简介：

简介：神经细胞原代培养是研究神经细胞形态及功能的重要手段之一.传统方法是将神经细胞与神经胶质细胞混合培养,无法满足在单一神经细胞培养基础上进行实验研究的需要.本实验在传统培养方法的基础上加以改良,对原混合培养方法在胎龄、取材、温度、消化、换液、抑制剂、机械操作等方面进行了控制和改进.本培养方法具体改进如下:1.运动神经细胞取自E14大鼠胚胎的脊髓.因为胚胎运动神经元形态分化和化学分化程度较低,体外存活能力强,E14胎鼠脊髓易剥离.而传统方法是取E12～E16.E12胎鼠组织太嫩,不易分离;E16胎鼠脊柱已部分骨化,血液太多,挑离脊髓时易形成撕裂损伤.2.取材时将脊髓沿冠状面切开,取脊髓腹侧半,改变传统的整个脊髓培养,以达到培养单一运动神经元的目的.3.整个取材过程在冰袋上进行,更好的保持细胞活力.4.严格控制胰酶的浓度和消化时间.胰酶浓度是0.125%,37℃二氧化碳孵育箱内消化0.5hr较好,采用4℃含血清的DMEM液适时终止反应.为避免组织丢失,改吸弃胰酶为吸组织于另一试管中,且迅速终止消化反应.5.减少传统方法中的吹打次数,用弯头吸管代替直头吸管吹打;取消离心或细胞筛过目等步骤,降低细胞损害程度.6.细胞种植后改传统换全液为换半液,改传统培养2d换液为定时观察,按需换液.这样不仅保证了细胞在已适应了的环境中生长,并且减少了污染的机率.7.本方法不使用抑制剂,减少药物对运动神经元的损伤,使神经细胞在更接近于体内自然环境中生长.种植细胞1～2hr即可观察到细胞贴壁,胞体呈圆形,饱满、透亮,有短的突起出现.因此,本方法的优点是:不仅能够大大缩短从取材到种植的时间,提高运动神经元的活性,而且成功的获得了相对单一的运动神经元培养物(纯度达90%以上),为进一步开展神经生物学研究提供了相对稳定的体

简介：75只三月龄雄性昆明种小鼠,随机分为三组:正常对照组、镉(Cadmium,Cd)中毒组及维生素E加镉组.通过光镜、透射电镜及细胞形态计量方法定性定量研究三组小鼠黑质神经元的细微结构.研究结果表明,正常对照组小鼠黑质神经元结构正常;镉中毒组小鼠中脑黑质受损,黑质区神经元数量明显减少,部分神经元变性、坏死,异染色质增多边聚,核膜断裂,核周质内细胞器明显减少,此外有多处较大的软化灶形成,并有广泛的淋巴细胞浸润,围绕在血管周围形成血管套;维生素E加镉组小鼠黑质区神经元轻微受损,结构接近正常组,与镉中毒组比较有明显的不同,表现在:①黑质区神经元数量未见明显减少,酪氨酸羟化酶(Tyrosinehydroxylase,TH)免疫组化染色可见大量的TH阳性反应神经元.②变性及坏死神经元很少.但有少数神经元变性,胞核固缩、溶解,尼氏体减少或消失.染色质稀疏,均匀分布,核膜清晰完整,未见断裂,核周质内细胞器丰富.③个别小鼠黑质区有初期软化灶形成,病灶较小,灶内神经组织多已坏死,残留神经元胞体变小,胞核固缩,胞浆减少.④少数小鼠黑质区有弥漫性或局灶性淋巴细胞浸润,偶见淋巴细胞围绕在血管周围,但并未形成血管套.⑤体密度、数密度、平均截面积及平均体积等形状特征参数与镉中毒组比较有显著性差异(P＜0.05),与正常组比较除体密度有差别外(P＜0.05),其余均无统计学意义.以上结构证实:抗氧化剂维生素E对慢性镉中毒小鼠黑质神经元有显著的保护作用.

简介：解剖观察了80具成年尸体(男,51,女29),共有16具尸体(男10,女6)的18侧上肢存在肱二头肌副头,侧发生率为11.25%,其中4头者仅1例.观测了副头的起止、肌腹形态、神经支配与动脉来源等特点.发现有83.33%肱二头肌副头的起点集中于肱骨中段上部的前面,起点在距离喙肱肌止点最下部1～4cm的区域;肌腹形态以圆(条)索状最多、带状次之.肱二头肌副头的神经由肌皮神经发支者占86.67%,其余由正中神经发支;副头动脉由肱动脉发出者占75%,其余由肱二头肌动脉发出者占25%.分析了肱二头肌副头的临床意义.

简介：经典神经理论认为,中枢神经系统(centralnerv-oussystem,CNS)内的神经元是高度分化的终极细胞,其已丧失增殖能力,若失去神经元细胞只有通过胶质细胞来填充.因而,CNS损伤后CNS神经元难以再生的客观事实长久以来一直是令神经科学工作者困惑的问题.缺血性脑血管疾病是严重危害人类健康的疾病,其高发病率、致残率和死亡率为病人、家庭和社会带来极大的痛苦和负担.随着生活水平的提高,社会老龄化进程的加速,其发病存在上升趋势.中枢神经损伤后神经元难以再生,神经元丢失所遗留的神经网络环路缺失是神经功能损伤和脑中风后遗症的根本原因.因此,要减少脑中风后遗症和脑脊髓外伤等所致的残疾,解决问题的关键是实现神经元再生,修复缺失的神经网络环路.而神经干细胞的发现使人们对脑中风后遗症的彻底治愈燃起了新的希望.

简介：观察大鼠下丘脑各核团NOS阳性神经元的分布，采用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶（NADPH－d)法，结果显示，大量NOS阳性神经元见于下丘脑外侧区，视上核（SO）和室旁核（Pa)；出现较多NOS阳性神经元的部位是视前大细胞核，见到少量NOS阳性神经元的部位是室周核，视前内侧区，视前外侧区和下丘脑前区，结论：NOS阳性神经元分布于下丘脑的许多核团。

简介：一氧化氮合酶(NOS)为一含铁的单氧化酶,可催化左旋精氨酸转化为瓜氨酸和NO.而阿霉素(ADR)是一种有效的广谱抗肿瘤药物,由于其心脏毒性作用,使临床应用受到限制.我们在探讨阿霉素对心脏损伤病理机制的实验研究中,用双重组化法同时显示心室肌NOS与糖元获得成功,现报道如下:1.材料和方法:1.1动物模型新西兰纯种白兔于耳缘静脉注射ADR,每次2mg/kg,ADR以生理盐水稀释成1mg/ml,每周一次,共八周,做心室肌损伤模型.取心室肌组织做冰冻切片,厚12μm.1.2主要试剂(1)还原型尼克酰胺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH-d);(2)四唑仑硝基兰(NBT);(3)0.5%过碘酸氧化液;(4)Schiff液:先将200ml双蒸水煮沸,微火,加入1g碱性复红,再煮沸1min.冷却至50℃加入20ml1N盐酸,待35℃时加入1g偏重亚硫酸钠.室温中静置5小时,变为无色液体后装入棕色瓶内并封口,放入冰箱避光保存待用.1.3双重组化法.(1)将冰冻切片置入丙酮固定1min;(2)经pH7.4PBS液清洗三次,每次5min;(3)入NADPH-d与NBT配制的孵育液,37℃恒温孵育1h;(4)经pH7.4PBS液清洗三次,每次3min;(5)入0.5%过碘酸氧化10～20min;(6)经pH7.4PBS液充分清洗;(7)入Schiff液10min液10min;(8)流水冲洗10min;(9)无水乙醇脱水;(10)二甲苯透明,中性树胶封片.1.4单一组化法显示NOS.(步骤参照双重组化法1～4步)1.5单一组化法显示糖元.(步骤参照双重组化法5～8步).2.实验结果:2.1双重组化法显示心室肌中NOS呈蓝色、糖元呈红色.2.2单一组化法显示心室肌中NOS呈蓝色.2.3单一组化法显示心室肌中糖元呈红色.结论:通过三组切片的比较,发现使用两种方法所显示NOS与糖元的颜色及其深浅无明显变化.3.意义3.1用双重组化法可以同时显示心室肌NOS和糖元.此法与单一显示NOS组化法和单一显示糖元组化法进行比较,结果显示NOS与糖元的颜色均无明显改变.此结果说明两组试剂的染色过程不产生交叉影

简介：围绕如何培养学员的学习能力、思维能力、动手能力和运用专业外语的能力方面，我们除注重理论课和实习课外，还特别注重第二课堂的活动。目的是在有限的教学时程内，使学员既能掌握本门课程的基本知识与技能，又能使上述能力得到明显提高。第二课堂活动的内容有讲座，组织学制作技术，组胚知识竞赛和翻译英文论著。知识竞赛由学员组队参加，最后评出集体和个人1，2，3等奖。知识竞赛的题目涉及到组胚学各个知识点，专业英语等，甚至包括教员从本讲过的知识，具有一定的深度和难度。通过组胚知识竞赛，帮助学员扩大了知识面，提高了对组胚学习的兴趣，对全面深入的掌握组胚知识有很大帮助。第二课堂的翻译论文活动，提高了学员的专业英语水平，在教员指导下已发表论文摘译10余篇。通过组织学制片技术，培训了学员的动手能力。在第二课堂活动中，发现了一些掌握组胚知识坚实的学员，他们中一些人因此而选择了终身从事组胚专业的道路。调查显示，最受学生欢迎的第二课堂活动是知识竞赛，其次是组织学制片技术。在丰富多采的第三课堂活动中，学员的科研能力得到提高，而且丰富了知识，拓宽了眼界，提高了专业英语水平，达到培养人才的预期目的。

简介：神经生长因子的多功能性王廷华，吴良芳，廖德阳华西医科大学组织学研究室成都６１００４１神经生长因子（Ｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＮＧＦ）作为一种靶源性神经营养因子维持着特定类型神经元的存活和发育，这一点已有诸多的实验证实［１，２］。然而现今将Ｎ...

简介：解剖学是医学中重要基础课,属于形态学科,理论和实验比例达1:1,五年制高职学生来源于应届初中毕业生,年龄在14～16岁之间,学生的自学能力较差.

简介：目的:探讨肝、脾、肾等实质性器官石蜡切片技术中脱水、透明的最佳时间.方法:对肝、脾、肾进行分组实验,对照观察.结果:实验器官组织块可连续切片,光镜结构透明度高、清晰,无裂隙,收缩小.结论:此实验方法操作简单,益于大量教学片的制作.

简介：脑血管疾病是21世纪严重影响人类健康和生活质量的三大疾病之一，至今尚无有效治疗措施，致死敛残卑高，给社会及家庭带来沉重的经济负担和心理负担。脑缺血后主要的病理改变是神经元的进行性损伤，从可逆变性、不可逆变性、坏死、凋亡、梗塞成熟的进行性发展。神经元功能活动的结构基础是突触，突触在机体遭遇外环境改变或病理状态下其结构和功能的改变被称为突触可塑性。其中胶质细胞源性神经营养因子（glialcellline-derivedneurotrophicfactor，GDNF）对中脑多巴胺能神经元，运动神经元等多种神经元有广泛的神经营养作用，以前的大量实验表明GDNE可以通过多种途径、机制抵抗缺血性损伤，本文就GDNF与突触可塑性方面的关系做一综述。

简介：实验性链脲佐菌素糖尿病动物模型的建立与研究刘学政，羊惠君，李瑞祥华西医科大学解剖学教研室成都６１００４１糖尿病是严重危害世界各国尤其是欧美国家人们健康的全身性进行性疾病，发病率高，并发症、合并症严重。近年来一些发展中国家糖尿病发病率呈现上升的势头。目...

简介：将医学学习指导的科学原理运用于系统解剖学教学中，把学员式评论复习，精讲性主导教学，合作式自主学习，自学指导同科学思维，认知技能，记忆能力的培养有机地结合在一起，创立了系统解剖学的评论性思维合作教学法，它能够使绝大多数需要指导的医学生（系统解剖学教学中占总人数的77．05％）在各方面受益；（1）显著地促进医学生特有的形态学认知技能水平的提高，使76．54％的学生得到充分的支能培养；（2）促进医学生解剖学知识量的增加，促进医学生理论思维与表达能力的培养，可使40．59％的学生理论知识和思维表达能力明显提高，使极差生从传统教学法的10％以上降至接近于零；（3）有利于医学生学习兴趣，自主学习技能和协作技能的培养，使52．7％的学生学习兴趣明显提高并长期保持，它表明，根据医学学习原理进行分学科系统的学习指导应是各学科教学改革研究中极为重要的领域。