简介:摘要目的基于Zeste同源物增强子2(EZH2)探究长链非编码RNA(lncRNA)同源盒A簇反义RNA 2(HOXA-AS2)对人骨髓间充质干细胞(hBMSC)成骨分化的影响及机制。方法将体外培养hBMSC分为对照组(Control组)、si-NC组、HOXA-AS2沉默组、pcDNA3.1-NC组、HOXA-AS2过表达组、HOXA-AS2沉默+si-EZH2组共6组,转染24 h后采用hBMSC成骨分化培养基诱导成骨分化。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测HOXA-AS2、EZH2 mRNA表达;茜素红染色观察钙结节的形成情况;碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒测量ALP活性;蛋白质印迹法(Western blot)检测EZH2、Runt相关转录因子2(RUNX2)、骨桥蛋白(OPN)蛋白表达。两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析(One-way ANOVA)。结果HOXA-AS2沉默组中ALP活性、RUNX2、OPN表达明显低于Control组(0.63±0.09比1.00±0.00,t=5.610,P<0.05;0.27±0.04比0.48±0.06,t=5.412,P<0.05;0.20±0.04比0.36±0.04,t=5.032,P<0.05),差异有统计学意义;EZH2 mRNA(2.65±0.14比1.00±0.00,t=31.726,P<0.05)和蛋白(1.25±0.10比0.77±0.09,t=10.182,P<0.05)表达明显高于Control组,差异有统计学意义。HOXA-AS2过表达组结果与HOXA-AS2沉默组相反。在沉默HOXA-AS2的基础上敲低EZH2的表达逆转了沉默HOXA-AS2对hBMSC成骨分化能力的抑制作用。结论过表达HOXA-AS2可能通过下调EZH2的表达,促进hBMSC成骨分化。