简介：摘要目的了解2019年云南省曲靖地区手足口病（HFMD）病原学特征。方法采集曲靖地区2019年HFMD患儿的粪便样本，从粪便悬液中直接提取病毒RNA，先用MD91/OL68-1引物扩增肠道病毒（EV）VP4区基因并测序，序列在GenBank确定病毒型别，用各型病毒的相关引物扩增病毒VP1区全序并测序，通过肠道病毒在线定型工具（Enterovirus Genotyping Tool Version 0.1）进行病毒型别初步鉴定，之后计算与原型株的核苷酸相似性并进行基因进化树分析定型。结果470份样本中共检测到62株EV毒株，总阳性检出率为13.19%，其中EV-A组病毒42株（8.94%），EV-B组病毒9株（1.91%），EV-C组病毒11株（2.34%），全为脊灰病毒1型疫苗株（Sabin株），未检测到肠道病毒71型（EV-A71）和EV-D组病毒。检出率较高的病毒依次为柯萨奇病毒A10型（CV-A10，4.47%，21株）、柯萨奇病毒A16型（CV-A16，2.55%，12株）、脊髓灰质炎病毒1型疫苗株（2.34%，11株）和CV-A6（1.70%，8株）。结论2019年云南省曲靖地区儿童HFMD病例的主要病原是CV-A10、CV-A16和CV-A6，未检出EV-A71。与往年国内其他省份相比，曲靖地区2019年HFMD病原体已经发生改变，今后要加强对CV-A10、CV-A16和CV-A6等病原的实验室监测工作。

简介：摘要目的了解2020年云南省曲靖市手足口病(hand, foot and mouth disease, HFMD)病原学分布并分析病原体的基因特征。方法采集曲靖市2020年儿童HFMD病例粪便标本，从便悬液中直接提取病毒RNA，先用MD91/OL68-1引物扩增肠道病毒(enterovirus，EV)VP4区基因并测序，序列在GenBank进行BLAST搜索确定病毒型别，再用各型病毒的相关引物扩增病毒VP1区全序并测序，通过肠道病毒在线定型工具(Enterovirus Genotyping Tool Version 0.1)进行病毒型别鉴定，按文献下载各病原体VP1区基因型/亚型代表株序列，用MEGA5.2软件构建基因进化树，分析各病原体的基因特征。结果2020年共从460份标本中检测到47株EV，总阳性检出率为10.22%(47/460)。检出的病毒依次为柯萨奇病毒A4型(coxsackievirus A4, CVA4，0.65%，3/460)、CVA6 (7.83%，36/460)、CVA10(0.87%，4/460)和CVA16(0.87%，4/460)，全为A组病毒(enterovirus species A，EVA)，未检测到其他组病毒，其中CVA6检出36株，占7.83%，是检出最多的病毒。EVA71的检出率为零。基因特征分析表明，CVA4的C2、C4两个基因亚型同时在曲靖市流行，CVA6的D3a亚型、CVA16的B1a亚型也在曲靖市流行，而CVA10单独为一个进化分支，可能为曲靖市特有。结论与往年全国的情况一样，EVA71和CVA16的检出率少甚至为零，而CVA6检出率最高，说明2020年曲靖市发生了以CVA6为主的手足口病流行。CVA10基因进化分析表明，曲靖市分离株位于单独的进化分支，可能是曲靖市特有的分支。今后应加强非EVA71和非CVA16尤其是CVA6和CVA10等病毒的实验室和分子流行病学监测。