简介:摘要:在房屋建筑特别是高层建筑中,物料的垂直运输是工程施工考虑的重要环节,目前通常采用塔吊吊运或施工电梯及物料提升机向楼层输送物料。无论采用何种垂直运输机械,其使用频率都非常高,垂直运输机械能否稳定运行直接影响着工程进度和安全生产工作能否有效开展,现实生产中也时常发生因为垂直运输机械故障造成窝工或引发安全生产事故的案例,而降低上述事件发生概率的主要途径便是对垂直运输机械做好检修和保养工作,保证其工作性能。当前垂直运输机械通常由人工进行检修及保养,最常见的方法是在机械停止运行或者缓慢运行的过程中人工向轨道或齿轮上涂抹润滑油脂,整个保养过程工效极低且伴随着油脂遗撒,造成材料浪费的同时污染环境。此外,垂直运输机械何时检修保养、检修保养频率等往往凭借人的经验而定,实际生产过程中也时常因检修不及时、保养不到位而导致机械带病生产、发生故障,进而影响工效,严重的可能引发安全事故。鉴于此,文章结合笔者多年工作经验,对垂直运输机械智能检修保养技术研究提出了一些建议,以供参考。
简介:摘要目的检测膀胱癌组织及细胞株中长链非编码RNA(lncRNA)FLJ37505的表达,分析FLJ37505对膀胱癌细胞增殖和迁移影响的作用机制。方法实时荧光定量PCR(qPCR)分析63例膀胱癌和癌旁组织(来自2018年1月至2019年3月苏州大学附属第二医院泌尿外科膀胱癌手术切除的标本)和膀胱癌细胞株(T24、J82、5637、BIU-87和UM-UC-3,均购自上海生命科学院细胞所)中FLJ37505的相对表达。将FLJ37505相对表达最少的膀胱癌细胞株根据随机数字法分为对照组(转染空白质粒)和FLJ37505组(转染载有FLJ37505序列的质粒)。MTS法和划痕实验分别检测上调FLJ37505的表达对细胞增殖和迁移能力的影响。生物信息学预测FLJ37505的靶基因。双荧光素酶报告基因系统检测FLJ37505与靶基因的结合。qPCR和Western印迹分别检测上调FLJ37505对靶基因表达的影响。结果与癌旁组织相比,FLJ37505在膀胱癌组织表达较低[(4.90±0.79)比(0.89±0.28),P<0.05]。与人正常膀胱上皮细胞相比,FLJ37505在膀胱癌细胞株表达较低(P<0.05),其中FLJ37505在UM-UC-3细胞中的表达最低(P<0.01)。与对照组相比,FLJ37505组UM-UC-3细胞中FLJ37505表达较高[(0.79±0.04)比(9.92±1.17),P<0.01]。与对照组相比,FLJ37505组UM-UC-3细胞的增殖能力和迁移能力均被抑制(均P<0.01)。生物信息学显示,FLJ37505的靶基因是miR-203a-3p,miR-203a-3p的靶基因是二型磷脂酰肌醇4磷酸酶(INPP4B)。双荧光素酶报告基因系统显示FLJ37505可互补结合miR-203a-3p(P<0.01),miR-203a-3p可互补结合INPP4B mRNA(P<0.01)。与对照组相比,FLJ37505组UM-UC-3细胞中miR-203a-3p的表达较低[(1.00±0.05)比(0.20±0.02),P<0.01],INPP4B在mRNA和蛋白水平的表达均明显增加(均P<0.01)。结论膀胱癌组织和膀胱癌细胞中FLJ37505的表达较低,上调FLJ37505可显著抑制膀胱癌UM-UC-3细胞的增殖能力和迁移能力,其作用机制可能是通过吸附miR-203a-3p进而上调INPP4B基因的表达。
简介:摘要目的研究微小RNA-16-5p(miR-16-5p)对骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)和蛋白质印迹法(Western blotting法)检测人正常成骨细胞hFOB 1.19和骨肉瘤细胞MG63、Saos2、HOS内miR-16-5p、四分子交联体15(TSPAN15)mRNA和蛋白表达。在MG63细胞中转染miR-16-5p或si-TSPAN15,观察其在细胞增殖、迁移和侵袭中的作用。噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,Transwell法检测细胞迁移和侵袭,Western blotting法检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、TSPAN15、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达。Starbase网站预测结合双荧光素酶基因报告实验分析miR-16-5p与TSPAN15的靶向关系。将miR-16-5p和pcDNA-TSPAN1共转染,评估高表达TSPAN15对过表达miR-16-5p诱导的MG63细胞增殖、迁移和侵袭的影响。两组间数据的比较采用t检验。结果与hFOB 1.19细胞(1.00±0.12)相比,MG63、Saos2、HOS细胞中miR-16-5p表达量(分别为0.32±0.05、0.40±0.04、0.45±0.06)明显降低(F=156.204,P<0.05),TSPAN15 mRNA和蛋白水平显著提高(F=71.718、110.350,均P<0.05)。过表达miR-16-5p明显减少MG63细胞中CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达量及细胞存活率、细胞迁移数量和侵袭数量(F=150.136、117.228、154.971、89.479、98.373、130.880,均P<0.05)。敲减TSPAN15明显降低MG63细胞中CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白水平、细胞存活率、细胞迁移数量和侵袭数量(F=93.206、107.030、109.326、115.625、146.113、139.300,均P<0.05)。过表达miR-16-5p显著降低MG63细胞中p-PI3K、p-AKT蛋白表达量(F=156.755、181.419,均P<0.05)。miR-16-5p靶向调控TSPAN15的表达。高表达TSPAN15可部分逆转miR-16-5p对MG63细胞内TSPAN15、CyclinD1、MMP-2、MMP-9、p-PI3K、p-AKT蛋白表达、细胞存活率、细胞迁移数量和侵袭数量的抑制作用。结论miR-16-5p通过靶向TSPAN15基因并调控PI3K/AKT信号通路,从而抑制骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭。