简介：摘要目的分析皮角的组织病理与临床特征，探讨两者的相互关系。方法回顾分析2014年1月至2020年5月在上海市皮肤病医院病理科经临床和组织病理检查确诊的204例皮角患者的临床和组织病理资料。结果204例患者中，男88例，女116例，年龄（70.47±14.76）岁，病程[M（P25，P75）]为6（6，24）个月。皮角单发201例，多发3例，共207个皮角，位于头面颈部163个（78.74%），躯干18个（8.70%），四肢26个（12.56%）。按皮角基底损害组织病理性质分类，良性皮角154个（74.40%），基底病变包括病毒疣129个，脂溢性角化病15个，内翻性毛囊角化病3个，毛鞘瘤皮角5个，化脓性肉芽肿1个和钙化上皮瘤1个；癌前皮角40个（19.32%），基底病变是光线性角化病；恶性皮角13个（6.28%），基底病变包括鲍恩病5个和鳞状细胞癌8个。癌前及恶性皮角患者平均年龄明显高于良性皮角（H=4.05、3.16，均P < 0.01）。恶性皮角基底宽度大于癌前皮角及良性皮角（H=2.74、3.49，P < 0.05、0.01），后两者之间差异无统计学意义（H=0.73，P > 0.05）。癌前及恶性皮角高基比明显低于良性皮角（H=4.06、3.72，均P < 0.01）。癌前皮角和恶性皮角基底红晕发生率明显高于良性皮角（χ2=29.57、6.23，P < 0.01或0.05）。恶性皮角出血结痂发生率明显高于良性皮角（χ2=4.89，P < 0.05）。结论大部分皮角基底是良性病变，以病毒疣为主，癌前和恶性皮角约占1/4。男性、高龄、宽基底、低高基比、基底红晕、出血结痂可以作为早期识别恶性皮角基底的线索。

简介：摘要目的探讨氟暴露对小鼠海马神经元细胞（HT22细胞）微小核糖核酸（microRNA，miRNA，miR）-204、脑源性神经营养因子（BDNF）、酪氨酸激酶B（TrkB）表达的影响。方法将HT22细胞暴露于0（对照）、2、4、6、8、10 mg/L氟化钠（NaF）。培养24 h后，CCK-8法检测细胞活性，根据细胞存活率结果，选取0.0（对照）、2.5、5.0、10.0 mg/L NaF，作用于未转染和转染（加入miR-204激动剂）的HT22细胞24 h，实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和蛋白免疫印迹（Western blot）法分别检测细胞中miR-204表达，BDNF、TrkB mRNA和蛋白表达。结果与对照组比较，各染氟组细胞存活率降低（P均< 0.01）。未转染细胞中，与对照组比较，miR-204表达升高（P < 0.05或< 0.01）；5.0、10.0 mg/L染氟组BDNF mRNA表达降低（P均< 0.01），各染毒组BDNF蛋白表达降低（P < 0.05或< 0.01）；各染毒组TrkB mRNA表达降低（P < 0.05或< 0.01），5.0、10.0 mg/L染氟组TrkB蛋白表达降低（P均< 0.01）。转染细胞中，与对照组比较，各染毒组miR-204表达升高（P均< 0.01），BDNF、TrkB mRNA和蛋白表达下降（P均< 0.01）。细胞存活率与染氟浓度呈负相关（r = - 0.989，P < 0.01）；染氟浓度与BDNF、TrkB mRNA、蛋白表达呈负相关（r = - 0.746、- 0.853、- 0.889、- 0.827，P均< 0.01）；miR-204表达与染氟浓度呈正相关（r = 0.889，P < 0.01），与BDNF、TrkB mRNA和蛋白表达呈负相关（r = - 0.766、- 0.770，- 0.594、- 0.523，P均< 0.01）；TrkB mRNA和蛋白表达与BDNF mRNA和蛋白表达呈正相关（r = 0.657、0.869，P均< 0.01）。结论氟降低HT22细胞活性，作用机制可能与上调miR-204表达后抑制了BDNF-TrkB通路有关。

简介：摘要目的分析血清微小核糖核酸-204(miR-204)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平对慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并肺部感染患者预后的影响。方法抽取2019年1月至2020年5月驻马店市中心医院收治的120例COPD合并肺部感染患者，全部患者均接受相同方案治疗7 d，出院后并随访1年，依据随访结束时患者的预后情况分为预后不良组(随访期间再入院及病死患者)和预后良好组。询问、记录并比较两组基线资料，并检测患者首次入院时血清miR-204、GSH-Px水平等实验室指标，重点分析首次入院时血清miR-204、GSH-Px水平对COPD合并肺部感染患者预后的影响。结果120例COPD合并肺部感染患者中，随访结束时，有25例预后不良，占比为20.83%，纳入预后不良组；其余95例患者纳入预后良好组。预后不良组miR-204 mRNA相对表达量、GSH-Px水平低于预后良好组(P<0.05)。组间其他基线资料、实验室指标比较，差异未见统计学意义(P>0.05)。回归分析结果显示，COPD合并肺部感染患者首次入院第2天时血清miR-204 mRNA相对表达量低、GSH-Px水平低是COPD合并肺部感染患者预后不良的风险因子(OR<1，P<0.05)。结论COPD合并肺部感染患者血清miR-204 MRNA相对表达量低、GSH-Px水平低能够对患者预后产生不良影响。

简介：摘要目的构建小鼠miR-204过表达重组慢病毒载体，并在二氧化硅（SiO2）诱导的小鼠肺上皮细胞（MLE-12细胞）中验证miR-204与DVL3的靶向调控作用。方法于2019年10月，从小鼠基因组中应用聚合酶链式反应（PCR）法扩增出pre-miR-204基因，测序后将扩增产物克隆到pLenti-CMV-EGFP慢病毒载体，通过PCR筛选及测序对阳性克隆进行鉴定。将miR-204过表达慢病毒载体转染至293T细胞，进行慢病毒的包装和滴度测定，研究分为SiO2对照组、病毒对照组及miR-204病毒组，实时荧光PCR检测miR-204和DVL3基因的表达。结果构建miR-204慢病毒表达载体Lv-miR-204-5p经PCR和测序鉴定正确，并获得滴度为9.57×108 IU/ml的病毒稀释液；实时荧光PCR检测结果显示，miR-204病毒组MLE-12细胞中miR-204基因的表达高于SiO2对照组和病毒对照组，DVL3基因的表达低于SiO2对照组和病毒对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论miR-204过表达慢病毒载体可能在SiO2诱导的MLE-12细胞中抑制DVL3基因的表达。

简介：摘要目的探讨miR-204通过Wnt信号通路对骨质疏松症小鼠成骨细胞增殖的影响及机制分析。方法雌性昆明小鼠分为：对照组、假手术组和骨质疏松症组，采用双侧卵巢切除法建立去卵巢骨质疏松小鼠模型并进行鉴定；提取小鼠原代成骨细胞并鉴定；细胞转染并检测miR-204的表达水平；MTT检测各组细胞活力；各组细胞碱性磷酸酶（ALP）活性的检测；Transwell检测各组细胞的侵袭能力；细胞流式术检测各组细胞凋亡情况；细胞流式术检测各组细胞Caspase-3活性；双荧光素酶报告基因检测miR-204和β-catenin、LRP-5间的相互作用；Western blot检测Wnt信号通路相关蛋白表达情况。结果骨质疏松症组小鼠骨密度较对照组和假手术组明显降低（P=0.007，P=0.057），表明骨质疏松症小鼠造模成功。miR-204的表达水平在miR-204模拟物组明显提高（P=0.072），在miR-204抑制剂组下降（P=0.031）；miR-204模拟物组成骨细胞活力和ALP活性提高（P=0.007，P=0.043），miR-204抑制剂组成骨细胞活力和ALP活性下降（P=0.007，P=0.035）；miR-204模拟物组成骨细胞的侵袭能力明显增强（P=0.006），miR-204抑制剂组成骨细胞的侵袭能力下降（P=0.036）；miR-204模拟物组成骨细胞的凋亡能力和Caspase-3活性下降（P=0.041，P=0.045），miR-204抑制剂组成骨细胞的凋亡能力和Caspase-3活性增强（P=0.005，P=0.039）；miR-204与β-catenin、LRP-5之间有靶向关系；miR-204模拟物组成骨细胞中β-catenin和LRP-5蛋白表达均上调（P=0.043，P=0.009），miR-204抑制剂组成骨细胞中β-catenin和LRP-5蛋白表达均下调（P=0.041，P=0.032）。结论miR-204可能促进成骨细胞的增殖，激活Wnt信号通路，对骨质疏松症有一定的保护作用。

简介：摘要目的探讨微小RNA(microRNA，miRNA)-34a和miRNA-204的异常表达是否能用于区别慢性胰腺炎(CP)与胰腺导管上皮内瘤变(PanINs)。方法用部分结扎大鼠胆胰管和置入7，12-二甲基苯并蒽(DMBA)的方法建立SD大鼠(华中科技大学实验动物中心提供)CP-胰腺癌模型，获得16个CP标本和26个PanINs标本。然后用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测4种与胰腺癌相关的miRNAs(miR-34a、miR-204、miR-107和miR-21)在这些标本中的表达。两组之间的差异用方差分析、Kruskal-Wallis检验或Student’s t检验进行统计学分析。结果miR-34a在PanIN-1(1.81±0.12比1.00±0.08，t＝2.032，P<0.05)、PanIN-2(1.72±0.11比1.00±0.08，t＝1.332，P<0.05)和PanIN-3(2.62±0.14比1.00±0.08，t＝4.135，P<0.05)标本中的表达显著高于CP组，差异有统计学意义。miR-204在PanIN-2(0.59±0.08比1.00±0.12，t＝5.037，P<0.05)和PanIN-3(0.51±0.07比1.00±0.12，t＝5.385，P<0.05)标本中的表达显著低于CP组，差异有统计学意义。miR-21只在PanIN-3(2.23±0.21比1.00±0.12，t＝4.485，P<0.05)标本中表达显著高于CP组，差异有统计学意义。结论miR-34a和miR-204在CP发展到胰腺癌的过程中表达异常，可用于区别CP与PanINs。

简介：摘要目的观察甲状腺乳头状癌(PTC)细胞中微小RNA(miR)-204对E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)表达的影响，及对上皮-间充质转化(EMT)及细胞侵袭能力的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测甲状腺乳头状癌及其癌旁组织中miR-204的表达；将miR-204 mimics转染到甲状腺乳头状癌TPC-1细胞中，采用荧光定量PCR的方法检测ZEB1、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、N-钙粘蛋白(N-cadherin)及波形蛋白(vimentin)的表达水平，应用双荧光素酶报告基因分析实验观察miR-204对ZEB1基因表达的调控作用；同时，将miR-204 mimics与过表达ZEB1质粒共转染至人甲状腺乳头状癌细胞-1(TPC-1)细胞中，采用Transwell细胞侵袭实验观察miR-204和ZEB1表达变化对甲状腺乳头状癌细胞侵袭能力的影响。组间比较采用t检验。结果miR-204在甲状腺癌乳头状组织中的表达水平低于癌旁正常组织中的表达水平，差异有统计学意义(1.14±0.08比3.52±0.07，t＝13.250，P<0.05)；miR-204 mimics转染组侵袭细胞数低于对照组侵袭细胞数[(149.4±20.2)个比(268.6±30.2)个，t＝3.402，P<0.05]，差异有统计学意义；miR-204 mimics转染组细胞E-cadherin表达水平高于对照组细胞(0.98±0.17比0.35±0.12，t＝2.903，P<0.05)，差异有统计学意义，N-cadherin和vimentin表达量低于对照组细胞(0.29±0.11比0.89±0.10，t＝2.974，P<0.05；0.30±0.13比0.93±0.15，t＝2.859，P<0.05)，差异有统计学意义；双荧光素酶报告基因分析结果显示，miR-204 mimics转染组ZEB1的相对荧光素酶活性低于对照组(0.23±0.06比1.12±0.04，t＝12.460，P<0.05)，差异有统计学意义；甲状腺癌乳头状癌TPC-1细胞中转染miR-204 mimics组ZEB1基因的表达水平低于对照组(0.41±0.06比1.10±0.07，t＝6.783，P<0.05)，差异有统计学意义；miR-204 mimics与ZEB1过表达质粒共转染后，甲状腺癌细胞的侵袭细胞数与对照组比较差异无统计学意义[(224.4±23.5)个比(230.0±28.5)个，t＝1.140，P>0.05]，差异有统计学意义。结论miR-204能够通过靶向抑制ZEB1的表达，从而抑制细胞发生上皮间质转化进而抑制甲状腺乳头状癌细胞的侵袭能力。