简介:摘要:现如今被,我国经济发展十分迅速,研究旨在建立一种快速检测产单核细胞李氏杆菌的方法。通过PCR扩增产单核细胞李氏杆菌(LM)内化素G(InlG)基因,构建pET-32a-InlG重组表达载体,通过诱导表达获得InlG重组蛋白,将其纯化后免疫小鼠(100μg·只−1),经细胞融合、克隆和筛选共获得了3株阳性杂交瘤细胞株,分别命名为1D2、1D2-1和2H10。经鉴定,其分泌抗体亚型均为IgG1。利用制备的1D2-1作为捕获抗体,产单核细胞李氏杆菌兔多抗作为检测抗体,初步建立检测产单核细胞李氏杆菌的双抗体夹心ELISA方法。Westernblot结果显示3株单克隆抗体(mAb)与InlG均可发生特异性反应。双抗体夹心ELISA方法的特异性试验结果显示,与沙门菌、大肠杆菌、枯草杆菌、白色葡萄球菌和柠檬色葡萄球菌均不发生反应。灵敏度试验结果显示,该方法检测LM纯培养物的检测限为1.0×106CFU·mL−1。重复性试验结果显示,各组变异系数5%~10%之间(<10%)。综上,本研究利用抗内化素G蛋白的mAb和兔多抗建立了双抗体夹心ELISA方法,该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可用于产单核细胞李氏杆菌感染的快速诊断检测。
简介:摘要:介绍了高速动车组的车轮踏面形状特性、不圆度特性及磨耗特性,通过对三种性质的研究与分析,得出车轮磨耗特性对其踏面形状及非圆化程度的影响。研究表明,随着动车组运行里程的增加,车轮的踏面磨耗深度也在不断增加,二者基本呈线性关系; 在车辆运行过程中轮缘不断发生磨损,其磨损量极限值为 2.7mm。车辆运行 20万 km时,车轮不圆度的程度将加快恶化。