简介:摘要目的明确高尿酸血症是否通过诱导内皮型一氧化氮合酶(eNOS)脱偶联导致内皮细胞发生氧化应激造成内皮损伤。方法(1)体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),以不同浓度的尿酸(0、200、400、600、800 μmol/L)作用24 h、48 h和72 h,DHE荧光染色法测定ROS水平,NO试剂盒测定上清液NO含量,观察尿酸对内皮细胞氧化应激的影响。(2)选择结果较稳定的600 μmol/L尿酸浓度,加或不加eNOS抑制剂L-NAME,作用48 h,上述方法测定ROS水平及NO含量,荧光定量PCR检测eNOS mRNA表达,观察高尿酸对eNOS脱偶联的影响。结果高浓度的尿酸可以增加细胞内ROS水平,降低NO含量及eNOSmRNA表达。加入eNOS抑制剂L-NAME后,显著降低由高尿酸所引起的细胞内ROS水平并增加NO含量及eNOSmRNA表达。结论高尿酸血症可以通过eNOS脱偶联使内皮细胞发生氧化应激从而导致内皮损伤。