水平与患者临床TNM分期有关(P<0.05);MTT、划痕实验、transwell小室结果显示,INHBA过表达可以促进胃癌细胞增殖、迁移和侵袭转移能力,而干扰INHBA的表达可以抑制细胞增殖、迁移和侵袭转移能力;Western blot结果显示,INHBA过表达后CDH1的表达量明显下调,而CDH2的表达量上调;抑制INHBA表达后CDH1的表达量明显上调,而CDH2的表达量下调。结论INHBA在胃癌组织中较癌旁组织高表达,其表达水平与患者肿瘤进展及不良预后相关,INHBA可以促进胃癌MGC-803细胞系的增殖、迁移及侵袭能力,其机制可能与INHBA促进细胞EMT有关。