简介：摘要数字PCR（dPCR）是近年迅速发展起来的一种绝对定量的技术，该技术将含有DNA模板的反应体系分配到大量独立的反应单元中进行PCR，根据泊松分布和统计阳性信号来计算DNA拷贝数。与传统的qPCR相比，dPCR不依赖于扩增曲线，不受扩增效率的影响，具有较高的准确度和重复性，可以实现绝对定量。本文综述了数字PCR发展历史以及在感染性疾病分子诊断、肿瘤液体活检、产前诊断等方面的应用进展，并展望了该技术的应用前景。

简介：摘要目的建立一种拉曼光谱技术检测血清的方法，用于胃癌诊断的研究。方法收集2019年4—11月在陆军军医大学第一附属医院确诊的胃癌患者110例［男73例，女37例，年龄为（57.4±10.3）岁］，确诊的结直肠癌患者74例［男48例，女26例，年龄为（58.3±12.2）岁］，以及同期健康体检者100名［男59名，女41名，年龄为（55.6±10.61）岁］，收集受试者空腹静脉血血清样本，使用XploRA PLUS型拉曼光谱仪，在激发光源532 nm、100倍物镜、取谱区间200~2 000 cm-1等条件下，对血清样本进行无损、非接触式快速检测，采集血清样本的拉曼光谱图。使用拉曼光谱采集和处理配套软件LabSpec6对获得的拉曼光谱进行平滑、基线校正、归一化处理，将获得的拉曼光谱数据导入到多变量统计学分析软件SIMCA14.1中，使用主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘法判别分析（OPLS-DA）方法进行统计学分析，构建模型分析健康和胃癌两组血清样本之间的差异，绘制工作特征曲线（ROC）评估模型的诊断性能，并使用结直肠癌组血清样本对模型的可靠性进行验证。结果检测健康组和胃癌组血清样本获得重复性较好的6个拉曼光谱峰，分别位于1 001.17、1 154.63、1 337.89、1 446.85、1 515.33、1 658.34 cm-1处，在这6个拉曼峰处，健康组和胃癌组的拉曼强度差异明显。在1 001.17、1 154.63、1 515.33 cm-1位移处，健康组拉曼强度高于胃癌组；在1 337.89、1 446.85、1 658.34 cm-1位移处，胃癌组拉曼强度高于健康组。得到模型的R2X（cum）=0.809，R2Y（cum）=0.819，Q2（cum）=0.758，基于OPLS-DA模型绘制ROC特征曲线，胃癌组曲线下面积（AUC）分别为0.998。在胃癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期血清拉曼光谱中可检测到重复性较好的6个峰，分别位于1 001.85、1 155.07、1 338.36、1 445.75、1 515.92、1 657.68 cm-1位移处，在1 155.07、1 515.92 cm-1位移处，胃癌Ⅳ期拉曼强度显著高于胃癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期。结论健康组与胃癌OPLS-DA模型性能良好，能将健康组和胃癌组有效的区分开；模型可靠性验证发现健康组、胃癌组、结直肠癌组也能有效的分离；拉曼光谱检测血清技术联合多变量统计中的OPLS-DA方法，可实现对健康者与胃癌患者血清样本的非标记检测。

简介：摘要本研究旨在构建基于核酸滚环扩增（RCA）的简便快速、超灵敏的光学生物传感技术，并将其运用于结核杆菌耐药相关基因的多重检测。本研究在2020年2月至2021年5月期间，于陆军军医大学第一附属医院检验科，针对异烟肼、利福平和链霉素耐药的高频基因突变位点katG315（AGC➝ACC）、rpoB531（CAC➝TAC）和rpsL43（AAG➝AGG），分别设计锁式探针（padlock probe，PLP）、引物和捕获探针，构建了基于磁珠的固相RCA恒温扩增反应体系，并进行了实验参数的优化。通过多色荧光探针（Cy3/Cy5/ROX）对RCA产物精准捕获与信号放大，实现了对3种突变基因的单管多重检测。进一步对该方法的灵敏度、特异性与线性范围等分析性能进行验证，结果显示同一反应体系中katG315的响应范围为1.0 pmol/L至0.1 nmol/L，rpoB531和rpsL43的响应范围为1.0 pmol/L至50.0 pmol/L和1.0 pmol/L至20.0 pmol/L，且该方法具有较好的特异度与灵敏度，在混合靶标中可精确识别单碱基突变，最低检出限低至1.0 pmol/L；在模拟血清样本的回收实验中，回收率可达95.0%~105.2%。综上，本研究构建的恒温扩增型多重检测方法可快速实现3种耐药突变位点的单管多重检测，该技术成本低廉、简便快速、不依赖大型设备，为病原体耐药基因检测提供了一种新的分析方法。

简介：摘要拉曼光谱技术以其“指纹图谱”性、无损检测、灵敏度高、简便快速等独特的技术优势, 在生物大分子、病原微生物检测、肿瘤精准分子诊断等领域展现出良好的应用潜力。该文立足于临床检验应用，简要阐述了拉曼光谱检测的技术原理，从生物大分子、细胞、组织、病原微生物、体液检测等多层次详细介绍了拉曼光谱技术在生物医学应用方面的技术发展及最新研究成果，探讨了临床转化亟需克服的问题及发展前景。

简介：摘要目的构建一种太赫兹（THz）超材料传感方法用于microRNA-21（miRNA-21）的信号放大检测。方法首先构建THz超材料传感方法，并用聚丙烯酰胺凝胶电泳及zeta电位验证方法的可行性；对传感器检测条件进行优化之后，对不同浓度的miRNA-21以及其他不同的miRNAs进行检测，并与其他microRNA检测方法进行比较；最后，对该传感器的回收率进行了评价。结果在最优实验条件下，通过双链特异性核酸酶（DSN）循环识别与滚环扩增（RCA）的双重信号放大策略，该THz超材料传感器对靶标miRNA-21的响应范围为10 fmol/L至10 nmol/L，检测限为8.49 fmol/L。并且该传感器具有较好的特异性，具备了从多种miRNAs中识别靶标miRNA-21的能力，并且在商业化人血清样本中的回收率可达94.33%到115.33%。结论该THz传感器可以实现靶标miRNA-21的高灵敏、高特异性检测，具备了在miRNA相关疾病无标记诊断与早期预警的潜力。

简介：摘要新型冠状病毒流行期间，检验科在诊断、治疗、疗效评估、预后判断等环节上都发挥了重要的作用。火神山医院作为疫情暴发期间应急新建的COVID-19确诊病例的定点收治医院，如何快速高效组建并开展检验科常规检验，以及如何创造条件实施新型冠状病毒核酸检测，具有十分重大的意义。该文通过分析火神山医院应急检验保障体系的建设经验，为突发疫情下新建传染病医院的应急检验保障体系的建设提供思路和参考。

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