简介：摘要目的探讨应用超微超顺磁性氧化铁纳米颗粒(ultra-micro superparamagnetic iron oxide nanoparticle，USPIO)标记小鼠巨噬细胞株RAW264.7的最适浓度以及比较MRI中不同扫描序列在细胞吞噬功能评价中的敏感度差别。材料与方法用终浓度为0、25、50、75、100、125 μg/mL的USPIO分别与小鼠巨噬细胞共培养24 h后，细胞计数试剂法(CCK-8)计算细胞存活率以及USPIO对该细胞的半数抑制浓度(IC50)；光学显微镜下观察细胞形态学变化；普鲁士蓝染色确认细胞对USPIO的吞噬效应；3.0 T MRI扫描细胞-琼脂糖凝胶模型，记录T1WI和T2WI序列的弛豫时间和弛豫率并计算弛豫时间降低率。结果当USPIO浓度为25 μg/mL时，对细胞的存活率无影响，差异无统计学意义(P＞0.05)；当USPIO浓度≥50 μg/mL时，细胞存活率随USPIO浓度增加显著降低(P均＜0.05)；USPIO对细胞的半数抑制浓度IC50为(186.5±7.2) μg/mL；当USPIO浓度为50 μg/mL时，细胞形态开始皱缩、透光度减低；当USPIO浓度为25 μg/mL时，普鲁士蓝染色呈显著阳性；MRI显示，与对照组相比，当USPIO浓度为25 μg/mL时，细胞即见显著信号改变；随USPIO浓度增加，T1、T2弛豫时间显著缩短(P均＜0.01)，对应弛豫率R1、R2逐渐升高；相同USPIO浓度下，各组T2弛豫时间降低率显著高于T1弛豫时间降低率(P均＜0.001)。结论浓度为25 μg/mL的USPIO对细胞没有明显毒性作用，而且标记效率高、MRI即见显著信号改变与较好的成像效果，为标记巨噬细胞的最适浓度；MRI能用于细胞标记后的体外成像，T2WI序列在检测细胞吞噬USPIO后的信号变化优于T1WI序列。

简介：摘要目的探讨激活态雪旺细胞(activated schwann cells，ASCs)干预骨髓间基质细胞(bone marrow stromal cells，BMSCs)联合异种神经移植体(acellular nerve xenograft，ANX)修复大鼠坐骨神经缺损的效果。方法取大鼠骨髓腔内BMSCs，另取大鼠的ASCs和普通SCs，行原代培养。将两种细胞置于Transwell培养皿中培养并分成三组：BMSCs组，SCs-BMSCs组及ASCs-BMSCs组。在培养皿中培养后第2、4、6和8天，用CCK-8法检测各组BMSCs生物学活性，通过q-PCR检测各组脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的mRNA表达水平。在无菌条件下制备10 mm坐骨神经缺损的大鼠模型，制作异种神经支架复合体(兔源胫神经)。将SD大鼠分为三组(n＝10)：ANX＋BMSCs组，ANX＋SCs-BMSCs组及ANX＋ASCs-BMSCs组。将各组细胞打入支架，复合支架培养3 d，移植到大鼠模型中。术后8周通过神经电生理检测各组患肢感觉神经传导速度(sensory nerve conduction velocity，SCV)，使用q-PCR检测神经移植体内神经营养因子(BDNF、NGF和bFGF)表达水平，另比较三组模型的下肢患侧/健侧腓肠肌细胞横截面积比恢复率。结果CCK-8测定发现共培养系统中BMSCs组细胞增殖活性强于单细胞组，第2天和第4天，三组的活性差异无统计学意义(P>0.05)，第6天ASCs-BMSCs组增殖活性强于BMSCs组与SCs-BMSCs组，差异有统计学意义(P<0.05)，BMSCs组与SCs-BMSCs组之间差异无统计学意义(P>0.05)。通过q-PCR检测BMSCs组中BDNF、NGF及bFGF的mRNA表达最低，ASCs-BMSCs组含量最高(P<0.05)。经8周饲养后的动物实验，通过检测发现，ANX-ASCs-BMSCs组的SCV，ANX内相关神经因子表达量以及ANX-ASCs-BMSCs组的大鼠患侧/健侧腓肠肌肌细胞横截面积均最大。结论ASCs能够促进BMSCs的分化增殖；运用ANX-ASCs-BMSCs促进周围神经功能再生。