简介：目的:建立高转移肝癌细胞株，研究其肿瘤干细胞生物学特征,为靶向人肝癌干细胞治疗提供有价值的细胞模型。方法:肝癌细胞系Bel7402接种裸鼠皮下，成瘤后，取小鼠肺部转移灶，通过机械分离法，获取肺部肝转移细胞，体外扩大培养后,再次接种裸鼠。如此反复接种裸鼠，获得稳定肺转移肝癌细胞株Bel7402-V13。采用无血清悬浮培养及PKH26染色确定Be17402-V13中肿瘤干细胞的存在。流式细胞术分析亲本Bel7402和Bel7402-V13中肿瘤干细胞标志物ESA的表达情况，分选Bel7402和Bel7402-V13中ESA+细胞并进行体外生物学特征研究及裸鼠致瘤实验。结果:建立高转移Bel7402-V13细胞株,Bel7402-V13细胞无血清悬浮培养7d后形成的细胞球体中存在单个PKH26阳性细胞。与Bel7402中ESA+细胞相比，流式分析显示干细胞标志物[3人比例高转移丑<；17402-V13显著提高5.67倍（17.6±0.4￥33.1±1.5)。3(；17402-V13中ESA+细胞具有更强的自我更新能力[成球率:（94.8±7.5)%vs(52.3±6.9)%，P<0.01]，侵袭能力提高1.51倍（397.7±79.4v262.0±40.1，P<0.01)，耐药能力也显著增强（IC5。：0.286v0.196，P<0.01)，ESA+细胞Bel7402-V13在裸鼠皮下接种2xl02个细胞3月即可致瘤（3/6)，而接种2xl02个ESA+细胞Bel7402细胞3月才能致瘤（1/6)。结论:获得高转移肝癌细胞株Be17402-V13，伴随ESA+细胞增加，其体内外功能显著增强，为肝癌干细胞的靶向治疗提供有价值的细胞模型。

简介：目的：探讨RASSF4在肺癌中的增殖和侵袭能力。方法：向肺癌细胞系H40和A54中导人RASSF4的cDNA质粒后，通过MTT、克隆形成实验、基质胶侵袭实验、流式细胞术等方法检测肺癌细胞的生长和侵袭能力。结果:RASSF4能够通过下调MMP2、MMP9和cyclinDl的表达，抑制肺癌细胞的侵袭、增殖及克隆形成能力。结论:RASSF4在肺癌细胞中通过抑制细胞生长及侵袭能力发挥重要的肿瘤抑制功能。

简介：人表皮生长因子受体2（humanepidermalgrowthfactorreceptor2,HER2/neu）是一种原癌基因,具有酪氨酸激酶活性,与肿瘤的发生发展密切相关。正常情况下HER2处于非激活状态,当受到体内外某些因素作用被激活后,可从多个途径影响肿瘤细胞的生物活动,如参与调控细胞增殖与细胞凋亡,促进肿瘤细胞生长;

简介：结直肠癌是常见恶性肿瘤之一,其典型症状包括大便习惯改变、腹痛、血便等。然而,结直肠癌侵犯到临近组织器官形成脓肿并作为首要症状临床较少见（[1-4]）。这些病例临床表现不典型,影像学难准确诊断,故常常延误诊治。本文报道2例结肠癌合并罕见脓肿的病例来总结探讨此类疾病的临床诊治经验。1临床资料1.1病例1患者为74岁女性,因＂右下腹反复疼痛2年余,加重1个月＂入院。

简介：Objective:TheexpressionofB-celllymphoma2(Bcl-2)seemstobeinfluencedbytheendocrineenvironment.NumerousreportsdemonstratethediverseexpressionofBcl-2familymembersundersexsteroidregulation.Withtheexceptionofestrogen-relatedtumors,androgen-relatedtumorshaveshowntheircharacteristicsinBcl-2expression.Inthisstudy,thestatusofBcl-2expressioninmalehepatocellularcarcinoma(HCC)patientswasexaminedtoverifythehighincidenceofHCCinmales.Methods:TumortissuemicroarraywasusedtoexamineBcl-2expressionlevelsin374HCCcasesincluding306malesand68females.Kaplan-Meiermethod,log-ranktest,andCoxproportionalhazardsmodelwereappliedtoinvestigatethepredictivevalueofBcl-2inHCCpatients.Results:ImmunohistochemistryanalysisshowedthatmalepatientswithhigherBcl-2levelshadsignificantlylongermediansurvivaltimeandrecurrencetimethanthosewithlowerlevels.However,nosignificantdifferencesinoutcomeswerefoundbetweendifferentBcl-2levelsinfemalepatients.Whenthemalepatientswerestratifiedintoseveralagepoints,thelevelofBcl-2expressionshowedpoorerpredictiveefficiencyinthe45–49and55–60agegroupsinandropause-agepatientscomparedwithotheragegroups.Bcl-2wasanindependentprognosticfactorforbothoverallsurvival(P<0.0001)andrecurrencetime(P=0.0001)inmalepatients.Afterexcludingmalepatientsinthe45–60agegroup,thepredictiveefficiencywasenhanced(n=147,OS,P=0.0002,TTR,P<0.0001).Conclusions:Bcl-2expressionisanindependentpredictorofsurvivalandrecurrenceinmaleHCC.Bcl-2levelsmayalsoberegulatedbyandrogensorandrogenreceptorsinmaleHCCpatients.Bcl-2levelschangeandexhibitpoorpredictiveefficiencywhenandrogenlevelsvarydramatically(andropauseage).

简介：目的比较线粒体融合蛋白-2（Mfn2）在乳腺癌、甲状腺癌和大肠癌组织及相应正常组织中的表达差异,探讨Mfn2与肿瘤发生的关系.方法选取经病理检查确诊的乳腺癌、甲状腺癌和大肠癌标本各20例,另取相应癌旁正常组织作为对照,采用免疫组织化学染色SABC法对Mfn2在不同组织中的表达水平进行测定和对比分析.结果免疫组化染色显示,在乳腺癌、甲状腺癌、大肠癌组织中表达水平均明显低于相应正常组织（P〈0.01）.结论Mfn2在乳腺癌、甲状腺癌和大肠癌组织中表达低于正常组织,Mfn2与这3种恶性肿瘤的发生、发展密切相关,可作为预测三种恶性肿瘤转移及其预后的参考指标.

简介：目的探讨3D打印技术在乳腺外科精确手术治疗中的意义。方法2例女性患者均是经查体、B超检查发现右侧乳腺有占位性病变,疑为恶性,要求手术切除。行多排CT胸部平扫、乳腺3.0TMR平扫＋增强检查获得CT和MRI的DICOM数据,输入计算机进行立体模拟建模,而后打印,据此精准定位后手术。结果3D重建模型能清晰地显示乳腺解剖结构、肿瘤所在的三维空间及周围血供。精准定位后完整切除肿瘤,最大限度地保全腺体组织,手术时间大为减少。结论3D打印技术应用于乳腺肿瘤的手术治疗,能够清晰显示出解剖结构,辨识肿瘤毗邻血管,避免遗漏病灶,更有效地辅助术前规划,对提升乳腺复杂手术的安全性、加快手术速度,提高手术精确性有益,在乳腺外科精确手术治疗方面具有极大的应用前景。

简介：目前，对进展期胃癌的根治性手术，尽管在淋巴结清扫范围、血管脉络化层面、网膜囊剥离、消化道重建等诸多方面存在争议。以D2为基础的根治性远端胃切除或全胃切除作为标准术式已被广泛接受。进展期远端胃癌为各部胃癌中最常见者，因此D2或D2＋根治性远端胃切除为最常见的胃癌根治术式。

简介：核内不均一核糖核蛋白A2/B1（hnRNPA2/B1）是核不均一核糖核蛋白家族的成员，其在细胞生命活动中起着非常重要的作用，主要参与pre-mRNA的可变剪接和转录调控、端粒维持及细胞增殖、迁移过程，在很多肿瘤中呈高表达的状态。本文就hnRNPA2/B1在肿瘤中的作用与机制及其所涉及的其他功能作一综述。

简介：目的探讨microRNA（miRNA）-196a2rs116149131基因多态性与胃癌易感性的关系。方法计算机检索PubMed、EMBASE、Cochranelibrary、中国知网、维普、万方及中国生物医学文献（CBD）等数据库中2016年3月1日之前关于miRNA-196a2rs116149131基因多态性与胃癌易感性的相关研究。按纳入与排除标准筛选文献、提取资料并评价纳入研究的质量后,采用Stata12.0软件进行Meta分析,计算合并OR值及其95%CI,并进行发表偏倚评估及敏感性分析。结果共纳入9篇文献,包括3992例患者和5699例对照。Meta分析结果显示,miRNA-196a2rs116149131基因多态性与胃癌易感性无明显相关性。按种族进行亚组分析结果显示,rs116149131基因多态性在杂合子模型中显著增加高加索人种胃癌患病风险（CTvs.TT：OR=1.93,95%CI：1.35-2.75,P〈0.05）;而在亚洲人种中未发现该位点多态性与胃癌易感性有关。根据对照组人群的来源进行亚组分析结果显示,在以医院和以人群为基础的研究中均未发现有与胃癌易感性相关的等位基因或者基因型。在T〈C亚组中,显性基因模型（CT＋CCvs.TT：OR=1.40,95%CI：1.10-1.77,P=0.005）、纯合子模型（CCvs.TT：OR=1.59,95%CI：1.22-2.06,P=0.001）和杂合子模型（CTvs.TT：OR=1.33,95%CI：1.04-1.70,P=0.025）中发现rs116149131基因多态性与胃癌患病风险存在关联性;在等位基因模型和隐性基因模型中并未发现关联性。在T〉C组未发现rs116149131多态性与胃癌患病风险存在关联性。结论miRNA-196a2rs116149131基因多态性与胃癌患病风险无关联性,但存在种族差异。

简介：目的:研究黄芪甲甙是否通过NG-Kepl/ARE信号通路发挥抗氧化作用来抑制骨髓间充质细胞的凋亡。方法：培养Witar大鼠BMSCs,设立正常组和黄芪甲甙干预组。采用实时荧光定量RT-PCR方法测定Nrf-2以及GSH的基因表达，Wetmblot检测其蛋白表达。结果:TUNEL和流式结果表明黄芪甲甙有抑制BMSC凋亡的作用,50^g/L组作用较强，与ADR组比较差异有显著性。增加浓度抑制凋亡的作用增加不明显,ADR+AST(100|JLg/L、50|JLg/L)两组，细胞凋亡率差异无显著性。黄芪甲甙作用后明显降低NmmR-NA的表达，与ADR模型组比较差异有统计学意义。各组分别与阿霉素模型组比较差异均有统计学意义。结论:黄芪甲甙可以通过Nf-2表达调控细胞凋亡，可能是其抑制神经细胞氧化应激、发挥保护作用的机制之一。

简介：曲妥珠单抗是人表皮生长因子受体-2（humanepidermalgrowthfactorreceptor-2，HER2）的特异性拮抗剂，是由美国食品和药物管理局（FoodandDrugAdmistration，FDA）批准的乳腺癌领域第一个分子靶向治疗药物。自1998年上市以来，已有10多年的临床应用史，目前已成为HER2阳性乳腺癌的基本治疗组成。与传统化疗药相比，曲妥珠单抗的安全性较高，但随着临床应用时间的延长，其引起的心脏毒性报道也越来越多。本文对曲妥珠单抗在HER2阳性乳腺癌患者新辅助治疗中的心脏毒性及防治进行综述。

简介：Objective:Panitumumabadministeredasmonotherapyincolorectalcancer(CRC)hasshownresponseanddiseasestabilizationratesofapproximately30%.Thecurrentstudyaimedtoevaluatetheprogression-freesurvival(PFS)andoverallsurvival(OS)ofpatientswithmetastaticcolorectalcancer(mCRC)treatedwithpanitumumabevery3weeksasasecondlinetreatment.Methods:Thisstudyisaretrospectiveanalysisof18patients,agedmorethan18years,withwild-typeKRASexon2mCRCtreatedwithpanitumumabasasecond-linesingleagentafterprogressiononfirst-linechemotherapy.Results:Themediannumberofcoursesreceivedwas10(range,4-29),andthemediandurationoftreatmentwas30weeks(range,12-96weeks).Afteramedianfollow-upperiodof13months,themedianPFSwas6months(range,4.3-7.7months)andthemedianOSwas11months(range,7.4-14.5months).ThemedianPFSwas4monthsforpatientswith2skintoxicityand6months(range,4.5-7.5months)forpatientswith≥grade2skinrash(P=0.05).ThemedianOSwas9months(range,6.4-11.5months)and14months(range,11.6-16.3months)forthetwogroupsofpatients(P=0.002).Conclusions:Panitumumabgivenevery3weeksiseffectiveandwelltoleratedinpatientswithadvancedCRCthatprogressedafterstandardchemotherapy.

简介：目的构建稳定过表达X连锁凋亡抑制蛋白相关因子1（X-linkedinhibitorofapoptosisassociatedfactor1,XAF1）基因的鼻咽癌放射抗拒CNE-2R细胞株。方法分别将携带XAF1基因感染复数（multiplicityofinfection,MOI）为50的慢病毒稀释液。MOI为100的慢病毒原液和MOI为100的慢病毒原液加入终浓度为5μg/mL的聚凝胺（polybrene）转染人鼻咽癌放射抗拒CNE-2R细胞株。通过倒置荧光显微镜观察细胞内荧光数量及强度评判转染效率,通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（real-timequantitativereversetranscriptionpolymerasechainreaction,qRT-PCR）和蛋白免疫印记法（westernblot）检测XAF1基因mRNA和蛋白的表达。结果慢病毒稀释液转染,约60%的细胞可观察到微弱荧光;慢病毒原液转染,约70%的细胞观察到较弱荧光;慢病毒原液加入5μg/mLpolybrene的转染效率较高,约90%的细胞观察到较强荧光。嘌呤霉素筛选上述转染效率最高的慢病毒原液加5μg/mLpolybrene组细胞,其成功将携带XAF1基因的慢病毒转入鼻咽癌放射抗拒CNE-2R细胞株。qRT-PCR和westernblot进一步证实细胞株稳定过表达XAF1基因。结论慢病毒加polybrene转染可成功构建稳定过表达XAF1基因的鼻咽癌放射抗拒CNE-2R细胞株。

简介：探讨核转录因子κB（NF-κB）、环氧化酶2（COX-2）、肝激酶基因B1（LKB1）在不同子宫内膜组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测60例正常子宫内膜、31例非典型增生子宫内膜和60例子宫内膜癌组织中NF-κB、COX-2、LKB1蛋白的表达，并分析其与子宫内膜癌临床病理特征的关系。结果NF-κB、COX-2、LKB1在子宫内膜癌组织、非典型增生子宫内膜组织和正常子宫内膜组织中的阳性表达率分别为63.3%、70.0%、35.0%，41.9%、64.5%、61.3%和35.0%、51.7%、93.3%，NF-κB、LKB1在3组间的表达差异有统计学意义（P＜0.05），而COX-2的表达差异无统计学意义（P＞0.05）。子宫内膜癌中NF-κB、COX-2、LKB1蛋白的阳性表达与病理类型、FIGO分期、淋巴结转移均无关（P＞0.05）。LKB1蛋白表达与肌层浸润深度和组织学分级相关（P＜0.05），NF-κB蛋白表达与组织学分级亦相关（P＜0.05）。结论NF-κB在子宫内膜癌组织中高表达、LKB1低表达，其表达可能与子宫内膜癌的发生发展有关。

简介：目的：检测信号分子JAK2／STAT3在食管鳞癌组织样本中的表达，并探讨成纤维细胞生长因子诱导14（Fn14）表达与JAK2／STAT3信号通路的相关性。方法采用免疫组织化学法检测118例食管癌组织及配对正常食管黏膜组织中Fn14、p-JAK2和p-STAT3蛋白的表达情况。分析Fn14与p-JAK2、p-STAT3蛋白表达的相关性及三者表达与食管鳞癌临床病理特征的关系。结果Fn14阳性表达主要定位于细胞膜和胞浆，p-JAK2、p-STAT3阳性表达主要定位于细胞质和胞核。Fn14、p-JAK2、p-STAT3在食管鳞癌中的阳性表达率分别为51．7％（61／118）、50．9％（60／118）、57．6％（68／118），均高于正常食管黏膜鳞状上皮组织的4．2％（5／118），差异有统计学意义（P＜0．05）。Fn14、p-JAK2及p-STAT3蛋白表达与分化程度、TNM分期有关（P＜0．05），而与性别、年龄均无关（P＞0．05）。Fn14与p-JAK2、p-STAT3在食管鳞癌不同分化程度组织中及不同TNM分期中均呈正相关（P＜0．05）。结论Fn14、p-JAK2、p-STAT3在食管鳞癌中高表达，可能与食管鳞癌的发生、发展有关。

简介：目的评价采用安全环锯技术经皮内镜下经椎间孔入路腰椎侧隐窝减压术治疗腰椎侧隐窝狭窄症的疗效及安全性。方法2011年8月至2013年8月,共96例符合纳入标准的腰椎侧隐窝狭窄症患者行经皮内镜下经椎间孔入路腰椎侧隐窝减压术,85例获2年随访,其中男36例,女49例;年龄46~78岁,平均56.7岁;14例L3~4单侧,1例L3~4双侧,49例L4~5单侧,3例L4~5双侧,12例L5~S1单侧,1例L5~S1双侧,3例L3~5单侧和2例L4~S1单侧,共减压95个狭窄侧隐窝;56例合并同节段腰椎间盘突出症,其中42例脱出型,14例游离型。术后第2天复查腰椎MRI及CT以评估减压的充分性。术后3个月、6个月、1年及2年随访,评估症状的缓解结果。腰痛及坐骨神经痛采用视觉模拟评分（visualanaloguescale,VAS）,腰椎功能评价采用Oswestry功能障碍指数（oswestrydisabilityindex,ODI）和改良MacNab评分。结果术前受累神经根功能障碍包括皮节感觉障碍56例（65.9%）、肌节肌力减弱25例（29.4%）和腱反射减弱14例（16.5%）。所有患者术后腰痛及坐骨神经痛明显缓解。3例L5~S1节段患者术后出现L5神经根支配区感觉减退,经中频脉冲理疗后1~2周缓解。术后MRI/CT显示减压充分。无术后感染、医源性神经根损伤和腰椎不稳定等并发症。2例术后突出椎间盘复发,但体质虚弱,未进一步翻修手术。85例全部获得完整随访数据,术后腰腿痛VAS及ODI均较术前显著降低,差异有统计学意义（P〈0.01）;术后2年随访MacNab评分29例优,48例良,6例因术后腰痛加重判定为可,2例术后椎间盘突出复发判定为差。术后受累神经根感觉功能及肌力明显恢复（P〈0.01）,但腱反射无明显改善（P=0.832）。结论采用安全环锯技术经皮内镜下经椎间孔入路腰椎侧隐窝减压术是治疗腰椎侧隐窝狭窄症的微创、高效、安全的手术方法。

简介：Objective:Apreviousstudydemonstratedthatnon-anthracycline-containingdocetaxelpluscyclophosphamide(TC)regimenwasinferiortodocetaxel,anthracyclineandcyclophosphamide(TAC)inneoadjuvanttreatmentoftriple-negativebreastcancer(TNBC)andhumanepidermalgrowthfactorreceptor-2-(HER2)-positivebreastcancerinashort-termfollow-up.Herein,long-termfollow-upsurvivaloutcomeshavebeeninvestigated.Methods:TNBCorHER2-positivepatientswererandomizedtoreceive6cyclesofTCorTACneoadjuvanttreatment.Theprimaryendpointwaspathologicalcompleteremission(pCR).Secondaryendpointsincludedclinicalresponserate,event-freesurvival(EFS),andoverallsurvival(OS).Results:Acohortof96patientsconsistedof45inTCand51inTACarm.Withamedianfollow-upperiodof53(range,8–76)months,thepatientsachievingpCRpostneoadjuvantchemotherapyexhibitedsuperiorEFSandOSthanpatientswithoutpCR(P<0.05).TACtreatmentresultedinconsistentlybetterEFSthanTCtreatment:theestimated5-yearEFSwas66.1%vs.29.8%(P=0.002).Moreover,theestimated5-yearOSwasalsoinfavorofTAC:88.4%vs.51.6%(P<0.001).Multivariableanalysisdemonstratedthatthetreatmentregimenwasanindependentprognosticfactor,andpatientstreatedwithTAChadasuperiorEFS[hazardratio(HR),0.48;95%confidenceinterval(95%CI),0.26–0.90;P=0.021]andOS(HR,0.20;95%CI,0.08–0.60;P=0.003).Conclusions:Theupdatedlong-termfollow-updatademonstratedasustainedbenefitinEFSandOSfromanthracycline-containingTACtreatment,indicatingthatanthracyclineisanessentialandeffectivedruginthisclinicaltrial.

简介：目的探讨靶向P2X7受体（P2X7R）的小发夹RNA（shRNA）对人鼻咽癌HONE1细胞增殖、凋亡及信号通路的影响。方法根据预实验结果优化shRNA转染条件,将2条靶向抑制P2X7R基因的shRNA载体片段（shRNA-1、shRNA-2）分别高效转染HONE1细胞,同时设转染无义序列（Blank）的空转染组及不进行任何处理的对照组。分别于转染24、48、72、96h后采用实时荧光定量PCR（QPCR）检测P2X7R表达水平以筛选抑制率高的转染载体用于后续试验。四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测各组转染24、48、72、96h后的增殖抑制率,流式细胞术检测各组转染48、96h后的细胞凋亡率,QPCR法检测各组凋亡相关基因的mRNA水平,Westernblotting检测各组转染96h后磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）通路和Wnt/β-连接素（β-catenin）通路中的蛋白变化。结果转染组的P2X7RmRNA水平均低于空转染组和对照组（P〈0.05）,且选择干扰效率高的shRNA-1载体进行功能学研究;与空转染组和对照组比较,shRNA-1转染组的HONE1细胞增殖抑制率、凋亡率及促凋亡基因Bid、Bax的mRNA水平均升高,而抗凋亡基因Bcl-2、Mcl-1的mRNA水平均降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;与对照组比较,shRNA-1转染组处理后PI3K/Akt通路中PTEN蛋白水平均升高,而p-Akt水平均降低（P〈0.05）,Wnt/β-catenin通路中p-β-catenin、CyclinD1和C-myc水平均降低（P〈0.05）。结论通过shRNA抑制P2X7R基因表达可抑制鼻咽癌细胞增殖并诱导凋亡,可能与抑制PI3K/Akt、Wnt/β-catenin通路有关,对鼻咽癌的防治有一定价值。

简介：目的腹腔镜根治性远端胃切除（radicallaparoscopicdistalgastrectomy,LG）＋D2淋巴结清扫术用于治疗进展期胃癌其安全性和有效性仍存在争议。本研究设计了一个前瞻性随机对照研究来对比腹腔镜手术和传统开腹手术行根治性远端胃切除术＋D2淋巴结清扫术在治疗进展期胃癌的安全性和疗效。研究对象和方法自2012年9月至2014年12月,1056例临床分期为T（2-4a）N0-3M0的胃癌患者被纳入本研究。患者被随机分为腹腔镜根治性远端胃切除术＋D2淋巴清扫组（LG组）（n=528）和开腹远端胃切除术（opengastrectomy,OG）＋D2淋巴清扫组（OG组）（n=528）。共有15位来自中国14个研究中心的经验丰富的外科医生参与此次研究。根据意向性治疗分析原则比较LG组（n=519）和OG组（n=520）手术后30天内的并发症发生率和死亡率。术后并发症严重程度分级根据Clavien-Dindo分级方法。结果LG组和OG组患者的D2淋巴结清扫术的合格率相似（99.4%vs.99.6%;P=0.845）。术后并发症发生率在LG组为15.2%,OG组为12.9%,统计学无明显差异（相差2.3%,95%CI：-1.9-6.6,P=0.285）。死亡率在LG组为0.4%,而OG组无一例死亡（相差0.4%,95%CI：-0.4-1.4,P=0.249）。两组并发症的严重程度分布相似（P=0.314）。结论有经验的外科医生可以在进展期胃癌患者上安全开展腹腔镜下根治性远端胃切除术＋D2淋巴结清扫。