简介：目的对北京大学人民医院不同年度临床分离的铜绿假单胞菌进行整合子基因盒检测，分析其变化趋势及其与细菌耐药性的相关性。方法应用PCR对2006--2008年临床分离的420株铜绿假单胞菌进行整合子检测，对阳性PCR产物采用HinfI内切酶作限制片段多态性（RFLP）分析进行整合子分类，并对整合子阳性株进行耐药基因盒的扩增与测序。结果420株铜绿假单胞菌中116株（27．6％）检出I类整合子，未检出Ⅱ、Ⅲ类整合子。对2006年及2008年的整合子阳性菌株可变区基因盒扩增得到7种不同的基因盒图谱，片段大小在710～2526bp，基因盒为介导氨基糖苷类抗生素耐药的aadB、aadA族和介导甲氧苄啶耐药的dfrA1和dhfrXVB。结论该院铜绿假单胞菌中整合子检出率随年度呈上升趋势，携带的基因盒与其耐药表型有相关性。

简介：目的探讨体外联合应用抗菌药物对泛耐药铜绿假单胞菌（PDRPA）感染的杀菌能力，寻求有效的抗菌药物联合。方法收集20株急性呼吸道感染患者中分离的PDRPA，进行抗菌药物联合杀菌试验（MCBT），并用微量肉汤稀释法测定最低抑菌浓度（MIC）及最低杀菌浓度（MBC），SPSS11．5统计软件分析数据。结果PDRPA对多黏菌素β单药最敏感；阿米卡星联合β内酰胺类抗生素（头孢他啶、氨曲南、哌拉西林-他唑巴坦）抗菌活性增强最显著（P〈0．05）；2种β内酰胺类抗生素联合（头孢他啶与氨曲南、头孢他啶与哌拉西林-他唑巴坦）也表现出对部分菌株抗菌活性增强。结论对PDRPA进行个体化的MCBT可能有助于抗菌药物联合治疗PDRPA的选择。阿米卡星联合β内酰胺类或两种β内酰胺类抗生素联合治疗值得临床进一步观察。

简介：目的了解2011年中国不同地区铜绿假单胞菌临床分离株的耐药性和耐药特征，指导临床合理使用抗菌药物。方法对全国15所医院临床分离的6012株铜绿假单胞菌按照统一方案，采用统一材料、方法（K-B法或自动化仪器）和判断标准（CLSI2011年版），进行铜绿假单胞菌的耐药性监测，并用WHONET5．6软件进行数据分析。结果2011年15所医院从临床标本中共分离6012株铜绿假单胞菌，其中92．9％分离自住院患者，73．7％的菌株分离自呼吸道标本。铜绿假单胞菌对阿米卡星的耐药率最低，为14．3％。耐药性最高的医院分离株对大多数抗菌药物的耐药率均高于30％，而耐药性最低的成人医院分离的菌株对大多数抗菌药物的耐药率均低于20％，2所儿童医院分离菌株对各种抗菌药物的耐药率均低于17oA；分离自门诊的菌株对各种抗菌药物的耐药率均低于25％，而分离自ICU的菌株除了对阿米卡星的耐药率为16．1％外，对其他各种抗菌药物的耐药率均高于23％。各医院泛耐药铜绿假单胞菌的检出率平均为1．8％。结论我国不同地区、不同医院临床分离的铜绿假单胞菌对抗菌药物的耐药率仍处于较高水平，但近年耐药性增长趋势稳定。各地区、各医院、各科室患者的分离株对抗菌药物的耐药性相差较大，医疗机构应加强细菌耐药监测，指导临床合理使用抗菌药物。

简介：目的研究产AmpC酶的铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的分子机制。方法2003-2007年从临床标本中分离到铜绿假单胞菌220株，采用三维试验筛选产8内酰胺酶（包括AmpC酶）的铜绿假单胞菌，应用多重PCR检测产AmpC酶的铜绿假单胞菌质粒携带的AmpC耐药基因，应用荧光定量RT—PCR的方法检测染色体AmpC酶基因和oprD2基因的表达情况。结果共检出40株产口内酰胺酶的菌株，其中产AmpC酶、ESBLs、金属酶（MBL）和未知酶型铜绿假单胞菌的构成比分别是62．5％（25／40）、20％（8／40）、7．5％（3／40）和10％（4／40）。25株产AmpC酶菌株均有不同程度AmpC酶基因表达量升高，其中，仅1株细菌携带DHA质粒型AmpC酶基因，12株菌oprD2基因表达量减低，这些菌株均对亚胺培南耐药，13株菌oprD2基因表达量正常，其中仅5株菌对亚胺培南耐药；7株菌（占产AmpC酶菌株的28％，不产金属酶）的酶粗提物能微弱水解IPM，这7株菌AmpC酶基因的表达量均有明显升高，其中5株菌同时伴有oprD2基因表达量降低。结论铜绿假单胞菌产生的AmpC酶可做弱水解亚胺培南，且其水解亚胺培南可能与AmpC酶产生量有一定关系；产AmpC酶铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的原因可能是细菌AmpC酶表达量增加和oprD2表达量减低两者共同作用的结果。

简介：目的了解郑州大学第一附属医院近6年来临床分离铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药性变迁。方法收集2009年1月—2014年12月该院细菌室分离的不重复铜绿假单胞菌10662株,分析探讨其分离率与分布、耐药性变迁、多重耐药铜绿假单胞菌检出情况。结果2009-2014年逐年铜绿假单胞菌总分离率分别为13.8%、17.6%、15.2%、15.7%、14.4%和12.6%;主要分布在ICU（46.0%）、呼吸科（21.0%）、普外科（15.0%）和内科（11.0%）等;主要标本来源为痰液（74.7%）、血液（5.9%）、分泌物（5.7%）等;6年间铜绿假单胞菌对哌拉西林-他唑巴坦、头孢哌酮-舒巴坦、头孢他啶、美罗培南、亚胺培南耐药率呈现整体上升趋势;逐年多重耐药菌株检出率分别为22.5%、22.6%、26.0%、30.9%、32.5%和33.0%,呈升高趋势。结论该院临床分离铜绿假单胞菌对抗菌药物的耐药率处于较高水平且增长较快,应加强监测以利于临床合理应用抗菌药物。

简介：目的了解2009年我国不同地区铜绿假单胞菌临床分离株的耐药性和耐药特征,指导临床合理使用抗菌药物。方法对全国14所教学医院临床分离的4912株铜绿假单胞菌采用纸片扩散法(K-B法)进行药敏试验,按CLSI2009年标准判定药敏试验结果,并用WHONET5.4软件进行数据分析。结果2009年14所医院从临床标本中共分离出4912株铜绿假单胞菌,其中91.9%分离自住院患者,73.6%的菌株分离自呼吸道标本。铜绿假单胞菌对阿米卡星的耐药率最低,为14.8%,对其他抗菌药物的耐药率均高于18%。昆明医学院第一附属医院分离株对各抗菌药物的耐药率均高于30%,除对头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦和头孢哌酮外,对其他10种抗菌药物的耐药率在14所医院中均为最高;北京医院和安徽医科大学第一附属医院分离的菌株对大多数抗菌药物的耐药率在35%左右,甘肃省人民医院分离株对抗菌药物(除庆大霉素和环丙沙星外)耐药率均低于10%;上海复旦大学附属儿科医院对各抗菌药物的耐药率均低于10%。泛耐药铜绿假单胞菌的检出率为1.7%。结论我国铜绿假单胞菌的耐药性与2007年相比基本相仿,略有减低,但总体仍处于较高水平。不同医院抗菌药物的耐药性相差较大。ICU仍是监控重点。我们应加强监测,指导临床合理使用抗菌药物并控制院内耐药菌的流行。

简介：目的分析碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌感染的临床特征，为碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌感染的防治提供参考和依据。方法对2013年1-12月复旦大学附属华山医院85例碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌（CRPA）和94例碳青霉烯类敏感铜绿假单胞菌（CSPA）感染病例进行回顾性队列分析。结果CRPA感染组在神经外科（40．0％）和ICU（22．4％）的占比显著高于CSPA感染组（16．0％和9．6％）；CRPA感染组原发疾病主要为脑外伤（30．6％）和脑血管意外（21．2％），显著高于CSPA感染组的11．7％和8．5％；CRPA感染组患者的发热、意识状态改变及严重低蛋白血症占比明显高于CSPA感染组；CRPA感染组39例（45．9％）存在复数菌感染，高于CSPA感染组的23例（24．5％）；CRPA感染组抗菌药物治疗有效者38例（44．7％），低于CSPA感染组的74例（78．7％）；CRPA感染组病情恶化47例（55．3％），包括死亡14例（16．5％）显著高于CSPA感染组的20例（21．3％）和1例（1．1％）。经过Logistic回归分析得出临床感染CRPA的独立危险因素为先前应用碳青霉烯类、经外周静脉穿刺中心静脉置管、留置鼻饲管和机械通气。结论CRPA感染临床表现无特征性，但治疗困难，预后更差，其控制关键在于合理使用抗菌药物，并针对危险因素做好医院感染防控。

简介：目的探讨耐亚胺培南铜绿假单胞菌（PA）产生的OXA型β内酰胺酶的基因型及其与整合子的关系.方法收集临床分离耐亚胺培南PA;提取总DNA,用PCR技术作OXA基因（blaOXA）分型及整合子可变区PCR定位.结果105株受试菌中,共检出blaOXA阳性株20株,其中14株blaOXA-Ⅰ阳性（包括3株同时blaOXA-Ⅱ阳性,3株同时blaOXA-Ⅲ阳性）,另6株仅blaOXA-Ⅱ阳性.20株阳性株中10株含酶基因相关整合子.结论国内耐亚胺培南PA中部分菌株产blaOXA-Ⅰ,同时存在产OXAⅡ、Ⅲ型酶菌株,且酶基因与整合子相关.

简介：目的了解我院耐碳青霉烯类抗生素铜绿假单胞菌的金属酶(MBL)携带情况及型别特点,并探讨进行金属酶筛选的简便方法。方法采用K-B法进行药物敏感性试验,采用2-巯基乙醇纸片与EDTA纸片协同试验筛选产MBL菌株,并对MBL基因进行PCR和序列分析。结果45株碳青霉烯类抗生素耐药菌株用2-巯基乙醇纸片协同试验阳性3株,EDTA纸片协同试验阳性4株,经PCR验证均为阳性,除此之外,还有1株PCR阳性而2种纸片协同法都没有筛选出来。其中2-巯基乙醇纸片协同试验筛选的灵敏度为60%,特异度为95%,准确率为95%,EDTA纸片协同试验的灵敏度为80%,特异度为97%,准确率为97%。引物IMP扩增阳性4株,VIM扩增阳性1株,PCR产物纯化测序后发现IMP均为IMP-1型而VIM为VIM-2型。结论用EDTA协同试验法对碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌进行MBL的筛选简单有效,可用来在临床微生物实验室作为产MBL铜绿假单胞菌的初筛试验。分型研究表明我院流行的铜绿假单胞菌以产IMP-1型为主。

简介：目的了解淮北3所医院临床分离的36株铜绿假单胞菌氨基糖苷钝化酶（AME）基因存在情况。方法采用MIC法测定临床分离菌株对3种氨基糖苷类及其他11种临床常用抗菌药物的敏感性；聚合酶链反应（PCR）法检测所测菌株中9种AME基因。结果36株临床分离铜绿假单胞菌对阿米卡星、庆大霉素和妥布霉素的耐药率分别为62．2％、70．3％和81．1％；27株（75．0%）检出AME基因，ant（3″）-Ⅰ、aac（6′）-Ⅱ、aac（6′）-Ⅰ、aac（3）-Ⅱ和ant（2″）-1检出率分别为63．9％、58．3％、50．0％、38．9％和36．1％，未检出aac（3）-Ⅰ、aac（3）-Ⅲ、aac（3）-Ⅳ、aph（3′）Ⅳ基因。结论淮北3所医院临床分离的铜绿假单胞菌对氨基糖苷类抗生素耐药严重，AME携带率高且基因型的分布有明显的地区性。

简介：目的了解淮北地区分离的多重耐药铜绿假单胞菌中羧苄西林酶（CARB）基因携带情况及其基因检测。方法用法国生物梅里埃公司VITEK-32全自动微生物分析仪鉴定临床分离的铜绿假单胞菌并作药敏试验;采用PCR法筛检出铜绿假单胞菌CARB基因,用DNA测序法对阳性扩增产物测序分型。结果通过药敏试验筛检出36株多重耐药铜绿假单胞菌,其中9株携带CARB基因,检出率为25.0%。经DNA测序并进行BLAST比对,确定基因型为CARB-8型。结论淮北地区临床样本中分离的多重耐药铜绿假单胞菌携带CARB-8型β内酰胺酶基因,携带率为25.0%,应引起临床重视。

简介：目的分析1株临床分离携有多重耐药基因盒整合子的铜绿假单胞菌的耐药特性。方法应用PCR-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）对整合子进行检测及分型，用长片段PCR（Long—PCR）扩增整合子的可变区并进行DNA测序，分析整合子可变区含有的耐药基因。同时应用PCR扩增金属酶基因和oprD2基因。结果该株铜绿假单胞菌PA27携带Ⅰ类整合子，其可变区大小为3.0kb，含有编码对氨基糖苷类、氯霉素和β内酰胺类抗生素耐药的基因，经与GenBank数据库进行同源性分析（BLAST），确定为一种新型基因盒组合形式：aac（6’）-Ⅱ-cm1A8-OXA-10，GenBank登录号为EU708817。oprD2基因检测阳性，未检出IMP-1、VIM-2和IMP-2型金属酶基因。结论该地区首次报道携带新型基因盒组合形式的Ⅰ类整合子的铜绿假单胞菌，并携有多重耐药基因，应引起临床高度重视。

简介：目的分析2003-2007年我院1073株铜绿假单胞菌对抗菌药物的耐药情况。方法采用全自动微生物分析仪VITEK32进行细菌鉴定，用GNS药敏卡及Kirty-Bauer法进行药敏试验。结果5年来，1073株铜绿假单胞菌以下呼吸道标本中最为常见（61．4％）。以ICU、呼吸科ICU、外科ICU检出率最高（57．8％）。对16种抗菌药物耐药率较低的有头孢哌酮-舒巴坦（17．0％）、美罗培南（18．5％）、阿米卡星（19．6％）、亚胺培南（24．2％）、头孢吡肟（25．7％）、哌拉西林-他唑巴坦（35．7％）和头孢他啶（36．7％）。虽然头孢哌酮-舒巴坦、头孢他啶的耐药率较低但中介率较高，分别达15．2％、12．5％，应引起临床医师高度重视。结论连续5年回顾性分析，铜绿假单胞菌是我院医院感染的主要病原菌，对16种抗菌药物的耐药性相当严重，且常呈多重耐药，给临床抗感染治疗带来很大的困难。应重视耐药菌株监测，对临床合理用药有指导作用和实用价值。

简介：目的分析临床分离的20株多重耐药铜绿假单胞菌(MDR-PAE)中的β内酰胺类耐药基因和膜孔蛋白基因的存在状况。方法收集2009年2月至2010年4月南京医科大学第二附属医院住院患者中分离的MDR-PAE20株,采用PCR及序列分析方法对23种β内酰胺类抗生素耐药基因和膜孔蛋白基因进行检测及基因序列分析。结果20株MDR-PAE菌中检出TEM、PER、DHA、OXA-10群等4种β内酰胺酶基因,阳性率分别为25%、20%、5%、20%,6株细菌检出1种以上β内酰胺酶基因;膜孔蛋白编码基因OprD2均缺失(缺失率为100%)。结论本组20株MDR-PAEβ内酰胺类耐药基因的携带率较低,该菌对亚胺培南耐药与其膜孔蛋白编码基因OprD2缺失有关,而对其他抗菌药物的耐药可能与其外排泵的增强表达有关。

简介：目的分析铜绿假单胞菌耐药率与抗菌药物的使用强度的关系。方法回顾性查阅2009年4月至2011年9月，上海中山医院外科重症监护病房抗菌药物使用量（以antibioticsusedensity，AUD表示），及同期该病房送检的临床标本中检出的铜绿假单胞菌菌株的耐药率，分析两者之间的相关性。结果2009年4月至2011年9月该院外科重症监护病房送检的临床标本中所分离的铜绿假单胞菌共429株（不包括2周内重复菌株），标本来源大部分为痰标本（92．3％）。在2009年和2011年铜绿假单胞菌对各种抗菌药的耐药率分别为：亚胺培南9．1％和45．7％、头孢哌酮-舒巴坦18．2％和42．9％、哌拉西林-他唑巴坦22．7％和48．6％，上述结果显示该菌对临床常用抗菌药物的耐药率均有上升。多重耐药铜绿假单胞菌（27．3％和54．3％，P〈O．（）1）及泛耐药铜绿假单胞菌（4．6％和14．3％，P〈0．01）的检出率也明显升高。亚胺培南（AUD：2．32上升至4．96）、头孢哌酮-舒巴坦（AUD：0．16上升至7．56）、哌拉西林-他唑巴坦（AUD：2．19上升至4．76）的使用强度呈明显上升。铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率与亚胺培南的使用强度的相关系数为0．570，P值为0．067。亚胺培南的使用强度与多重耐药铜绿假单胞菌（P〈0．01，R=0．881）及泛耐药铜绿假单胞菌（P=0．031，R=0．647）的发生率的相关性有统计学意义。多重耐药铜绿假单胞菌的发生率也与哌拉西林-他唑巴坦的使用强度相关（P=0．038，R=0．630）。结论广谱抗菌药物的大量使用与铜绿假单胞菌耐药率的增加相关。

简介：目的了解ICU铜绿假单胞菌（Pa）感染的分子流行病学特征。方法对ICU临床分离的14株Pa菌株进行脉冲场凝胶电泳（PFGE）分型及耐药性检测。结果14株Pa分6个PFGE型别,分别命名为A、B、C、D、E和F型,其中A型为优势流行菌株共8株（57.1%）,B型2株（14.3%）,其余型别各有1株（分别占7.1%）。Pa对头孢他啶等15种抗菌药物产生不同程度的耐药性,其中8株A型Pa为泛耐药菌株。结论PFGE分型A型Pa菌株具有同源性,是本次ICU发生Pa医院感染的流行株,PFGE分型技术可以准确和快速地用于Pa引起医院感染溯源分型。

简介：目的探讨我国临床分离的碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌外排泵MexAB—OprM和外膜孔蛋白OprD2表达水平及其与碳青霉烯类抗生素耐药性之间的关系。方法收集我国15个省市28所医院临床分离的铜绿假单胞菌655株，琼脂稀释法测定该菌加入外排泵抑制剂羟基氰氯苯腙（CCCP）前后对亚胺培南和美罗培南的MIC；RTPCR检测外排泵MexAB-OprM和孔蛋白OprD2的表达水平；十二烷基硫酸钠-聚丙酰胺凝胶电泳（SD-PAGE）和蛋白印迹（Westernblot）检测外膜孔蛋白OprD2。结果收集到的655株铜绿假单胞菌菌株对亚胺培南和美罗培南敏感率分别为52．5％和59．2％，加入CCCP前后其对亚胺培南和美罗培南的敏感率无明显变化；52．0％（51／9B）美罗培南耐药株MexAB-OprM显著高表达（P〈0．05），43．7％（59／135）亚胺培南耐药株OprD2显著低表达（P〈0．05），14．8％（20／135）亚胺培南耐药株OprD2表达缺失；SDS-PAGE和Western—blot显示与标准菌株PAO1相比，OprD2表达水平减低菌株ZZ20显影减低，表达缺失菌株BJ1不显影。结论MexAB-OprM表达升高和OprD2表达降低甚至缺失是我国铜绿假单胞菌对美罗培南和亚胺培南耐药的重要机制。

简介：耐甲氧西林金葡菌（MRSA）和耐氟喹诺酮类铜绿假单胞菌的高分离率在一定程度上可能与氟喹诺酮类药物的过度使用有关。本文作者等研究了减少氟喹诺酮类药物使用与MRSA和氟喹诺酮类耐药铜绿假单胞菌的分离率的相关性。本研究共分为3个时段：干预前期（2000年1月-2005年8月），干预期（2005年9月-2006年3月）和干预后期（2006年3月2010年3月）。采用分段回归分析方法评估控制氟喹诺酮类药物的用量与细菌耐药性之间的关系。