简介：摘要目的观察激素性股骨头坏死(SONFH)患者来源的骨髓间充质干细胞(BMSCs)分泌的细胞外囊泡(SONFH-BMSCs-EVs)对正常BMSCs成骨分化的影响。方法骨髓来源于郑州大学第一附属医院的10例需行髋关节置换术的患者(激素性股骨头坏死5例，非股骨头坏死5例)，提取其中的BMSCs进行培养。采用差速离心法分离SONFH-BMSCs-EVs。将正常BMSCs中加入SONFH-BMSCs-EVs共培养作为实验组，对照组加入等量磷酸盐缓冲液(PBS)，分别用噻唑蓝(MTT)法，半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3/7活性实验检测SONFH-BMSCs-EVs对BMSCs的增殖、凋亡的影响。取第3代BMSCs进行成骨诱导，诱导过程中实验组加入SONFH-BMSCs-EVs，再进行茜素红染色，检测其对BMSCs成骨分化的影响。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)，蛋白质印迹法(Western blot)检测Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路上成骨相关因子基因、蛋白表达。采用单因素方差分析和t检验进行统计学分析。结果SONFH-BMSCs-EVs为大小不均的圆形膜性囊泡，粒径范围在40~200 nm之间，且表达CD63、CD9标志蛋白。共聚焦显微镜下显示细胞外囊泡可以被BMSCs摄取。MTT法检测BMSCs增殖能力实验组(0.5±0.1)明显低于对照组(1.0，t＝11.160，P<0.01)。Caspase-3/7活性实验检测BMSCs凋亡，实验组(1.4±0.2)明显高于对照组(1.0)，(t＝3.458，P<0.01)。茜素红染色结果显示实验组的红染染色阳性率显著小于对照组。Western blot结果显示Wnt/β-catenin信号通路上关键因子蛋白表达分别为β-catenin(实验组为0.68±0.10，对照组为1.37±0.17，t＝6.960，P<0.01)、Runt相关基因2(Runx2，实验组为0.66±0.13，对照组为1.30±0.16，t＝6.240，P<0.01)，差异均有统计学意义。RT-PCR检测实验组β-catenin、Runx2相对基因表达分别为0.59±0.12、0.66±0.08，差异有统计学意义(t＝6.960、6.240，P均<0.01)。结论激素性股骨头坏死患者来源的BMSCs分泌的细胞外囊泡可以抑制正常BMSCs增殖及成骨分化。

简介：摘要目的探讨激素性股骨头坏死患者骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨成脂分化功能机制，检测经典Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路中关键因子的表达差异。方法从预行全髋关节置换术的4例激素性股骨头坏死患者和4例非股骨头坏死患者的骨髓液中提取骨髓间充质干细胞，分别设为实验组和对照组，应用噻唑蓝(MTT)法、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3/Caspase7活性细胞凋亡检测及活细胞和死细胞试验评估激素对BM-MSCs增殖和凋亡的影响。取第3代细胞成骨诱导后进行茜素红染色及成脂诱导后油红O染色，检测激素对BMSCs成骨成脂分化的影响。蛋白质印迹法(Western blot)和实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测经典Wnt/β-catenin信号通路中关键因子的表达，采用单因素方差分析和t检验比较各组间差异。结果激素性股骨头坏死组MTT法BMSCs增殖能力低于对照组(0.7±0.2比1.0，P<0.01)，差异有统计学意义。Caspase 3/7活性细胞凋亡检测激素性股骨头坏死组BMSCs凋亡高于对照组(1.3±0.2比1.0，P<0.05)。活细胞试验，激素性股骨头坏死组BMSCs活细胞数少于对照组(414.3±26.3比600.0±79.3，P<0.01)。死细胞试验激素性股骨头坏死组BMSCs死细胞数多于对照组(139.3±23.0比25.7±6.8，P<0.01)。成骨诱导后茜素红染色，实验组红染面积明显小于对照组。成脂诱导后行油红O染色，实验组红染脂滴数量明显多于对照组。Western blot检测激素性股骨头坏死中关键因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)蛋白表达升高(1.35±0.23)；Runt相关基因2(RUNX2)、Wnt5a/b、β-Catenin蛋白表达降低，分别为0.58±0.11、0.69±0.22、0.66±0.11。实时定量PCR检测BMP2、RUNX2、Collagen Ⅰ mRNA表达降低，分别为0.73±0.16、0.57±0.17、0.48±0.26；PPARG mRNA表达升高(1.48±0.32，P<0.01)，差异均有统计学意义。结论激素性股骨头坏死是由于经典Wnt/β-catenin信号通路被抑制导致骨髓间充质干细胞增殖能力下降及成骨成脂分化平衡紊乱。

简介：交通建设一直都是我国经济建设的重中之重，提高交通工程施工质量对于促进经济发展具有非常重要的意义。在交通土建施工中路基路面施工属于非常关键的环节，一些道路工程质量问题也主要表现在路基路面上面，因此需要强化土建工程施工中路基路面施工的管理措施，加强对施工质量的控制，以确保交通土建工程的施工质量。

简介：外汇套息交易是经济＂全球化＂和金融＂一体化＂的产物,日新月异的金融创新和国际资本流动的便利,促使套息交易更加方兴未艾,甚至高比例的杠杆交易规则也被引入到套息交易中。因此,本文将对外汇套息交易中的影响因素进行分析和研究。