简介:摘要目的探讨巨噬细胞雄激素受体(androgen receptor,AR)是否通过调控白细胞介素(interleukin,IL)-1β基因表达影响高磷诱发的血管平滑肌细胞钙化。方法采用人单核细胞系THP-1细胞,利用染色质免疫沉淀实验检测AR是否与IL-1β启动子的雄激素受体元件(androgen receptor element,ARE)序列结合,通过荧光素酶分析实验检测AR是否调控IL-1β基因表达。基因沉默THP-1细胞的AR,用携带载体或shRNA的慢病毒转染THP-1细胞,流式细胞术分选出带荧光标记的阳性转染细胞THP-1ARsc(对照组)和THP-1ARsi(沉默单核细胞AR),Western印迹法检测THP-1ARsc、THP-1ARsi细胞的AR表达水平,通过佛波酯(50 ng/ml)诱导获得巨噬细胞MФARsc(对照组)或MФARsi(沉默巨噬细胞AR),酶联免疫吸附试验检测MФARsc或MФARsi条件培养基的IL-1β表达水平。用MФARsc或MФARsi的条件培养基加入磷酸盐(磷酸二氢钠,终浓度2.5 mmol/L)后对人主动脉平滑肌细胞(human aortic smooth muscle cells,HASMC)进行培养,茜素红S染色分析HASMC的钙化情况,Western印迹法检测成骨细胞标志物RUNX2和HASMC标志物SM22α的表达水平;中和实验分析IL-1β介导巨噬细胞AR对HASMC钙化的影响。结果AR与IL-1β启动子的ARE序列结合并调控IL-1β基因表达。与MФARsc细胞比较,MФARsi细胞条件培养基的IL-1β蛋白表达水平显著下降(P<0.001)。与MФARsc条件培养基比较,MФARsi条件培养基HASMC钙沉积显著减少,RUNX2蛋白表达下降而SM22α蛋白表达增多(均P<0.05);MФARsi条件培养基+IgG抗体组较MФARsc条件培养基+IgG抗体组HASMC钙化显著抑制,MФARsc条件培养基+IL-1β抗体组较MФARsc条件培养基+IgG抗体组HASMC钙化显著抑制,而MФARsi条件培养基+IgG抗体组和MФARsi条件培养基+IL-1β抗体组均较MФARsc条件培养基+IL-1β抗体组HASMC钙化抑制程度更大(均P<0.05)。结论巨噬细胞AR通过与IL-1β启动子内的ARE序列结合调控IL-1β的表达,IL-1β介导巨噬细胞AR对高磷诱发HASMC钙化的影响。
简介:摘要目的建立与人喉癌前病变发生相似的动物模型。方法36只Wistar大鼠随机分为实验组和对照组,每组18只,使用体积分数为1%的4-硝基喹啉-1-氧化物(4-nitroquinoline-1-oxide,4NQO)溶液涂抹实验组大鼠喉部黏膜至20周,生理盐水涂抹对照组大鼠喉部黏膜,涂抹方法及时间同实验组,肉眼及内镜观察喉部黏膜变化,组织学观察并确定病变形成。应用SPSS 22.0软件进行统计学处理。结果实验组大鼠在第4、8、12、16、20周的食量、饮水量及体重均低于对照组,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。实验组大鼠喉部逐渐出现白色斑块、浅表溃疡、糜烂以及粟粒状颗粒,组织学表现过程为轻、中、重度不典型增生及原位癌,对照组大鼠喉黏膜符合正常上皮表现。实验组大鼠喉黏膜组织中Ki67阳性细胞数在第4、8、12、16、20周的个数分别为13.5±2.4、35.6±5.8、53.4±8.3、78.8±11.6、80.6±12.4,对照组均为0个,差异均有统计学意义(t值分别为9.74、10.63、11.14、11.77、11.26,P值均<0.01)。结论4NQO涂抹法的致病过程和组织病理学特征与人相似,此方法制备喉癌前病变动物模型实用易行,结果可靠。
简介:摘要:随着我国经济发展的日益壮大,从而带动我国建筑业的迅猛发展;随着建筑业发展的同时,建筑市场的竞争也更加激烈;房屋建筑市场领域的发展面临着众多挑战。在这种形势下,房屋建筑企业若想在众多建筑企业之中脱颖而出、作出成绩,就必须采取一系列举措来增强自身的竞争力。这其中,做好房屋建筑的工程招标就是十分重要的一项举措。实施有效的建筑工程招标手段,不仅有利于控制好房屋建筑项目的施工成本,且可以获得更多的经济效益;更加有力地保障房屋建筑的工程项目质量本事,对于提升建筑企业形象、扩大建筑企业影响力也是大有帮助。考虑到这些,笔者针对房屋建筑工程招投标阶段的造价成本控制展开分析,希望可以为优化这一内容做出一些贡献。