简介:摘要目的探讨对比剂诱导的急性肾损伤(contrast-induced acute kidney injury,CIAKI)中内源性硫化氢水平是否发生变化,补充硫化氢是否可下调Nod样受体蛋白3(Nod-like receptor protein 3,NLRP3)炎症复合体从而保护肾小管上皮细胞对抗对比剂所致的肾损伤。方法24只体重180~220 g清洁级健康雄性Sprague-Dawley大鼠按随机数字表法分为对照组、CIAKI组(碘普罗胺2.9 g/kg)及CIAKI+NaHS组(NaHS 4 mg/kg处理3 d后予碘普罗胺2.9 g/kg)组,每组8只。对肾组织进行全转录组测序及生物信息学分析,HE、PAS染色观察肾组织病理改变,TUNEL法检测肾小管上皮细胞损伤情况,免疫荧光染色检测肾组织炎症复合体NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a caspase recruitment domain,ASC)、caspase-1的表达。在人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)中探讨硫化氢在对比剂(碘普罗胺200 mgI/ml)诱导的细胞损伤中的作用,CCK-8法测定细胞存活率。结果与对照组相比,CIAKI组大鼠内源性硫化氢合成酶相关基因胱硫醚-β-合成酶(CBS)、胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)和3-巯基丙酮酸硫转移酶(3-MST)水平下降(均P<0.05)。CBS、CSE和3-MST基因表达水平与肾功能临床生化指标血肌酐、尿素氮和胱抑素C水平呈负相关(均P<0.05)。与CIAKI组比较,CIAKI+NaHS组大鼠血肌酐、尿素氮及胱抑素C水平较低,肾脏病理改善,肾小管上皮细胞焦亡减少,肾组织炎症复合体NLRP3、ASC、caspase-1的水平较低(均P<0.05)。在HK-2细胞中,对比剂+NaHS组细胞存活率高于对比剂组;应用CBS抑制剂减少内源性硫化氢水平,对比剂诱导的HK-2细胞存活率进一步降低(P<0.05)。结论内源性硫化氢系统受损是CIAKI发病的关键环节,上调硫化氢水平可改善CIAKI大鼠的肾损伤,其保护机制与调节NLRP3炎症复合体相关。