简介：摘要目的探讨3’，4’ -二羟基黄酮醇（DiOHF）对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的心肌肥厚的作用及其机制。方法选取7~8周龄雄性C57小鼠40只随机分为对照组（DMSO+生理盐水，n=10）、DiOHF组（6 mg·kg-1·d-1，溶于10% DMSO+90%花生油，n=10）、AngⅡ组（1.5 mg·kg-1·d-1，溶于0.9%生理盐水，n=10）以及AngⅡ+DiOHF组（AngⅡ1.5 mg·kg-1·d-1+DiOHF 6 mg·kg-1·d-1，n=10），各组注射不同试剂溶液4周后停止，使用心脏超声评价各组小鼠心功能。麻醉后颈椎脱臼处死小鼠，称量体质量和心肺质量，取心尖组织进行PCR检测各组小鼠心肌纤维化基因结缔组织生长因子（CTGF）、纤维连接蛋白（Fn1）和炎症基因caspase1和IL-1β mRNA的表达。采用免疫印迹检测各组小鼠心尖组织cleaved caspase1和mature IL-1β蛋白的表达情况。其余组织固定包埋后取短轴最大径平面切片进行HE、Masson染色，评价心肌肥厚及纤维化。选取大鼠心肌细胞系（H9C2）分为DMSO、DiOHF（10 μmol/L，溶于DMSO中）、AngⅡ（1 μmol/L，溶于培养基中）、DiOHF+AngⅡ（10 μmol/L DiOHF预处理2 h后加入1 μmol/L AngⅡ共处理24 h）4组。24 h后对细胞骨架进行鬼笔环肽染色，在荧光显微镜下检测细胞形态，测量心肌细胞表面积。同时收获不同组细胞进行裂解后进行PCR检测caspase1和IL-1β mRNA的表达。采用免疫印迹检测各组细胞活化的cleaved caspase1、mature IL-1β和心肌肥厚相关蛋白脑钠肽（BNP）蛋白的表达情况。结果小鼠实验中，DiOHF的注射可减轻AngⅡ诱导的小鼠射血分数（EF）下降，降低心体质量比和心肺质量比（HW/BW、HW/LW）、心肌横截面积（CSA）和心肌胶原的沉积（均P<0.05）。RT-RCR显示与AngⅡ组相比，AngⅡ+DiOHF组Fn1、CTGF和炎症相关性基因caspase1、IL-1β mRNA的表达降低（均P<0.05）。免疫印迹显示AngⅡ+DiOHF组cleaved caspase1和mature IL-1β蛋白较AngⅡ组表达水平明显降低（0.77±0.09比1.18±0.14，0.90±0.13比1.56±0.30，均P<0.05）。H9C2细胞实验中，与AngⅡ组比较，AngⅡ+DiOHF组减少了细胞表面积，降低了caspase1和IL-1β mRNA的表达，减少了BNP和cleaved caspase1、mature IL-1β蛋白的表达（1.15±0.02比1.45±0.03，0.50±0.03比1.38±0.07，1.14±0.07比2.13±0.13，均P<0.05）。结论DiOHF通过抑制caspase1和IL-1β蛋白的激活，改善AngⅡ诱导的小鼠心脏肥厚和纤维化，保护小鼠心功能。

简介：摘要目的探讨双侧颈上神经节切除对压力负荷型心力衰竭（心衰）小鼠心室重构及心功能的影响。方法健康雄性6周龄C57BL/6小鼠共24只，体重20~25 g。采用随机数字法分为4组，即对照组（n=6，进行假手术）、去神经组（n=6，手术切除双侧颈上神经节）、心衰组［n=6，采用重度胸主动脉缩窄术（sTAB）建立压力负荷型心衰模型］和心衰去神经组（n=6，于sTAB术后2周行双侧颈上神经节切除术）。分别于sTAB术前以及后第2、3、4周行超声心动图检测小鼠心功能。于sTAB术后第4周末处死小鼠，取心肌组织。心肌组织切片行苏木素-伊红（HE）、Masson和免疫组织化学染色进行心肌形态和组织学分析；提取心肌组织蛋白，采用Western blot法检测其酪氨酸羟化酶（TH）、B型利钠肽（BNP）及β1肾上腺素能受体（AR-β1）的蛋白表达水平。结果心衰组和心衰去神经组小鼠sTAB术后第2、3、4周左心室射血分数（LVEF）逐渐减低，术后第4周心衰去神经组小鼠LVEF高于心衰组（P<0.05），而去神经组小鼠各时间点LVEF与对照组比较差异均无统计学意义（P均>0.05）。sTAB术后第4周HE染色结果显示，与对照组比较，去神经组小鼠心肌细胞横截面积差异无统计学意义（P>0.05），心衰组小鼠则较大（P<0.05），而心衰去神经组小鼠较心衰组小（P<0.05）。Masson染色结果显示，对照组和去神经组小鼠心肌组织几乎无蓝染，而心衰组小鼠心肌组织出现大量蓝染，心衰去神经组小鼠蓝染组织少于心衰组。免疫组织化学染色结果显示，去神经组小鼠TH阳性神经纤维密度与对照组比较差异无统计学意义（P>0.05），而心衰组小鼠心肌组织中可见大量TH阳性的神经纤维，心衰去神经组小鼠心肌组织中TH阳性神经纤维的密度较心衰组低（P<0.05）。Western blot结果显示，心衰组小鼠心肌组织中TH蛋白表达水平高于对照组（P<0.05），而心衰去神经组则低于心衰组（P<0.05），且BNP蛋白在各组间表达的差异与TH蛋白相似。与对照组比较，去神经组小鼠AR-β1蛋白表达水平差异无统计学意义（P>0.05），心衰组则较低（P<0.05），而心衰去神经组与心衰组该指标差异无统计学意义（P>0.05）。免疫组织化学染色结果显示，与对照组比较，去神经组小鼠心脏CD68阳性细胞密度差异无统计学意义（P>0.05），心衰组则较高（P<0.05），而心衰去神经组较心衰组低（P<0.05）。结论切除双侧颈上神经节可减小心衰后小鼠心脏交感神经密度，减少巨噬细胞浸润，减轻心室重构，改善心功能。