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  • 简介:目的:建立SYBRGreenI实时RT-PCR快速检测呼吸道胞病毒(respiratorysyncytialvirus,RSV)A、B亚型的方法。方法:根据RSVG蛋白编码基因的核苷酸序列设计三条引物,其中P1为RSV通用引物,P2、P3分别为A、B亚型特异性引物。使用SYBRGreenI荧光染料结合熔解曲线分析进行检测,根据产物特征性熔解温度(meltingtemperaturesTm)鉴别RSVA、B亚型。结果:本法对RSVLong株(A亚型)和CHl8375株(B亚型)进行检测,其Tm值分别为84.06和89.06℃;与常见呼吸道病毒间无交叉反应;48例临床标本中检出RSV阳性29例,其中A亚型占72.4%(21/29),B亚型占27.6%(8/29)。结论:SYBRGreenI实时RT-PCR结合熔解曲线分析检测RSV亚型具有快速、简便、特异等特点,可对临床标本直接分型。

  • 标签: 呼吸道合胞病毒 实时PCR 熔解曲线分析
  • 简介:目的:研究L-PGDS的mRNA及蛋白在脑胶质瘤中的表达情况。方法:用半定量RT-PCR方法和Westermblot检测L-PGDS害脑胶质瘤组织和脑脊液的表达水平。结果:半定量RP-PCR结果,经统计学分析,L-PGDS的mRNA在正常组织中的表达水平为1.43±0.61,而在脑胶质瘤组织中的表达水平为1.07±0.27,两组比较,差异有显著意义(P<0.05)。蛋白定量发现,脑脊液中L-PGDS在脑胶质瘤中减少。结论:发现L-PGDS的mRNA及蛋白在脑胶质瘤表达水平下降,这可能对脑胶质瘤的诊断、治疗有潜在的应用价值。

  • 标签: 前列腺素D合酶 脑胶质瘤 L-PGDS MRNA 蛋白 诊断