简介：摘要目的原核表达糖尿病创面来源大肠杆菌谷氧还蛋白(Grx)GrxB，制备GrxB多克隆抗体。方法根据美国国家生物技术信息中心(NCBI)公布的大肠杆菌K12标准株grxB基因序列(Gene ID：946926)设计扩增引物，以本科室前期分离到的一株糖尿病创面大肠杆菌基因组(煮沸裂解法获得)为模板，通过聚合酶链反应(PCR)扩增出grxB全长663 bp，使用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后连接至表达载体pET-30a。将重组质粒pET-30a-grxB转化至大肠杆菌BL21(DE3)，经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达GrxB蛋白，使用N2+镍离子层析柱对蛋白进行纯化。纯化后的重组GrxB蛋白免疫BALB/c小鼠，完成免疫程序后使用蛋白质印迹法(Western blot)和间接酶联免疫吸附试验(ELISA)对多克隆抗体的特异性和效价进行测定。两组间比较采用t检验。结果经测序，扩增出的grxB序列与K12标准株的完全一致，并成功表达出可溶性重组GrxB蛋白，大小为31.2 kDa，与预测大小一致。血清51 200倍稀释后，免疫组效价显著高于磷酸盐缓冲液(PBS)组(1.146±0.066比0.12±0.011，t＝15.000，P<0.05)，免疫组血清与重组GrxB蛋白和大肠杆菌全菌均具有良好的特异性反应。结论成功表达可溶性重组GrxB蛋白，并获得高滴度多克隆抗体。

简介：摘要外泌体是一种直径为30～150 nm的膜性小囊泡，由细胞内多囊泡出芽形成，可与细胞膜融合释放至细胞外基质中。脂肪源性间充质干细胞(ADSC)是具有自我更新及多向分化潜能的细胞，通过旁分泌外泌体的作用转运活性物质，调控机体炎症反应，细胞的迁移、增殖、分化以及血管的生成等，从而增强创面修复能力，促进创面愈合，抑制瘢痕形成。慢性创面是指无法通过正常有序而及时的修复过程达到解剖和功能上的完整状态，病程超过4周的创面。当前针对慢性创面的治疗方法多种多样，其中ADSC具有良好的应用前景，但因伦理问题，存在一定的局限性，而外泌体可避开这个问题。本文就ADSC外泌体治疗慢性创面进行综述。

简介：摘要目的应用荟萃分析方法系统评价右美托咪定复合氯胺酮在烧伤患者换药过程中应用的安全性与疗效。方法以"burns、dexmedetomidine、ketamine、dressing"为检索词检索《PubMed》《Cochrane Central》《Embase》《Web of Science》等外文数据库，以"右美托咪定、氯胺酮、烧伤、烫伤、热力伤、换药"为检索词检索《中国期刊全文数据库》《万方数据库》《中国学术期刊网络出版总库》等中文数据库，检索各数据库自建库起至2019年3月公开发表的关于烧伤患者换药过程中应用右美托咪定复合氯胺酮镇静镇痛的随机对照试验研究。结局指标为给药后5 min收缩压、苏醒躁动评分、氯胺酮用量、换药耗时、体动/苏醒时间、疼痛评分、换药开始10 min及换药后1 h Ramsay镇静评分、医师满意度评分、精神神经症状、恶心呕吐次数、恶心呕吐评分。采用RevMan 5.3和Stata 14.0统计软件对符合标准的研究进行荟萃分析。结果共纳入7篇文献396例烧伤患者，包括同时接受右美托咪定和氯胺酮镇静镇痛的右美托咪定＋氯胺酮组患者198例、仅接受氯胺酮镇静镇痛的单纯氯胺酮组患者198例。纳入的7项研究偏倚风险均不确定。与单纯氯胺酮组比较，右美托咪定＋氯胺酮组患者给药后5 min收缩压、苏醒躁动评分、恶心呕吐评分明显降低，标准化均数差＝－13.89、－0.84、－0.99(95%置信区间＝－20.89～－6.89、－1.17～－0.52、－1.31～－0.68，P<0.01)；换药开始10 min与换药后1 h Ramsay镇静评分明显升高，标准化均数差＝1.53、0.72(95%置信区间＝1.05～2.02、0.13～1.31，P<0.05或P<0.01)；精神神经症状、恶心呕吐次数明显减少，相对危险度＝0.20、0.16(95%置信区间＝0.07～0.58、0.05～0.58，P<0.01)。2组患者氯胺酮用量、换药耗时、体动/苏醒时间、疼痛评分、医师满意度评分均相近。换药耗时、氯胺酮用量不存在发表偏倚(P>0.05)，其他指标可能存在发表偏倚(P<0.05)。结论相较于单纯应用氯胺酮，在烧伤患者换药过程中联合应用右美托咪定与氯胺酮可以减少躁动、恶心呕吐及精神神经等并发症的发生，更好地稳定血压，提升镇静效果。