简介：摘要目的探讨自噬对于风湿性心脏病的瓣膜间质细胞(VICs)生物学特征改变以及增殖能力的影响。方法使用肝素诱导人主动脉瓣膜间质细胞(购自上海赛百慷生物技术股份有限公司)向肌成纤维细胞分化，而后使用自噬抑制剂LY294002(15 μmol/L)进行干预，将细胞分为对照组、抑制剂组、诱导组、实验组。使用蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、碱性磷酸酶(ALP)、Beclin1、微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)蛋白表达水平；采用细胞增殖及毒性检测试剂盒(CCK-8)分析自噬对4组细胞增殖的影响。结果蛋白印记结果显示对照组的ALP和α-SMA蛋白(0.827±0.123、0.716±0.141)显著低于诱导组(1.384±0.165、1.315±0.223)，差异有统计学意义(t＝4.669，P<0.01、t＝3.929，P<0.05)；对照组Beclin1和LC3-Ⅱ(0.807±0.182、0.392±0.150)显著低于诱导组(1.271±0.067、1.404±0.018)，差异有统计学意义(t＝4.131，P<0.05、t＝11.535，P<0.01)；诱导组的ALP和α-SMA蛋白(1.385±0.165、1.447±0.014)显著高于实验组(0.939±0.189、0.907±0.324)，差异有统计学意义(t＝2.882，P<0.05)。CCK-8细胞增殖实验结果显示各组VICs细胞的细胞活力差异有统计学意义(F＝545.843，P<0.01，η2＝0.986)，对照组细胞活力显著高于诱导组，差异有统计学意义(t＝29.753，P<0.01，d＝1.101)；实验组细胞活力也显著高于诱导组，差异有统计学意义(t＝14.034，P<0.01，d＝0.878)。结论自噬促进风湿性心脏病瓣膜间质细胞分化，同时抑制其细胞活性。

简介：摘要目的探讨微小RNA-22(miR-22)对瓣膜间质细胞成骨分化的作用及其在主动脉瓣钙化发生发展中的作用。方法以主动脉瓣置换术中切除的钙化性主动脉瓣疾病15例，其中钙化主动脉瓣组织作为实验组，正常主动脉瓣组织为对照组；苏木精-伊红(HE)染色、VonKossa法观察瓣膜钙化程度；实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、免疫荧光试验检测瓣膜组织中miR-22的表达变化和蛋白表达水平。组间比较采用方差分析。结果HE染色以及Von Kossa钙沉积染色提示实验组中有大量羟基磷灰石沉积；免疫组织化学染色结果显示实验组Runx相关转录因子2(Runx2)、骨钙素(OCN)的阳性表达。相较对照组，实验组miR-22基因表达明显升高(P<0.01)，实验组成骨相关基因Runx2高于对照组(1.39±0.02比1.09±0.01，F＝4.00，P<0.01)；实验组成骨相关基因OCN高于对照组(0.92±0.03比0.58±0.02，F＝2.250，P<0.01)，实验组去乙酰化转移酶6(HDAC6)低于对照组(1.09±0.05比1.52±0.04，F＝1.563，P<0.01)。双荧光素报告基因检测和Western blot检测结果显示miR-22过表达可以显著增加成骨相关基因的表达；过表达miR-22显著减低HDAC6的表达。结论miR-22通过抑制HDAC6的表达促进Runx2、OCN的表达和活性，瓣膜间质细胞成骨分化，参与主动脉瓣膜钙化进程。

简介：那天二叔打电话过来，问方兴清明回家的事。方兴支支吾吾，只说现在还不能定。这许多年，一直在外面打拼，过年都不回家。清明节回家，方兴还真的没有打算。二叔忙说，知道你们公司刚开张，事情多，走不开。回不回都行。是有个事要和你商量，现在村里搞美丽乡村建设，村路两旁全部栽红叶石楠，家门口的那棵刺槐树刚好在路边，影响统一规划，问能不能砍了？