简介：摘要目的探讨硫酸钙对成骨样MG-63细胞增殖情况及骨保护素/核激活因子受体配体/核激活因子受体(OPG/RANKL/RANK）系统的影响。方法制作硫酸钙浸提液，将含有硫酸钙浸提液的细胞培养基设为硫酸钙组，不含硫酸钙的普通细胞培养基设为空白对照组，分别培养成骨样MG-63细胞24 h。观察两组细胞的生长情况，通过细胞增殖实验(CCK-8)检测细胞的增殖活性，并检测OPG/RANKL的mRNA和蛋白表达水平。结果硫酸钙组和空白对照组成骨样MG-63细胞的生长情况均较好。在CCK-8增殖试验中，硫酸钙组与空白对照组的吸光度值分别为0.997±0.008、0.640±0.003，差异有统计学意义（P<0.001）。硫酸钙与空白对照组OPG的mRNA相对表达量分别为2.834±0.176、1.005±0.102；RANKL的mRNA相对表达量分别为0.355±0.035、1.002±0.068，差异均有统计学意义（P<0.001）。蛋白质免疫印记结果显示：与空白对照组相比，硫酸钙组中的硫酸钙能促进成骨样MG-63细胞OPG的蛋白表达，并抑制RANKL的蛋白表达。结论硫酸钙能促进成骨细胞样MG-63细胞的增殖与活性，并可调控OPG/RANKL/RANK系统，具有一定的促骨形成作用。

简介：摘要目的探讨微小RNA-940(miR-940)对迁移和侵袭增强因子1(MIEN1)的作用，对人骨肉瘤细胞MG63的迁移和侵袭等能力的影响。方法根据对MG63(武汉大学中南医院医学科学研究中心)的转染处理，将其分为miR-940模拟物(mimics)组、控制(control)对照组、miR-940抑制剂(inhibitor)组和空白(Blank)对照组。分析武汉大学中南医院骨科通过手术切除的12例骨肉瘤病理组织，采用世界卫生组织(WHO)病理分级标准进行良恶性分级，Ⅰ级5例，Ⅱ级3例，Ⅲ级4例。采用免疫组织化学分析MIEN1与肿瘤恶性程度的相关性。体外培养人骨肉瘤细胞MG63及正常成骨细胞hFOB1.19，实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-940及MIEN1表达水平，蛋白质印迹法(Western blot)检验MIEN1蛋白表达。对MG63细胞分组转染miR-940模拟物(mimics)、控制(control)对照、抑制剂(inhibitor)和空白对照，48 h后采用实时荧光定量PCR检验miR-940，Western blot检验MIEN1蛋白表达。划痕实验评估转染后细胞的迁移能力。Transwell侵袭实验评价转染后细胞的侵袭能力。采用两样本t检验，多样本方差分析，Pearson相关性分析。结果MIEN1在不同恶性程度的骨肉瘤中的表达水平，与恶性程度呈正相关(r＝0.832，P<0.05)。骨肉瘤细胞MG63比正常成骨细胞的miR-940表达水平更低(4.37±0.61比12.41±1.05)，差异有统计学意义(t＝11.464，P<0.01)，而MIEN1表达水平更高(21.01±1.01比5.49±0.38)，差异有统计学意义(t＝-24.954，P<0.01)，Western blot结果显示miR-940与MIEN1的表达水平呈负相关(r＝-0.914，P<0.01)。转染后，模拟物组miR-940水平高于控制对照及空白对照组，而抑制剂组则低于对照组(51.16±4.27比4.19±0.47比4.36±0.29比1.18±0.15)，差异有统计学意义(F＝372.327，P<0.01)，Western blot结果表明MIEN1的蛋白表达水平为模拟物组比对照组表达降低77.89%(t＝3.174，P<0.05)，而抑制剂组比对照组表达增高141.78%(t＝-4.318，P<0.05)。划痕实验证实迁移能力miR-940模拟物组低于控制对照和空白对照组，而抑制剂组则高于对照组(27.48±0.28比51.05±2.65比50.86±0.88比74.58±1.00)，差异有统计学意义(F＝1252.615，P<0.01)。在MG63细胞侵袭能力方面，miR-940模拟物组能力相较于控制对照和空白对照组降低，而抑制剂组高于对照组(58.20±5.26比79.40±6.19比79.80±5.36比101.40±6.07)，差异有统计学意义(F＝47.313，P<0.05)。结论MIEN1与骨肉瘤的恶性程度呈现正相关，miR-940在转录后，调控MIEN1表达水平，抑制骨肉瘤细胞MG63的迁移和侵袭。

简介：摘要目的探讨人骨髓间充质干细胞(BMSCs)外泌体对骨肉瘤细胞MG63增殖与迁移的影响。方法采用贴壁培养法分离人BMSCs，流式细胞技术对BMSCs鉴定。采用超速离心法分离BMSCs外泌体，透射电镜观察外泌体形态、蛋白质印迹法(Western blot)检测外泌体特异性分子标志物CD81、CD63。将体外培养的MG63细胞分为BMSCs外泌体实验组和对照组。采用细胞计数法、细胞增殖实验(CCK-8)和细胞划痕实验检测细胞的增殖和迁移，采用聚合酶链反应(PCR)及Western blot技术检测外泌体干预后B淋巴细胞瘤-2蛋白(bcl-2)和bcl-2相关X蛋白(bax)表达。两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果透射电镜观察到外泌体超微结构，Western blot检测到外泌体表面标志物CD81、CD63。BMSCs外泌体被骨肉瘤MG63细胞摄取24 h后，实验组与对照组MG63细胞分别为(4.469±0.132)×106个和(2.445±0.673)×106个，差异有统计学意义(t＝5.110，P<0.05)。浓度为200、400、600、800 μg/ml BMSCs外泌体组细胞的吸光度(A)值分别为1.380±0.093、1.770±0.206、1.865±0.090和1.878±0.182，与空白对照组(0.994±0.084)比较，差异均有统计学意义(F＝22.272，P<0.05)。细胞划痕实验表明实验组24、48 h后MG63迁移面积分别达(75.114±5.981)%和(94.720±3.024)%，与对照组比较[(56.324±7.834)%和(68.217±2.204)%]，差异均有统计学意义(t＝3.302、12.267，P<0.05)。流式细胞术发现实验组MG63细胞凋亡显著低于空白对照组，差异有统计学意义(t＝26.210，P<0.01)。与对照组比较，BMSCs外泌体可上调MG63细胞bcl-2表达，bax的表达水平下调，差异有统计学意义(t＝6.550、－5.591，P<0.05)。Western blot结果显示，BMSCs外泌体可上调MG63细胞bcl-2的表达，而bax的表达水平下调，差异有统计学意义(t＝3.178、－4.457，P<0.05)。结论人BMSCs源性外泌体对骨肉瘤细胞MG63具有促进其增殖与迁移作用。

简介：摘要目的观察长链非编码RNA(lncRNA)结直肠肿瘤差异表达基因(CRNDE)对骨肉瘤细胞增殖、侵袭和凋亡能力的影响。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测6种骨肉瘤细胞株(Saos-2、HOS、MG63、143B、U-2OS)及正常骨细胞(hFOB1.19，购自中国北京医学科学院)中lncRNA CRNDE的表达，小干扰RNA(siRNA)技术构建MG63 lncRNA CRNDE低表达株。将lncRNA CRNDE小干扰RNA(lncRNA CRNDE-siRNA、无意义阴性序列(si-NC)分别转染MG63细胞，然后将转染后MG63分为3组，lncRNA CRNDE小干扰RNA(siRNA)组(lncRNA CRNDE-siRNA)、阴性对照组(Control-si)和空白对照组(Control-nc)；细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖；膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)检测细胞凋亡；Transwell法检测细胞迁移能力。细胞增殖结果以及流式细胞法凋亡结果采用重复测量资料的方差分析；细胞迁移检测结果的组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。结果与正常骨细胞(1.037±0.025)比较，5种骨肉瘤细胞株的表达量升高，分别为Saos-2(4.034±0.033)、HOS(3.896±0.045)、MG63(5.932±0.045)、143B(2.905±0.030)、U-2OS(5.632±0.015)，而骨肉瘤细胞中MG63 lncRNA CRNDE1表达水平最高(F＝215.568，P<0.01)；RT-qPCR显示，转染后MG63细胞内的lncRNA CRNDE表达明显降低，低表达细胞株构建成功(F＝32.535，P<0.01)；CCK-8实验结果显示，与阴性对照组(Control-si)和空白对照组(Control-nc)比较，lncRNA CRNDE-siRNA组MG63细胞增殖活力明显受到抑制，24、48、72 h的吸光度(A)值分别为(0.422±0.023)%、(0.402±0.019)%、(0.320±0.021)%(F＝48.632，P<0.01)、(0.659±0.032)%、(0.696±0.035)%、(0.409±0.032)%(F＝18.110，P<0.05)以及(1.006±0.078)%、(0.982±0.069)%、(0.713±0.030)%(F＝27.751，P<0.05)；Annexin V-FITC/PI检测结果显示，Control-si、Control-nc和lncRNA CRNDE-siRNA组MG63细胞的凋亡率显著上升，分别为(5.871±0.501)%、(4.231±0.261)%、(14.231±1.591)%(F＝119.480，P<0.01)；Transwell结果显示，Control-si、Control-nc和lncRNA CRNDE-siRNA组迁移细胞数分别为(85.0±3.2)、(88.0±8.0)、(54.0±1.9)个(F＝282.690，P<0.01)。结论lncRNA CRNDE在骨肉瘤细胞中高表达，且与癌细胞增殖，凋亡和侵袭高度相关。

简介：摘要目的研究中心体蛋白Cep63在甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma，PTC）细胞系TPC-1凋亡过程中的作用及相关机制。方法收集PTC病例的癌组织和癌旁组织，通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测组织Cep63的表达情况并分析其与临床病理因素的关系。本实验随机分为阴性对照组（NC）、低表达组［Cep63（-）］和过表达组［Cep63（+）］，将Cep63慢病毒转染野生型TPC-1细胞系，并通过蛋白免疫印迹法（WB）和qRT-PCR验证Cep63的干扰效果。通过平板克隆实验与MTT法检测细胞增殖能力变化；流式细胞术检测细胞的凋亡率，免疫组织化学（immunohistochemistry，IHC）和WB检测转染前后细胞凋亡相关蛋白表达差异。2组间均数比较采用t检验，单因素方差分析进行多组间均数差异的比较，病理因素关联分析采用卡方检验。结果相比NC组，Cep63（-）组细胞增殖受到抑制（3.18±0.07比2.14±0.09，t=8.54，P<0.01），Cep63（+）组细胞的增殖能力明显提高（3.18±0.07比3.58±0.10，t=3.21，P<0.05）；NC组、Cep63（-）组和Cep63（+）组凋亡率分别为3.03%±0.24%、8.66%±0.44%和1.17%±0.44%，流式结果表明Cep63的低表达使TPC-1细胞的凋亡水平明显提高（F=157.7，P<0.001）；NC组、Cep63（-）组和Cep63（+）组Bcl-2表达量分别为1.07±0.03、0.49±0.01和1.99±0.09，BAX表达量分别为0.64±0.02、1.06±0.01和0.21±0.03，WB结果表明，Cep63的低表达使TPC-1细胞Bcl-2蛋白的表达量明显降低（F=183.2，P<0.001），同时BAX表达明显上调（F=283.7，P<0.001）。结论Cep63可能通过Bcl-2/BAX通路调控了PTC细胞系TPC-1的凋亡过程，Cep63可能是PTC的一个潜在癌基因。

简介：摘要目的探讨原儿茶酸(PCA)对人胶质瘤细胞株U251MG增殖、凋亡的影响及相关分子机制。方法常规培养人胶质瘤细胞株U251MG。应用噻唑蓝(MTT)技术检测0、2.5、5.0、10.0、20.0 μmol/L浓度PCA干预后各组细胞的活性。流式细胞术(FCM)检测PCA对U251MG细胞周期和凋亡的影响。应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测U251MG在药物干预前后增殖凋亡相关基因和的丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路蛋白的变化，组间比较采用t检验。结果0 μmol/L的PCA干预48 h后细胞活性为0.881±0.079、2.5 μmol/L为0.757±0.077、5.0 μmol/L为0.600±0.101、10.0 μmol/L为0.532±0.056(F＝35.131，P<0.01)，差异有统计学意义。RT-qPCR和Western blot结果显示，随PCA浓度增加，增殖细胞核抗原(PCNA)的mRNA表达水平为1.172±0.153、0.756±0.059、0.601±0.061、0.390±0.059、0.236±0.036(F＝55.618，P<0.01)，差异有统计学意义；蛋白的表达水平分别为0.934±0.071、0.781±0.053、0.650±0.045、0.384±0.046、0.174±0.019(F＝113.681，P<0.01)，差异有统计学意义。FCM结果显示，PCA组U251MG细胞的G0/G1期比例[(71.033±8.570)%]高于对照组[(52.057±6.735)%，t＝3.015，P<0.05]，差异有统计学意义，G2/M比例[(18.833±7.639)%]低于对照组[(36.910±5.328)%，t＝-3.362，P<0.05]，差异有统计学意义；Western blot结果显示，增殖相关蛋白Cyclin A、Cyclin D1、Cyclin E表达在PCA组低于对照组(0.405±0.047比1.217±0.101、0.673±0.070比1.166±0.110、0.604±0.085比1.286±0.085，t＝-12.625、-6.549、-9.827，P<0.01)，而p21、p27表达在PCA组高于对照组(1.206±0.096比0.575±0.046、0.990±0.086比0.481±0.045，t＝10.267、9.083，P<0.01)。FCM结果显示，PCA组U251MG细胞凋亡率(29.971±7.572)%高于对照组[(10.264±3.121)%，t＝4.168，P<0.05]；Western blot结果显示，凋亡相关蛋白bcl-2、pro-Caspase-3、pro-Caspase-9表达在PCA组低于对照组(0.337±0.024比1.198±0.113、0.430±0.044比1.150±0.098、0.486±0.049比1.278±0.107，t＝-12.909、-11.609、-11.656，P<0.01)，bax、cleaved-Caspase-3、cleaved-Caspase-9表达在PCA组高于对照组(1.312±0.097比0.471±0.051、1.173±0.140比0.460±0.052、1.245±0.089比0.606±0.080，t＝13.292、8.269、9.249，P<0.01)。Westernblot结果显示，PCA组U251MG细胞MAPK信号通路中p-ERK表达明显低于对照组(0.591±0.047比0.989±0.084，t＝-7.162，P<0.01)。结论PCA能通过调控MAPK信号通路中p-ERK的活性而抑制胶质瘤细胞U251MG的增殖，并促进凋亡。

简介：摘要目的探讨TH糖蛋白（THP）、α1-微球蛋白（α1-MG）、β2-微球蛋白（β2-MG）与糖尿病肾病患者患病的关系。方法选取2019年1月至12月海阳市人民医院收治的糖尿病肾病患者55例作为研究组，同时选取在海阳市人民医院健康体检人群55例作为对照组。对照组男32例，女23例，年龄（71.2±1.3）岁；研究组男31例，女24例，年龄（71.5±1.3）岁。对两组人群的THP、α1-MG、β2-MG水平进行检测，分析THP、α1-MG、β2-MG与糖尿病肾病患病的关系。结果研究组THP、α1-MG、β2-MG水平分别为（34.6±4.2）mg/24 h、（28.6±2.6）mg/L、（0.9±0.3）mg/L，均高于对照组（28.5±3.5）mg/24 h、（8.7±1.8）mg/L、（0.2±0.1）mg/L，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。THP、α1-MG、β2-MG与糖尿病肾病患病呈正相关（r＝0.023、0.013、0.026，均P＜0.05）。结论糖尿病肾病中，可以将THP、α1-MG、β2-MG作为患者肾脏早期受损的重要指标。

简介：摘要患者感染人冠状病毒NL63后病情较轻，且关于该病毒的研究相对较少，因此临床医师对其缺乏完整认知。但人冠状病毒NL63在全球广泛流行，在儿童及免疫功能低下人群中更为常见。本研究对人冠状病毒NL63的病原学、流行病学、致病机制、临床特征和治疗进行介绍，以期帮助临床医师更好地认识该病毒。

简介：摘要目的了解重症药疹住院患者的发热及药物性肝损伤（DILI）的特点。方法回顾分析滨州医学院附属医院2007年6月至2020年6月收住院治疗的63例重症药疹患者的发热及DILI情况。计量资料组间比较采用两独立样本t检验或Kruskal-Wallis H检验；计数资料组间比较采用χ2检验或Fisher精确检验。结果63例重症药疹患者中，54例出现发热，低、中、高热/超高热者各占约1/3，16例高热/超高热者（16/17）发生于Stevens-Johnson综合征（SJS）、中毒性表皮坏死松解症（TEN）和药物超敏反应综合征（DHS）。45例热型为不规则热；51例热程1 ~ 14 d；不同临床类型药疹患者间热度及热程差异均无统计学意义（P分别为0.303、0.719）；92.59%的患者皮疹早于发热或与发热同时出现。11例患者出现DILI，入院时肝细胞损伤型8例，其中DHS 5例、SJS 2例、TEN 1例；6例伴有发热，低、中、高热均可见，热程（7.33 ± 4.97）d，均为1级肝损伤；出院时复查肝功能5例痊愈，1例好转，1例演变为混合型，1例自动出院未复查肝功能。另3例DILI为胆汁淤积型，均为DHS患者，皆伴有高热或超高热，热程（8.33 ± 3.51）d，其中1例为4级肝损伤（急性肝衰竭）；出院时肝功能均好转。结论重症药疹热型多样，不规则热多见，热程多≤ 2周；皮疹常早于发热或与其同时出现。DILI多合并发热，以肝细胞损伤型更为多见，恢复较快，而胆汁淤积型临床症状重，病程长，好发于DHS。

简介：无

简介：AbstractBackground:The hepatitis B virus X (HBx) protein plays a critical role in the initiation and progression of hepatitis B virus (HBV)-associated hepatocellular carcinoma (HCC). In the early stage of the disease, HBx facilitates tumor onset by inactivating the tumor suppressor p53. The p53-encoding gene, however, is frequently mutated or deleted as the cancer progresses to the late stage and, under such circumstance, the p53 homolog TAp63 can harness HCC growth by transactivating several important p53-target genes.Methods:To determine whether HBx regulates TAp63, we performed co-immunoprecipitation assay, real-time quantitative polymerase chain reaction, immunoblotting, and flow cytometry analysis in p53-null cancer cell lines, Hep3B and H1299.Results:HBx interacts with the transactivation domain of TAp63, as HBx was co-immunoprecipitated with TAp63 but not with ΔNp63. The interaction between HBx and TAp63 abolished transcriptional activity of TAp63, as evidenced by the reduction of the levels of its target genes p21 and PUMA, consequently leading to restricted apoptosis and augmented proliferation of HCC cells.Conclusion:HBV induces progression of HCC that harbors defective p53 by inhibiting the tumor suppressor TAp63.

简介：摘要碘浓度为400 mg/ml的碘美普尔（简称碘美普尔400）在肝脏等腹部实质脏器的CT动态增强扫描以及CT血管成像检查方面具有独特的优势。但对于如何结合中高端多层螺旋CT设备更好发挥其高浓度特点，尚缺乏统一的认识。基于这个问题，中华医学会放射学分会腹部学组组织相关专家经多次讨论，对碘美普尔400的肝脏CT应用达成共识，对碘美普尔400在肝脏CT血管成像、肝脏实质成像、降低辐射剂量及降低对比剂用量方面的应用优势进行阐述，并推荐扫描方案。

简介：无

简介：摘要目的观察长链非编码RNA(lncRNA)锌指蛋白667反义RNA1(ZNF667-AS1)下调微小RNA(miRNA，miR)-296对胶质瘤细胞U87MG侵袭、转移的影响。方法双荧光素酶鉴定ZNF667-AS1与miR-296的靶向关系。实验分为对照组、空载体质粒组、sh-ZNF667-AS1组、sh-ZNF667-AS1＋阴性对照组、sh-ZNF667-AS1＋miR-296 mimic组。空载体质粒组转染pEGFPN1空载体，sh-ZNF667-AS1组转染pEGFPN1-sh-ZNF667-AS1，质粒转染成功后，在sh-ZNF667-AS1组基础上，sh-ZNF667-AS1＋阴性对照组转染miR-296 mimic NC，sh-ZNF667-AS1＋miR-296 mimic组转染miR-296 mimic。实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中ZNF667-AS1、miR-296水平；细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖；Transwell检测细胞侵袭和迁移；蛋白质免疫印迹实验检测细胞中迁移侵袭抑制蛋白(MIIP)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)蛋白水平。多组间比较行单因素方差分析，进一步两两比较行SNK-q法。结果生物信息学软件(Starbase)分析显示ZNF667-AS1序列上存在miR-296潜在结合位点，且经荧光素酶实验验证，miR-296与ZNF667-AS1呈正相关(P<0.05)。0 h各组细胞吸光度(A450)值差异无统计学意义(F＝1.071，P>0.05)，12、24、36、48 h各组细胞A450值比较，差异有统计学意义(F＝17.238、93.997、48.271、60.646，P<0.05)。细胞处理48 h，对照组、空载体质粒组、sh-ZNF667-AS1组、sh-ZNF667-AS1＋阴性对照组、sh-ZNF667-AS1＋miR-296 mimic组中ZNF667-AS1水平分别为1.01±0.12、0.98±0.14、0.44±0.09、0.46±0.07、0.76±0.12；miR-296水平分别为1.01±0.14、1.02±0.13、0.39±0.06、0.42±0.05、0.72±0.09；侵袭细胞数量分别为(83.25±6.05)、(84.37±8.76)、(39.49±4.15)、(42.15±7.42)、(63.18±7.13)个；迁移细胞数量分别为(126.60±8.79)、(124.49±9.12)、(76.16±6.48)、(79.44±12.15)、(118.18±6.86)个，且差异有统计学意义(F＝36.498、55.130、58.771、47.314，P<0.05)。结论降低ZNF667-AS1表达可下调miR-296表达抑制胶质瘤细胞U87MG侵袭、转移，而过表达miR-296可逆转上述过程。

简介：摘要如何降低腹部CT辐射剂量一直是临床关注的重点，然而对比剂在降低腹部CT辐射剂量中的作用尚不明确。笔者主要探讨高浓度碘对比剂碘美普尔（400 mg/ml ）在降低腹部CT辐射剂量中的作用、优化碘对比剂给药方案，如何在保持腹部脏器及血管成像图像质量的同时进一步减少辐射及碘剂量的使用。

简介：摘要母细胞性浆细胞样树突细胞瘤（BPDCN）是一种非常罕见的血液系统恶性肿瘤，全世界报道儿童病例不足百例。BPDCN临床进展呈高度侵袭性，极易累及骨髓，复发率高，中位生存期不足2年。BPDCN尚无标准治疗方案，多采用化疗联合造血干细胞移植的综合治疗方案。为了提高对BPDCN的认识，本文对BPDCN的临床表现、诊断和治疗进展、预后以及儿童病例特点进行综述。

简介：摘要目的建立并优化人冠状病毒NL63参考株(HCoV-NL63-NC_005831)的体外富集方法。方法以恒河猴肾细胞系(LLC-MK2)培养HCoV-NL63，以离心力135 000×g、分别离心病毒培养上清4 h、6 h、8 h、10 h和12 h以富集病毒，并以商品化PEG沉淀试剂盒富集方法作为对照。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、半数组织培养感染剂量(TCID50)和空斑实验对原始病毒液、富集病毒液分别进行病毒核酸和病毒生物活性定量检测，评价病毒富集效果；通过透射电镜负染观测病毒富集前后的形态。结果经层超速离心法及经PEG沉淀法分别进行体积100∶1富集处理，两种方法获得的富集病毒液相较于原液的病毒核酸浓度及活病毒浓度均有提高(P<0.001)。超速离心方法富集前后，电镜下观察到的病毒颗粒呈正常的负染形态；4 h、6 h、8 h、10 h和12 h超速离心后活病毒浓度平均分别是原病毒液的(7.35±1.62)倍、(13.98±1.71)倍、(36.36±10.41)倍、(48.16±9.38)倍、(54.26±7.02)倍，PEG沉淀后活病毒浓度是原病毒液的(3.39±0.16)倍，经超速离心法获得的富集病毒液的核酸浓度及活病毒浓度显著高于PEG沉淀法(P<0.05)；8 h、10 h、12 h超速离心后病毒浓度显著高于4 h和6 h(P<0.05)，但8 h、10 h、12 h之间病毒含量差异无统计学意义(P>0.05)。结论超速离心法相较于商品化的PEG沉淀法能更有效富集HCoV-NL63病毒；离心力为135 000×g时，选择8 h的超离时间可获得较优的体外富集效果。

简介：摘要目的提高对母细胞性浆细胞样树突细胞肿瘤（BPDCN）的诊断及鉴别诊断水平。方法分析广西医科大学第一附属医院2020年6月收治的1例BPDCN患者的临床资料，总结其临床表现及实验室检查的特点，并复习相关文献。结果本例患者有皮肤受累，肿瘤细胞有大伪足，高表达CD123，且CD4、CD56阳性，cCD3、MPO、cCD79a、CD19阴性，符合BPDCN表现。结论BPDCN的临床表现及细胞形态缺少特异性，主要借助免疫表型进行诊断及鉴别诊断。

简介：摘要目的探讨MYCN对NK细胞的调控作用及其介导神经母细胞瘤（neuroblastoma，NB）细胞免疫逃逸机制。方法采用荧光原位杂交法（FISH）法和免疫组织化学法检测NB组织MYCN的表达情况，流式细胞术检测外周血NK细胞数量及比例、NK细胞的活化、NK细胞表面活化受体和NB细胞表面相应配体的表达状况；干扰/过表达NB细胞系MYCN，与分选的健康儿童NK细胞进行共培养，ELISA法检测共培养上清中细胞因子的分泌状况，4 h乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测NK细胞对NB细胞的杀伤性。结果MYCN高表达NB患儿外周血NK细胞数量（F = 45. 53，P = 0. 0002）及比例（F = 43. 93，P = 0. 0003）显著减少，MYCN可显著抑制γ-干扰素、颗粒酶B和穿孔素的释放[SK-N-BE （2）：t = 9. 10，P = 0. 0008；t = 4. 76，P = 0. 0089；t = 4. 66，P = 0. 0096；SH-SY-5Y：t = 16. 79，P < 0. 0001；t = 35. 85，P < 0. 0001；t = 24. 66，P < 0. 0001]，抑制NK细胞的活化和对靶细胞的杀伤作用[SK-N-BE（2）：t = 7. 25，P = 0. 0019；SH-SY-5Y：t = 33. 07，P < 0. 0001]，MYCN高表达促进NK细胞NKG2A的表达[SK-N-BE（2）：t = 9. 25，P = 0. 0008；SH-SY-5Y：t = 14. 65，P = 0. 0001]，抑制NKG2D的表达[SK-N-BE（2）：t = 7. 21，P = 0. 0020；SH-SY-5Y：t = 8. 66，P = 0. 0010]，同时抑制NB细胞中NKG2D配体MICA[SK-N-BE（2）：t = 18. 35，P < 0. 0001；SH-SY-5Y：t = 56. 90，P < 0. 0001]和MICB[SK-N-BE（2）：t = 22. 40，P < 0. 0001]的表达。结论NB中高表达的MYCN可通过抑制NK细胞的数量及活性从而抑制NK细胞对NB细胞的杀伤介导NB细胞免疫逃逸。

简介：摘要目的分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血初始T细胞及记忆T细胞亚群分布情况。方法选取2018年6月至12月天津中医药大学第一附属医院肿瘤科NSCLC患者25例，同期健康志愿者20例作为对照，应用流式细胞仪分析外周血初始T细胞及记忆T细胞亚群含量，所得结果应用SPSS 16.0进行统计分析。结果NSCLC患者初始T细胞/干细胞样中央记忆T细胞(TN/SCM)百分率及绝对数均明显低于对照组[(7.71±1.11)% vs. (15.84±2.00)%，t＝3.685，P＝0.001；(8.38±1.23)×107/L vs. (3.40±0.43)×108/L，t＝6.130，P<0.001]，中央记忆T细胞(TCM)百分率及绝对数均明显低于对照组[(6.62±1.16)% vs. (17.88±0.83)%，t＝7.641，P<0.001；(7.98±1.78)×107/L vs. (3.40±0.31)×108/L，t＝9.028，P<0.001]，CD8＋TCM细胞绝对数明显低于对照组[(5.19±1.04)×106/L vs. (1.49±0.15)×107/L，t＝5.561，P<0.001]。NSCLC患者效应记忆T细胞(TEM)百分率明显高于对照组[(38.27±2.01)% vs. (17.37±1.06)%，t＝8.776，P<0.001]，CD8＋TEM细胞百分率及绝对数均明显高于对照组[(13.93±1.55)% vs. (4.65±0.52)%，t＝5.310，P<0.001；(1.48±0.14)×108/L vs. (9.97±1.14)×107/L，t＝2.584，P＝0.014]，终末分化效应记忆T细胞(TEMRA)百分率明显高于对照组[(17.33±1.86)% vs.(8.48±1.01)%，t＝3.989，P<0.001]。Ⅰ～Ⅱ期NSCLC患者CD8＋TCM细胞百分率及绝对数均明显低于Ⅲ～Ⅳ期患者[(0.33±0.06)% vs. (0.89±0.34)%，t＝2.600，P＝0.020；(3.99±0.84)×106/L vs. (9.03±3.07)×106/L，t＝2.270，P＝0.040]。不同病理类型NSCLC患者的初始T细胞及记忆T细胞亚群差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论NSCLC患者初始/记忆T细胞亚群较健康志愿者发生变化，具有分化能力和长期存活特性的TN/SCM及TCM降低，而且Ⅰ～Ⅱ期患者降低更为明显，以发挥免疫效应为主的TEM及TEMRA明显升高。