简介：摘要目的探讨血浆外泌体源性miR-20a-5p通过靶向PIK3R1对雌激素受体阳性的乳腺癌（estrogen receptor-positive breast cancer，ER（+）BC）骨转移的影响。方法借助生物信息学网站检索与ER（+）BC骨转移相关的数据集，选择miR-20a-5p纳入研究。收集90例ER（+）BC患者与相对应的健康人的血浆，检测血浆中PIK3R1的表达，从血浆中提取外泌体，检测外泌体中miR-20a-5p的表达。双荧光素酶报告实验验证miR-20a-5p与PIK3R1的靶向调控关系。分别将转染NC-inhibitor、miR-inhibitor的外泌体或转染si-NC、si-PIK3R1的ER（+）BC细胞注射到小鼠左心室，Micro-CT扫描骨组织并进行骨组织TRAP染色。将转染NC-inhibitor、miR-inhibitor的外泌体与转染si-NC、si-PIK3R1的ER（+）BC细胞共培养后，使用Western blot检测破骨细胞分子c-fos、NFATc1的表达。结果qRT-PCR检测发现较正常血浆外泌体（1±0.26）或细胞（1±0.13），miR-20a-5p在ER（+）BC血浆外泌体（1.49±0.27）（t=12.40，P<0.001）及BC细胞系MCF-7（1.64±0.13）（t=6.03，P=0.004）、BT474（1.49±0.11）（t=4.98，P=0.008）、T47D（1.98±0.15）（t=8.55，P=0.001）中均表达升高。而与正常血浆外泌体（1±0.25）或细胞（1±0.10）比较，PIK3R1在ER（+）BC血浆外泌体（0.69±0.24）（t=8.48，P<0.001）及ER（+）BC细胞系MCF-7（0.73±0.05）（t=4.18，P=0.014）、BT474（0.61±0.05）（t=6.04，P=0.004）、T47D（0.34±0.04）（t=10.61，P<0.001）中则表达降低。PIK3R1在血浆（t=8.48，P<0.001）及ER（+）BC细胞系MCF-7（t=4.18，P=0.014）、BT474（t=6.04，P=0.004）、T47D（t=10.61，P<0.001）中则表达降低。PIK3R1被证实为miR-20a-5p的靶基因。与NC-inhibitor组小鼠相比，miR-inhibitor组小鼠的骨小梁组织体积（t=3.32，P=0.029）、骨小梁区域体积（t=6.24，P=0.003）、骨体积分数（t=7.35，P=0.002）和骨矿物密度（t=13.72，P<0.001）均增加，成熟破骨细胞数量减少。与NC-inhibitor组比较，miR-inhibitor组细胞中c-fos（t=9.04，P=0.001）和NFATc1（t=13.42，P<0.001）的表达减少。与miR-inhibitor+si-NC组相比，miR-inhibitor+si-PIK3R1组中小鼠的骨小梁组织体积（t=3.03，P=0.039）、骨小梁区域体积（t=6.37，P=0.003）、骨体积分数（t=3.36，P=0.028）和骨矿物密度（t=6.92，P=0.002）均减少，成熟破骨细胞数量增加，细胞中c-fos（t=7.75，P=0.002）和NFATc1（t=9.65，P=0.001）的表达增加。结论ER（+）BC患者血浆外泌体源性miR-20a-5p通过抑制PIK3R1表达来促进ER（+）BC骨转移。

简介：摘要目的分析实施间歇导尿（intermittent catheterization，IC）的脊髓损伤（spinal cord injury，SCI）后神经源性膀胱功能障碍（ neurogenic bladder，NB）患者不同时段直肠超声膀胱血流动力学变化。方法选取本院康复科及脊柱外科2016年1月至2019年4月收治的SCI后NB患者56例，其中男48例，女8例，年龄（29.7±8.2）岁。入选患者按IC频次划分成5个不同时段，分别经直肠超声检查采集膀胱充盈期及排空后10～15 min膀胱影像、多普勒图谱、膀胱血流动力学数据。结果随着自控排尿量增多、残余尿量的减少，膀胱充盈期血流速度收缩期峰值流速（Vs）、舒张期峰值流速（Vd）、平均速度（Vm）与IC前比较均增快（F=26.141，P＜0.001；F=9.127，P＜0.001；F=15.819，P＜0.001）；血管阻力指数（RI）、脉动指数（PI）与IC前比较均增大（F=29.499，P＜0.001；F=29.431，P＜0.001）；排空期血流速度Vs、Vd、Vm与IC前比较均增快（F=17.065，P＜0.001；F=4.429，P=0.002；F=9.811，P＜0.001）；RI、PI与IC前比较均增大（F=14.370，P＜0.001；F=12.463，P＜0.001）。结论直肠超声膀胱检测IC的不同时段膀胱充盈期及排空期血流速度（Vs、Vd、Vm）随着IC频次减少速度加快，RI、PI亦逐渐增大，提示膀胱血流动力学检测对SCI后NB恢复和重建评价具有临床指导意义。