简介：摘要目的观察磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/基质金属蛋白酶(MMP)-9信号通路在芬太尼抑制人胃癌MGC-803细胞侵袭和迁移中的作用。方法将人胃癌MGC-803细胞随机分为空白对照组(C组)、芬太尼组(F组)，LY294002组(LY组)，SB-3CT组(SB组)，LY294002＋芬太尼组(FLY组)和SB-3CT＋芬太尼组(FSB组)。Transwell实验和划痕实验检测细胞侵袭迁移能力，实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分别检测MMP-9和Akt的mRNA和蛋白质的表达，使用方差分析和独立样本t检验分析组间差异。结果F组胃癌细胞侵袭数低于C组(35.91±3.36比48.46±4.86，t＝3.679，P<0.05)、迁移数低于C组(74.75±3.76比96.00±5.20，t＝5.739，P<0.05)细胞迁移率(%)低于C组(14.29±4.29比22.43±3.37，t＝3.591，P<0.05)，Akt mRNA表达低于C组(0.77±0.02比1.00，t＝8.110，P<0.05)、MMP-9 mRNA表达低于C组(0.87±0.08比1.00，t＝2.967，P<0.05)、Akt-1蛋白表达低于C组(0.76±0.04比0.90±0.05，t＝3.940，P<0.05)和MMP-9蛋白表达低于C组(0.76±0.05比0.94±0.04，t＝4.774，P<0.05)，差异均有统计学意义。FLY组胃癌细胞侵袭数低于LY组(18.45±4.86比33.62±4.13，t＝4.999，P<0.05)、细胞迁移数低于LY组(42.79±3.56比71.79±7.60，t＝5.986，P<0.05)和细胞迁移率(%)低于LY组(7.52±1.30比11.02±1.73，t＝2.811，P<0.05)，FLY组Akt mRNA表达低于LY组(0.60±0.05比0.76±0.17，t＝3.468，P<0.05)、MMP-9 mRNA表达低于LY组(0.75±0.06比0.88±0.03，t＝3.288，P<0.05)、Akt-1蛋白表达低于LY组(0.60±0.02比0.75±0.05，t＝4.783，P<0.05)和MMP-9蛋白表达低于LY组(0.48±0.03比0.74±0.06，t＝7.266，P<0.05)，差异均有统计学意义。FSB组胃癌细胞侵袭数低于SB组(18.67±2.15比32.33±6.20，t＝3.607，P<0.05)、细胞迁移数低于SB组(45.67±4.63比75.04±4.47，t＝7.898，P<0.05)和细胞迁移率(%)低于SB组(7.09±1.69比14.39±2.06，t＝4.745，P<0.05)，FSB组Akt mRNA表达低于SB组(0.53±0.11比0.76±0.07，t＝2.950，P<0.05)、MMP-9 mRNA低于SB组表达(0.63±0.07比0.84±0.01，t＝3.687，P<0.05)、Akt-1蛋白表达低于SB组(0.61±0.03比0.75±0.04，t＝4.573，P<0.05)和MMP-9蛋白表达低于SB组(0.53±0.07比0.72±0.05，t＝3.730，P<0.05)，差异均有统计学意义。芬太尼可降低细胞侵袭和迁移能力，MMP-9和p-Akt表达减少，且芬太尼联合LY294002或SB-3CT较单独用药时进一步加强了抑制效果。结论芬太尼抑制人胃癌MGC-803细胞侵袭和迁移的机制与抑制PI3K/Akt/MMP-9信号通路有关。

简介：摘要目的探讨缺氧预处理对异丙酚诱导新生大鼠大脑神经毒性的影响。方法SPF级SD大鼠75只，日龄7 d，体重10~15 g，采用随机数字表法将其分为5组（每组15只）：生理盐水组（N组），腹腔注射生理盐水100 µl；脂肪乳剂组（F组），腹腔注射脂肪乳剂100 µl；异丙酚组（P组），腹腔注射异丙酚100 mg/kg；缺氧预处理组（H组），大鼠置于8％氧浓度10 min，空气10 min，循环5次，空气中恢复2 h；缺氧预处理＋异丙酚组（H+P组），先给予缺氧预处理（同H组），后给予异丙酚（同P组）。大鼠苏醒后时点，断头取海马组织：制作电镜标本，应用透射电镜观察各组海马神经细胞的超微结构；制作石蜡切片，行TUNEL法染色，检测TUNEL阳性细胞的数量；Western blot法检测活化的半胱氨酸蛋白酶-3 （cleaved-caspase-3）、B淋巴细胞瘤-2 (B-cell lymphoma-2, Bcl-2）和B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白（B-cell lymphoma-2-associated X protein, Bax）蛋白水平。结果与N组比较，P组海马神经细胞萎缩、细胞器溶解、核仁消失，TUNEL阳性细胞数量明显增加（P<0.05），Bax蛋白和cleaved-caspase-3蛋白水平升高（P<0.05），Bcl-2蛋白水平降低（P<0.05）。与P组比较，H+P组海马神经细胞的细胞膜完整、细胞器和细胞核清晰可见、核染色质稍有减少，TUNEL阳性细胞数量减少（P<0.05），Bax蛋白和cleaved-caspase-3蛋白水平降低（P<0.05），Bcl-2蛋白水平升高（P<0.05）。结论缺氧预处理可以减轻异丙酚对大鼠发育期大脑的神经毒性，部分机制可能是上调海马神经细胞抗凋亡蛋白Bcl-2和下调促凋亡蛋白Bax、cleaved-caspase-3水平。