简介：【目的】二化螟是水稻的重要害虫之一,钙黏蛋白(cadherin,CAD)是一类重要的Bt杀虫蛋白受体,在获得二化螟钙黏蛋白基因(CsCAD1)的基础上,明确CsCAD1蛋白与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白的结合能力。【方法】利用PCR技术克隆CsCAD1基因片段,将构建的pET-28a-(+)-CsCAD1重组质粒转入原核表达菌株BL21(DE3)中,IPTG诱导表达。目的蛋白经Ni柱亲和纯化后SDS-PAGE电泳检测,利用westernblot和ligandblot技术分析其与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白的结合能力。【结果】重组载体可在表达菌株BL21中表达一个约44ku的蛋白,原核表达载体构建成功。SDS-PAGE显示该蛋白条带单一,且纯度较好。Ni柱亲和层析纯化该目的蛋白后进行Ligandblot分析,结果显示CsCAD1重组蛋白可以与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白结合。【结论】CsCAD1蛋白可以与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白结合,是潜在的Cry蛋白受体,所得结果有助于阐明Cry1Ac和Cry2Aa蛋白对二化螟的作用机制。

简介：InsectshavealargefamilyofC-typelectinsinvolvedincelladhesion,pathogenrecognitionandactivationofimmuneresponses.Inthisstudy,32transcriptsencodingC-typelectindomainproteins(CTLDPs)wereidentifiedfromtheThitarodesxiaojinensistranscriptome.Accordingtotheirdomainstructures,sixCTLDPswithonecarbohydraterecognitiondomain(CRD)wereclassifiedintotheCTL-Ssubfamily.Theother23CTLDPswithtwoCRDsweregroupedintotheimmulectin(IML)subfamily.TheremainingthreewithextraregulatorydomainsweresortedintotheCTL-Xsubfamily.PhylogeneticanalysisshowedthatCTL-SandCTL-Xmembersfromdifferentinsectscouldformorthologousgroups.Incontrast,noT.xiaojinensisIMLorthologueswerefoundinotherinsects.Remarkablelineage-specificexpansioninthissubfamilywasobservedreflectingthattheseCTLDPs,asimportantreceptors,haveevolveddiversifiedmembersinresponsetoavarietyofmicrobes.PredictionofbindingligandsrevealedthatT.xiaojinensis,acoldadaptedspecies,conservedtheabilityofCRDstocombinewithCa^2+tokeepitsreceptorsfromfreezing.ComparativeanalysisofinductionofCTLDPgenesafterdifferentimmunechallengesindicatedthatIMLsmightplaycriticalrolesinimmunedefenses.ThisstudyexaminedT.xiaojinensisCTLDPsandprovidesabasisforfurtherstudiesoftheircharacteristics.

简介：

简介：【目的】蛋白样品的制备是获得良好双向凝胶电泳（2-DE）图谱的前提,建立合理的西花蓟马蛋白的双向电泳体系,获得分辨率较高、重复性较好的图谱,能够为后续的研究提供有力支撑.【方法】实验以西花蓟马成虫为实验材料,对比了饱和酚法、TCA/丙酮法和直接裂解法3种蛋白提取方法,从中选出最适宜双向电泳分析的一种蛋白提取方法.【结果】3种方法蛋白提取率差异显著,直接裂解法蛋白提取率最高,饱和酚法的蛋白提取率最低;3种方法的SDS-PAGE条带数差异不明显;TCA/丙酮法的双向凝胶图谱效果最好,蛋白点最多.【结论】TCA/丙酮法能够有效去除西花蓟马蛋白中的干扰物质,是最适合西花蓟马双向凝胶电泳的蛋白提取方法,为后续西花蓟马在蛋白组学方面的研究奠定了基础.

简介：【背景】西花蓟马是近年来在我国局部地区暴发成灾的重要入侵害虫。【方法】本文通过改进的STE法提取西花蓟马的基因组DNA，对西花蓟马ISSR—PCR反应体系中的DNA、引物、Taq聚合酶、buffer缓冲液、dNTPs、Mg^2＋和去离子甲酰胺等7个影响因素进行了单因素试验，初步筛选出各因素的较优浓度；然后对影响较大的4个因素进行了正交设计试验L15（4^4），建立了适合西花蓟马ISSR分子标记的最佳反应体系。【结果】在20μL的反应体系中包含模板DNA30ng、10×Buffer2．0μL、引物1．05μmol·L^-1、Taq聚合酶2．0U、dNTPs212．5μmol·L^-1及MsS042．25mmol·L^-1。【结论与意义】利用采自云南昆明、玉溪、楚雄、红河、保山、昭通、丽江、大理和普洱9个地方的西花蓟马样本对所建立的反应体系进行检验，结果表明优化后的体系适用于西花蓟马的遗传多样性分析，本研究可为进一步研究西花蓟马的种群结构奠定基础。

简介：【背景】转Bt基因抗虫棉已经在我国进行了近20年的大规模商业化种植,产生了显著的经济和环境效益。但是,靶标害虫棉铃虫的抗性是转Bt基因抗虫棉产业健康发展所面临的最大问题,而抗性监测是解决这一问题的必要管理措施。盐城市是江苏省转基因抗虫棉的主产区,但有关该地区棉铃虫对转Bt基因抗虫棉的抗性基因频率未见报道。【方法】于2012年在盐城三龙镇和东台镇棉区采集田间棉铃虫种群,检测了初孵幼虫对花铃期转Bt基因抗虫棉中30幼嫩叶片的敏感性,用区分剂量法检测了2龄幼虫对Bt蛋白的抗性基因频率。【结果】取食转Bt基因抗虫棉叶片后,棉铃虫初孵幼虫在9d内全部死亡;三龙镇和东台镇棉铃虫2龄幼虫对Bt蛋白的抗性基因频率分别为7.6×10-3和6.9×10-3。【结论与意义】目前,盐城棉区的棉铃虫对转Bt基因抗虫棉仍保持很高的敏感性,棉铃虫种群对Bt蛋白的抗性基因频率没有发生显著变化,但仍需持续监测。

简介：【背景】在我国，由于Bt棉的种植，棉铃虫和红铃虫等靶标害虫得到了控制，但棉田其他鳞翅目害虫如甜菜夜蛾和斜纹夜蛾的危害仍较严重。美国商业化种植的双价棉BollgardⅡ所表达的Cry2Ab蛋白不仅对棉铃虫有较好的控制效果，而且对甜菜夜蛾和草地贪夜蛾有较好的控制作用。因此，该双价棉在我国被环境释放前，有必要研究其对棉田其他鳞翅目害虫的影响。【方法】在人工饲料中分别添加质量浓度为1．25、2．5、5．0、10．0和20．0μg·g^-1的Cry2Ab蛋白，采用生物测定的方法，在室内研究了其对甜菜夜蛾和斜纹夜蛾低龄幼虫存活率和体质量抑制率的影响。【结果】随着Cry2Ab蛋白浓度的增大，甜菜夜蛾初孵幼虫和1龄幼虫的存活率逐渐降低，2龄幼虫和3龄幼虫以及斜纹夜蛾各龄期幼虫的存活率在不同浓度处理下与对照差异均不显著。但与对照相比，高浓度处理对这2种害虫各龄期幼虫的体质量均有显著影响。【结论与意义】高浓度Cry2Ab蛋白（10．0和20．0μg·g^-1）对甜菜夜蛾低龄幼虫有较好的控制作用，但对斜纹夜蛾低龄幼虫的控制效果不太理想。这为该双价基因棉花在我国的推广提供了依据。

简介：【目的】蝇蛹俑小蜂是很多双翅目害虫的蛹寄生蜂.了解温度对寄生蜂寄生效能的影响是利用寄生蜂控制害虫的重要前提.【方法】实验室条件下设置温度为21、24、27、30、33尤,测定温度对蝇蛹俑小蜂雌蜂寄生瓜实蝇蛹功能反应的影响.蝇蛹俑小蜂对瓜实蝇蛹的功能反应用Mkhaelis-Menten-n型功能反应模型Na=AN/（f＋W）进行拟合.【结果】不同温度下蝇蛹俑小蜂的寄生潜能（4）和寄主半饱和密度（F）不同.当温度在27尤时,其寄生潜能最大;而寄主半饱和密度随着温度升高而降低.【结论】瓜实蝇在瓜地盛发期的栖境温度适宜蝇蛹俑小蜂的寄生.

简介：细胞色素P450基因的新奇完整的长度被孤立在杀虫药剂抵抗(命名CYP6CX1v1)并且易受影响(命名CYP6CX1v2)Bemisiatabaci，作为B遗传因子型被识别，福建，中国(Sj)。CYP6CX1(1940bp包含了1557bp开的读框架)对CYP6成员普通的包括的保存领域在carboxyl附近的helix-K，氧绑定主题AGLDPV和保存顺序PEKFNP的通常认为的曲流绑定顺序ETLR和PERF例如heme有约束力的主题PFGEGPRFCIA，结束。有在R和SB之间的氨基酸残余的四不同代替。tabaci(Thr300翼，Thr354Pro，Arg486His和Ile503Thr)，在哪个之中替换Ile503Thr位于底层识别地点区域。CYP6CX1v1的mRNA抄写水平象CYP6CX1v2的一样高是2.38褶层。结果显示了从B遗传因子型B的CYP6CX1。在Sj的tabaci是CYP6成员之一，并且提高了CYP6CX1表示和氨基酸残余的代用品可能在域B涉及抵抗机制。tabaci。

简介：[目的]随着杀虫剂阿维菌素的广泛应用，靶标生物对其抗性问题日益严重。以往的研究显示，细胞膜转运蛋白P糖蛋白可能与抗药性有关。但在昆虫对阿维菌素的抗性研究中，由于目前市场上缺少专门针对昆虫的商业化抗体，使得这一研究受限。为此，本研究尝试应用其他物种的抗体开展P糖蛋白的检测。[方法]以果蝇为测试昆虫，以阿维菌素作为测试药物，采用免疫印迹方法用鼠抗人P糖蛋白单克隆抗体检测阿维菌素敏感品系与阿维菌素抗性品系果蝇中的P糖蛋白的表达水平。[结果]检测出果蝇体内P糖蛋白的特异性表达，且无明显非特异性条带；与敏感品系果蝇相比，阿维菌素抗性品系果蝇P糖蛋白的表达水平明显升高。[结论]用针对人及其他脊椎动物的P糖蛋白单克隆抗体检测果蝇P糖蛋白的表达可行，且果蝇对阿维菌素的抗性可能与P糖蛋白的表达升高有关。

简介：【目的】周氏啮小蜂（海南种群）是寄生椰子织蛾蛹期的本土天敌。研究周氏啮小蜂（海南种群）对椰子织蛾的功能反应,能为该蜂室内扩繁和室外控害利用提供基础。【方法】在室内观察周氏啮小蜂（海南种群）寄生行为基础上,研究了营养（10%蜂蜜）、寄主蛹（初、中、晚）期对周氏啮小蜂（海南种群）寄生功能反应的影响。【结果】镜下观察1头周氏啮小蜂（海南种群）可寄生多头椰子织蛾蛹,寄生量随寄主密度的增大而增加,但当寄主密度达到一定程度后,其增长率随寄主密度的增大逐渐减缓,属于HollingⅡ功能反应。在无营养条件下,周氏啮小蜂（海南种群）对椰子织蛾初、中、晚期蛹的理论最大寄生量分别为1.5、1.4、1.2头·d~（-1）;在10%蜂蜜饲喂条件下,周氏啮小蜂（海南种群）对椰子织蛾初、中、晚期蛹的理论最大寄生量分别为1.8、1.7、1.3头·d~（-1）。【结论】HollingⅡ型拟合结果表明,椰子织蛾初期蛹是周氏啮小蜂（海南种群）寄生的最佳时期,补充营养能够提高椰子织蛾的寄生力。

简介：应用prima蛋白加农药马拉硫磷对橘小实蝇进行防治，每8d点喷一次，共喷5次。试验结果表明：prima蛋白与马拉硫磷混合后点喷对橘小实蝇的诱杀效果显著，保果率达到64．71％左右，卡方检验的结果为P=0．027〈0．05，表明点喷prima蛋白与马拉硫磷的混合溶液对柚子的保果效果显著。

简介：【背景】近年来＂Q＂烟粉虱在我国快速扩张,已成为农业生产上的一种重要入侵害虫。由于化学农药的大量使用,＂Q＂烟粉虱已对多种农药产生高抗药性,保护和利用天敌昆虫对其进行控制具有重要意义。【方法】本文在室内研究了近年引入我国的海氏桨角蚜小蜂对不同龄期＂Q＂烟粉虱若虫的取食和寄生能力。【结果】各龄期的＂Q＂烟粉虱若虫均可被海氏桨角蚜小蜂取食和寄生。在48h内,寄生蜂取食1、2、3、4龄烟粉虱若虫的数量分别为10.7、6.4、6.7、5.0头,呈现随龄期增大取食数量下降的趋势;海氏桨角蚜小蜂对不同龄期烟粉虱若虫的寄生能力存在明显差异,其更偏好寄生2、3龄若虫（25.4和27.5头）,其次是1龄若虫（22.1头）,而寄生4龄粉虱的数量最低（16.5头）。【结论与意义】寄主龄期对海氏桨角蚜小蜂的取食和寄生能力具有显著影响。综合来看,该寄生蜂表现出对＂Q＂烟粉虱较好的生物防治潜能,是防治烟粉虱的理想寄生性天敌昆虫。

简介：研究了取食转Bt-cry1Ah基因玉米花粉对龟纹瓢虫Propylaeajaponica（Thunberg）体内解毒酶和中肠蛋白酶活性的影响。利用饲喂结合比色方法,比较龟纹瓢虫取食转Bt-cry1Ah基因玉米花粉和非转基因玉米花粉后体内α-乙酸萘酯酶、乙酰胆碱酯酶、谷胱甘肽-S-转移酶、中肠总蛋白酶、类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶的酶活性。结果发现：在解毒酶方面,取食Bt玉米花粉的龟纹瓢虫4龄幼虫和蛹的α-乙酸萘酯酶活性显著低于取食非Bt玉米花粉的龟纹瓢虫（对照组）,取食Bt玉米花粉的龟纹瓢虫的乙酰胆碱酯酶和谷胱甘肽-S-转移酶活性在各个发育时期与对照相比均无显著差异。在中肠蛋白酶方面,与对照组相比,取食Bt玉米花粉的龟纹瓢虫的总蛋白酶和强碱性类胰蛋白酶活性在各个发育时期均无显著差异;但取食Bt玉米花粉的龟纹瓢虫的弱碱性类胰凝蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶活性在蛹期显著低于取食非Bt玉米花粉的龟纹瓢虫。由此可见,龟纹瓢虫取食含有Cry1Ah杀虫蛋白的玉米花粉后,体内代谢解毒酶和中肠蛋白酶与Cry1Ah杀虫蛋白相互作用,可能会引起某些酶活性的变化。因此,转cry1Ah基因玉米花粉对龟纹瓢虫的潜在影响还需要进一步的研究。