简介:摘要目的探讨血浆外泌体源性miR-20a-5p通过靶向PIK3R1对雌激素受体阳性的乳腺癌(estrogen receptor-positive breast cancer,ER(+)BC)骨转移的影响。方法借助生物信息学网站检索与ER(+)BC骨转移相关的数据集,选择miR-20a-5p纳入研究。收集90例ER(+)BC患者与相对应的健康人的血浆,检测血浆中PIK3R1的表达,从血浆中提取外泌体,检测外泌体中miR-20a-5p的表达。双荧光素酶报告实验验证miR-20a-5p与PIK3R1的靶向调控关系。分别将转染NC-inhibitor、miR-inhibitor的外泌体或转染si-NC、si-PIK3R1的ER(+)BC细胞注射到小鼠左心室,Micro-CT扫描骨组织并进行骨组织TRAP染色。将转染NC-inhibitor、miR-inhibitor的外泌体与转染si-NC、si-PIK3R1的ER(+)BC细胞共培养后,使用Western blot检测破骨细胞分子c-fos、NFATc1的表达。结果qRT-PCR检测发现较正常血浆外泌体(1±0.26)或细胞(1±0.13),miR-20a-5p在ER(+)BC血浆外泌体(1.49±0.27)(t=12.40,P<0.001)及BC细胞系MCF-7(1.64±0.13)(t=6.03,P=0.004)、BT474(1.49±0.11)(t=4.98,P=0.008)、T47D(1.98±0.15)(t=8.55,P=0.001)中均表达升高。而与正常血浆外泌体(1±0.25)或细胞(1±0.10)比较,PIK3R1在ER(+)BC血浆外泌体(0.69±0.24)(t=8.48,P<0.001)及ER(+)BC细胞系MCF-7(0.73±0.05)(t=4.18,P=0.014)、BT474(0.61±0.05)(t=6.04,P=0.004)、T47D(0.34±0.04)(t=10.61,P<0.001)中则表达降低。PIK3R1在血浆(t=8.48,P<0.001)及ER(+)BC细胞系MCF-7(t=4.18,P=0.014)、BT474(t=6.04,P=0.004)、T47D(t=10.61,P<0.001)中则表达降低。PIK3R1被证实为miR-20a-5p的靶基因。与NC-inhibitor组小鼠相比,miR-inhibitor组小鼠的骨小梁组织体积(t=3.32,P=0.029)、骨小梁区域体积(t=6.24,P=0.003)、骨体积分数(t=7.35,P=0.002)和骨矿物密度(t=13.72,P<0.001)均增加,成熟破骨细胞数量减少。与NC-inhibitor组比较,miR-inhibitor组细胞中c-fos(t=9.04,P=0.001)和NFATc1(t=13.42,P<0.001)的表达减少。与miR-inhibitor+si-NC组相比,miR-inhibitor+si-PIK3R1组中小鼠的骨小梁组织体积(t=3.03,P=0.039)、骨小梁区域体积(t=6.37,P=0.003)、骨体积分数(t=3.36,P=0.028)和骨矿物密度(t=6.92,P=0.002)均减少,成熟破骨细胞数量增加,细胞中c-fos(t=7.75,P=0.002)和NFATc1(t=9.65,P=0.001)的表达增加。结论ER(+)BC患者血浆外泌体源性miR-20a-5p通过抑制PIK3R1表达来促进ER(+)BC骨转移。
简介:摘要目的分析实施间歇导尿(intermittent catheterization,IC)的脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后神经源性膀胱功能障碍( neurogenic bladder,NB)患者不同时段直肠超声膀胱血流动力学变化。方法选取本院康复科及脊柱外科2016年1月至2019年4月收治的SCI后NB患者56例,其中男48例,女8例,年龄(29.7±8.2)岁。入选患者按IC频次划分成5个不同时段,分别经直肠超声检查采集膀胱充盈期及排空后10~15 min膀胱影像、多普勒图谱、膀胱血流动力学数据。结果随着自控排尿量增多、残余尿量的减少,膀胱充盈期血流速度收缩期峰值流速(Vs)、舒张期峰值流速(Vd)、平均速度(Vm)与IC前比较均增快(F=26.141,P<0.001;F=9.127,P<0.001;F=15.819,P<0.001);血管阻力指数(RI)、脉动指数(PI)与IC前比较均增大(F=29.499,P<0.001;F=29.431,P<0.001);排空期血流速度Vs、Vd、Vm与IC前比较均增快(F=17.065,P<0.001;F=4.429,P=0.002;F=9.811,P<0.001);RI、PI与IC前比较均增大(F=14.370,P<0.001;F=12.463,P<0.001)。结论直肠超声膀胱检测IC的不同时段膀胱充盈期及排空期血流速度(Vs、Vd、Vm)随着IC频次减少速度加快,RI、PI亦逐渐增大,提示膀胱血流动力学检测对SCI后NB恢复和重建评价具有临床指导意义。