简介:摘要目的观察甲状旁腺激素(PTH)1-34是否可以阻断晚期糖基化终末产物(AGEs)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的负性成骨作用及其可能信号通路。方法采用全骨髓法分离培养4周龄SD大鼠的BMSCs,分别给予成骨诱导液、牛血清血蛋白(BSA)、AGEs、AGEs联合PTH1-34预处理,7 d后行实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原酶(COL-Ⅰ)mRNA表达水平,Western印迹法检测β-catenin、osterix(OSX)、核心结合蛋白因子2(RUNX2)、终末期氨基糖基化受体蛋白表达水平。21 d后采用茜素红染色检测矿化结节并定量;在10-8 mmol/L的PTH1-34中加入Wnt通路特异性阻断剂Dickkopf-1(DKK1)1 μg/ml后,Western印迹法再次检测β-catenin、OSX、RUNX2蛋白表达水平。结果AGEs抑制ALP、COL-Ⅰ mRNA及β-catenin、OSX、RUNX2蛋白表达(P<0.05),而PTH1-34预处理后逆转AGEs的作用,ALP、COL-Ⅰ mRNA及β-catenin、OSX、RUNX2蛋白表达较AGEs组增加(P<0.05),茜素红染色矿化结节呈红棕色且增多,定量检测OD值,PTH1-34预处理组高于AGEs组(P<0.05)。DKK1(1 μg/ml)作用后,β-catenin、OSX蛋白表达均较BSA组减少(P<0.05)。结论PTH1-34可通过Wnt/β-catenin信号通路阻断AGEs对BMSCs的负性成骨作用。