简介：目的探讨人心房肽(hANP)cDNA转染细胞的微囊化技术，测定其ANP的表达水平，以及研究ANP分泌的近日节律；通过人工调控，改变ANP分泌的近日节律，达到有效治疗高血压或心衰的目的。方法将人ANP基因(cDNA)转染入CHO细胞，然后将细胞包被在聚己内酯(PCL)管内形成微囊，并检测转基因CHO细胞长时间存活情况和分泌的ANP。检测微囊化转基因细胞分泌ANP的生物节律，并用褪黑素(melatonin)进行调整。结果在培养期间，长度20mm直径3mm的PCL管内转染CHO细胞在2ml培养基中24小时分泌的ANP水平可达210．3ng／L；ANP的分泌呈近日节律性变化，日间高，而夜间低；近日节律变化的时相是4：15，用melatonin处理，近日节律的时相移至7：55。结论ANPcDNA转染的CHO细胞包被在PCL管内并能向管外分泌ANP．将来可能话于植人人体．此项研奔为心房肽治疗高血压或心衰提供了一条新途径。

简介：目的探讨克隆氏病的手术适应证和影响术后复发的因素.方法对17例病理确诊为克隆氏病患者的诊断及外科治疗进行回顾性分析.结果本组术后随访15例,其中1例术后死于腹腔严重感染及中毒性休克,其余14例随访1个月～10年,其中10例术后坚持配合内科治疗,有8例临床症状基本消失或症状轻微;而术后未配合内科治疗者,4例中有3例症状同前,仅1例症状轻微.结论本病当并发肠梗阻、消化道大出血、肠穿孔、腹膜炎等是外科治疗的适应证.对于病变局限于某一肠段,症状反复发作,且正规内科治疗效果不显著者亦应考虑外科手术治疗.术后能配合积极的内科治疗是降低术后复发率的重要措施.

简介：利用分子生物学方法,我们将K562细胞林bcr/ablmRNA0.3kb的接合区cDNA片段用聚合酶链反应扩增并插入到质粒pGEM-4-Z载体中。经限制酶切分析和荧光标记M13引物法DNA序列测定,证实重组质粒pB3A2中有0.3kb的插入片段与K562mRNA接合区序列完全一致。我们分离到的接合区DNA可用于bcr/abl基因的检测及其反义核酸抑制的研究。

简介：克隆氏病（Crohn’Sdisease）是一种消化系统炎症性疾病。此病无法治愈，但患者在缓解期内可以免受疼痛和腹泻的折磨。一篇新的Cochrane系统评价提示，肠内营养可能成为延长缓解期的途径之一。

简介：摘要目的高温依赖蛋白HtrA的克隆表达，为进一步研究其结构与功能奠定基础。方法构建重组质粒pGEX-6P-1/HtrA，经PCR、测序鉴定后将其转化至表达宿主菌E.coliBL21中。结果构建了重组质粒pGEX-6P-1/HtrA，并在E.coliBL21菌中高效表达出相应分子量的GST-HtrA目的蛋白，表达了相对分子量（Mr）与预测分子量相近的可溶性蛋白。重组蛋白经GST树脂成功纯化。结论成功克隆表达了HtrA蛋白，为进一步研究其结构与功能奠定了基础。

简介：摘要目的通过分子生物学技术对结核分枝杆菌Rv0350基因克隆、表达与纯化。方法以结核分枝杆菌标准菌株H37Rv为模板，经聚合酶链式反应(PCR)扩增，克隆Rv0350基因，与质粒pET-28a连接构建重组质粒，转入大肠杆菌BL21(DE3)，经异丙基半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过镍亲和层析获得纯化的重组蛋白。结果对扩增后的基因进行电泳试验，证实成功重组目的基因，对重组纯化后的蛋白进行考马斯亮染、Weston-blot验证已成功重组Rv0350。结论通过分子生物学技术可成功获得大量结核分枝杆菌Rv0350抗原，为后续功能与机理研究奠定基础。

简介：

简介：慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）的免疫治疗是清除白血病微小残留病并最终根治ＣＭＬ的方向之一，包含ＢＣＲ－ＡＢＬ融合区的多肽具有良好的免疫原性，在体内、外可诱发ＢＣＲ－ＡＢＬ特异的Ｔ细胞克隆。以ＢＣＲ－ＡＢＬ融合肽瘤苗激发特异性Ｔ细胞应答ＣＭＬ免疫治疗有希望成为根治ＣＭＬ残留白血病的有效手段。本实验通过基因工程技术，设计一个２８０ｂｐ的融合抗原基因片段，包含ＨＬＡ－Ａ２，ＨＬＡ－Ａ３，ＨＬＡ－ＤＲ１１等３

简介：本文阐述了CD20的分予结构、CD20单克隆抗体的免疫抑制机制、在肾移植中的应用以及存在的问题与展望。

简介：摘要目的CPSIT_0420蛋白的克隆表达，为进一步研究其结构与功能奠定基础。方法构建重组质粒pGEX-6P-1/CPSIT_0420，经PCR、测序鉴定后将其转化至表达宿主菌E.coliBL21中。结果构建了重组质粒pGEX-6P-1/CPSIT_0420，并在E.coliBL21菌中高效表达出Mr约为28kDa的GST-CPSIT_0420目的蛋白，表达了相对分子量（Mr）与预测分子量相近的可溶性蛋白。重组蛋白经GST树脂成功纯化。结论成功克隆表达了CPSIT_0420蛋白，为进一步研究其结构与功能奠定了基础。

简介：目的比较不同厂家单克隆抗体检测封闭抗体的结果差异。方法使用BD公司及贝克曼-库尔特（BC）公司的复合CD4/CD8/CD3三色荧光抗体,对30例反复自然流产（Recurrentspontaneousabortion,RSA）患者进行流式细胞术封闭抗体（Blockingantibody,BA）检测,用kappa系数评价两种抗体检测结果的一致性,用McNemar检验比较两种抗体的差异及其对临床决策的影响。结果经McNemar检验,当以BA单项阴性为需要接受主动免疫治疗的标准,则两组差异有统计学意义（P〈0.05）;若以BA双项阴性为需要治疗的标准,则两组差异无统计学意义（P〉0.05）;两种抗体检测结果一致性较差,kappa系数=0.2。结论两种单克隆抗体检测封闭抗体的结果存在差异,实验室应明确使用抗体的厂家,尤其是对同一患者治疗前后检测封闭抗体变化时应使用相同厂家的抗体。

简介：载脂蛋白（APO）B主要分布在人体血液中的的低密度脂蛋白（LDL）和极低密度脂蛋白（VLDL）中，约占LDL蛋白质的95％～99％，其主要功能是参与脂质转运和被细胞膜上的LDL受体识别。研究证明，apoB与动脉粥样硬化（AS）的发生有着密切的关系。近年来，多数医院已开展了测定人体血液中apoB含量来判定AS的危险程度。而国内所用的试剂盒均为多克隆抗体，这给临床测定结果的准确性和特异性带来了一定的差异。为此国内许多研究单位拟想通过基因重组技术，将apoB单抗细胞株通过逆转录、构建使其表达apoB单链抗体。

简介：目的制备胃动素受体多克隆抗体和研究该受体在人胃中的组织定位.方法通过合成肽耦联钥孔戚血蓝蛋白(keyholelimpethemocyanin,KLH)制备抗体,以ELISA方法测定效价.用含有GPR38基因(胃动素受体)的质粒转染293细胞株,以RT-PCR方法鉴定.Westernblot和免疫组织化学法检测转染的293细胞和组织中胃动素受体的表达.结果制备的兔抗人的多抗效价达1∶500000,有较好的特异性.成功转染293细胞,该细胞能够瞬时表达胃动素受体,而该受体在人胃窦胃体的黏膜腺上皮中表达.结论应用合成肽-KLH成功地制备了胃动素受体的兔抗人多克隆抗体,用该抗体检测到人胃窦胃体黏膜上皮细胞存在胃动素受体的表达.

简介：摘要：现阶段，国内企业（含外企）单克隆抗体（以下简称“单抗”）药物生产设备主要有传统型生产设备和一次性抛弃型生产设备两种。通过项目设计实例，结合中国GMP（2010修订版）的要求，就一次性抛弃型生产设备的车间布局设计进行探讨与分析。

简介：

简介：摘要目的探讨应用右佐匹克隆治疗老年原发性失眠症的临床疗效。方法选取近一以年来在我院接受治疗的76例老年原发性失眠症患者，随机分为观察组和对照组，每组各38人，观察组使用右佐匹克隆片(1～3mg)，对照组使用艾司唑仑片(1～2mg)。疗程均为30d。采用匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)记录和观察两组患者的睡眠变化情况及不良反应，评估两组患者的睡眠质量。结果观察组患者的睡眠质量改善程度优于对照组，差异存在统计学意义(P<0.05)。结论将右佐匹克隆用于老年原发性失眠患者的临床治疗中具有更好的疗效和更高的治愈率。

简介：本研究获取主要组织相容性复合体（MHC）Ⅰ类分子的轻链部分,即β2-微球蛋白（β2m）以制备MHCⅠ类分子-肽四聚体.根据已报道的序列设计特异引物,利用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法从人白细胞中克隆β2m的基因,并构建β2m的原核表达载体,在大肠杆菌中进行表达.结果显示：构建的编码成熟β2m的pET-β2m可在大肠杆菌BL21（DE3）中高效表达β2m,表达量占菌体总蛋白的32%,β2m以包涵体的形式表达,经洗涤、变性后,以SephacrylS-200HR（S-200）柱层析纯化,纯度可达95%以上,纯化产物采用稀释法复性.Westernblot分析表明,该蛋白具有与抗人天然β2m抗体反应的特性.结论：获得了高效表达人β2m的大肠杆菌工程菌株,建立了简便有效的β2m包涵体纯化、复性方法,为制备MHCⅠ类分子-肽四聚体奠定了基础.

简介：摘要:

简介：【摘要】目的：探究佐匹克隆与艾司唑仑治疗老年睡眠障碍的效果。方法：选取我院2022年6月～2023年6月收治的70例老年睡眠障碍患者作为研究对象，按照随机数字表分组方法分为BT组与EK组，两组各35例，BT组采用艾司唑仑治疗，EK组采用佐匹克隆治疗。比较两组患者治疗效果、睡眠质量、不良反应发生率。结果：EK组患者治疗效果显著高于BT组（P＜0.05）；治疗前两组患者睡眠质量评分比较差异无统计学意义，治疗后EK组显著低于BT组（P＜0.05）；EK组患者不良反应发生率显著低于BT组（P＜0.05）。结论：在老年睡眠障碍治疗中采用佐匹克隆治疗可获得良好的治疗效果，能提升患者睡眠质量，且降低患者不良反应发生率，安全性较高，值得临床推广应用。

简介：【目的】原核表达纯化人锌指蛋白（zincfingerprotein580,ZNF580）并制备抗人ZNF580单克隆抗体。【方法】将构建的重组质粒pET30a-ZNF580转化大肠杆菌BL21（DE3）,由异丙基-β-D-半乳糖苷（Isopropylbeta-D-galactosidase,IPTG）诱导表达并纯化目的蛋白。将纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠,制备针对ZNF580的特异性单克隆抗体并通过ELISA和Westernblotting方法鉴定。【结果】含有该质粒的大肠杆菌BL21（DE3）经IPTG诱导表达后,产物蛋白分子量约为19kDa,通过将Sp2/0细胞与免疫鼠的脾细胞融合获得了1株能稳定表达ZNF580抗体的杂交瘤细胞株（H4E4C5）,其分泌的单克隆抗体的IgG亚类IgG2b,ELISA检测腹水抗体效价为1：1.28×10~5,Westernblotting结果显示抗ZNF580单克隆抗体具有良好的特异性。【结论】本实验成功表达并纯化了ZNF580蛋白并制备了抗ZNF580蛋白的单克隆抗体,为进一步研究锌指蛋白ZNF580的功能奠定了基础。