简介:摘要目的探讨微小RNA(miR)-146b-5p对甲状腺癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法收集河南科技大学第一附属医院2018年1月至2020年10月72对病理确诊为甲状腺癌患者手术标本,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-146b-5p在甲状腺癌及癌旁组织、正常人甲状腺上皮细胞TEC、甲状腺癌细胞TPC-1、FTC133中的表达。双荧光素酶报告实验验证miR-146b-5p对靶基因Smad4的直接靶向调控作用;甲状腺细胞中过表达或沉默miR-146b-5p表达,细胞计数试剂盒(CCK-8)、蛋白质印迹法(Western blot)实验检测miR-146b-5p的不同表达对甲状腺癌细胞TPC-1、FTC133细胞增殖能力的影响及细胞核增殖抗原(Ki-67)、Smad4蛋白表达变化。两组间比较采用独立样本t检验、χ2检验,多组间差异检验采用方差分析。结果状腺癌组织中miR-146b-5p表达明显高于癌旁组织(t=5.028,P<0.05),并与性别、肿瘤大小、TNM分期显著相关(χ2=5.445、4.531、4.589,P<0.05)。miR-146b-5p在甲状腺癌细胞TPC-1、FTC133中表达明显高于正常人甲状腺上皮细胞TEC(t=3.723、5.332,P<0.05)。双荧光素酶实验结果显示,Smad4是miR-146b-5p的靶基因。CCK-8、Western blot实验结果显示,miR-146b-5p mimic组的细胞增殖能力、Ki-67蛋白表达水平明显高于mimic-NC组,Smad4蛋白表达水平明显低于mimic-NC组;而miR-146b-5p inhibitor处理的细胞增殖能力、Ki-67蛋白表达水平明显低于inhibitor-NC组,Smad4蛋白表达水平明显高于inhibitor-NC组(F=6.202、5.324,P<0.05)。结论miR-146b-5p在甲状腺癌组织及细胞中表达上调,且其可能通过靶向Smad4促进甲状腺癌细胞增殖。
简介:摘要目的观察敲低长链非编码RNA(lncRNA) LINC01512对甲状腺癌细胞恶性生物学功能及裸鼠移植瘤形成能力的影响。方法收集2017年3月至2019年6月期间河南科技大学第一附属医院收治的甲状腺癌患者46例,检测LINC01512在甲状腺肿瘤组织和癌旁正常组织中的表达,并分析其与临床指标、预后的关系。向甲状腺癌细胞中转染LINC01512低表达质粒(si-LINC01512)和空白质粒(si-NC),分别检测细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡。此外,向小鼠皮下注射LINC01512低表达质粒,观察裸鼠移植瘤形成能力。结果LINC01512在甲状腺肿瘤组织的表达较正常组织偏高(t=25.050,P<0.05),且表达水平与患者的肿瘤直径、TNM分期、淋巴结转移和不良预后明显相关(P<0.05)。LINC01512在甲状腺癌细胞SW1736和KAT18细胞中高表达(t=9.971、8.314,P<0.05),敲低LINC01512显著抑制甲状腺癌细胞的增殖(t=5.941、7.120,P均<0.01)、迁移和侵袭(t=9.988、10.590、11.010、12.020,P均<0.001),诱导细胞凋亡(t=7.995、6.908,P均<0.01)。体内实验结果表明,与si-NC组比较,低表达LINC01512显著抑制小鼠甲状腺肿瘤的生长(F组间/P组间=135.30/<0.001,F时间/P时间=319.50/<0.001,F交互/P交互=13.58/<0.001,t=6.754,P<0.01)。结论敲低LINC01512可显著抑制甲状腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡,并抑制裸鼠移植瘤生长。
简介:摘要目的探讨miR-497通过靶向调节Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1)表达对甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)细胞生物学行为的影响。方法将人PTC细胞株TPC-1细胞分为对照组、miR-497组、si-YAP1组和miR-497+si-YAP1组,采用LipofectamineTM3000脂质体转染,荧光素酶报告实验验证miR-497和YAP1靶向关系。MTT法检测各组细胞增殖活性,流式细胞仪分析细胞凋亡率,Transwell检测侵袭细胞数,划痕实验检测细胞迁移率。Western blot检测细胞周期素D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)和活化的半胱天冬酶3(cleaved Caspase-3)表达。采用SPSS 22.0分析数据,正态分布计量资料以均数±标准差(±s)表示,多组间比较采用单因素方差分析,两两组间比较采用SNK-q。结果与对照组比,miR-497组和si-YAP1组细胞YAP1 mRNA和蛋白表达下降(q=14.682、14.597,23.743、23.571;P<0.05),细胞增殖活性、侵袭细胞数和迁移率下降(q=4.724、4.568、3.841,4.216、3.952、3.274;P<0.05),凋亡率升高(q=3.783、4.336,P<0.05),CyclinD1、MMP-2、MMP-9和cleaved Caspase-3蛋白表达下降(q=5.823、5.981、6.036、6.485,5.934、6.110、6.573、6.614;P<0.05),TIMP-1蛋白表达升高(q=6.071、6.148,P<0.05);与si-YAP1组相比,miR-497+si-YAP1组细胞miR-497水平升高(q=14.726,P<0.05),YAP1 mRNA和蛋白表达下降(q=3.089、3.126,P<0.05),细胞增殖活性、侵袭细胞数和迁移率下降(q=2.654、2.537、2.246,P<0.05),凋亡率升高(q=2.875,P<0.05),CyclinD1、MMP-2、MMP-9和cleaved Caspase-3蛋白表达下降(q=4.371、4.365、4.383、4.368,P<0.05),TIMP-1蛋白表达升高(q=4.275,P<0.05)。结论miR-497可靶向负调控YAP1表达,抑制TPC-1细胞增殖、侵袭和迁移。
简介:近年来,电视节目“空洞化”的趋势越来越明显。且不说谈话类节目、娱乐性节目或公共性节目,就是新闻类节目也存在这种现象。电视节目“空洞化”的具体表现是:话题抽象,内容空泛;镜头运用常常漫无目的,讲述事实大都省略过程。新闻主要靠“说”,即使有画面也是概貌式地来回扫过。如有一则新闻,报道的是一个山区乡政府在县城修建了一栋住宅,21位乡干部每人都分到了一套110平方米的房子。这些乡干部周一下乡办公,周五返城度周末,当起了“走读干部”。为了主题表达的需要,新闻中将乡干部的住宅与山民的土墙房进行了对比,只是这种对比并不成功,因为片中镜头重复呈现的只是一栋雪白的高楼和一排低矮的土墙房,至于乡干部住宅的“富丽堂皇”与山民土墙房的“破旧不堪”,都是由主持人说出来的。这种“有镜像而无意象”的镜头语言,显然不能产生任何“质感”,因而也就不能给观众留下深刻的印象。