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6 个结果
  • 简介:目的构建大鼠神经营养因子3(NT-3)基因核表达载体并观察其在真核细胞内的表达情况。方法采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从大鼠脑组织总RNA中扩增NT-3基因cDNA序列,将其克隆到核表达载体pcDNA3中,经酶切鉴定和序列分析后,以阳离子脂质体Li-pofectamine2000介导转染L929细胞,应用免疫细胞化学和westernblot鉴定NT-3在细胞内的表达。结果RT-PCR产物为822bp的特异片段,重组质粒pcDNA3/NT-3酶切后产生822bp和5.2kb的片段,DNA测序证实822bp片段的碱基序列与大鼠NT-3基因序列完全一致,成功构建了pcDNA3/NT-3重组质粒。将其转染真核细胞后,免疫细胞化学、westernblot结果表明NT-3能在真核细胞中正确表达。结论成功构建了重组核表达质粒载体pcDNA3/NT-3,为后续的研究奠定基础。

  • 标签: 神经营养因子3 真核表达 重组质粒 转染
  • 简介:目的构建人源性Notch1胞内段(NICD)核表达载体pIRES2-EGFP—NICD,并观察其在真核细胞中的表达。方法通过反转录-聚合酶链反应(RT—PCR)从人脑胶质母细胞瘤细胞系U251细胞中获得编码NICD的cDNA,定向克隆至核表达载体pIRES2-EGFP;经酶切和测序鉴定正确后,应用脂质体法转染HeLa细胞,并通过蛋白免疫印迹法检测细胞内NICD的表达。结果构建了核表达载体pIRES2-EGFP—NICD,将其转染HeLa细胞72h后,蛋白免疫印迹法检测到细胞内NICD的表达显著增高。结论成功构建了核表达载体pIRES2-EGFP—NICD,为研究Notch信号通路在人脑胶质细胞瘤发生发展中的作用机制奠定了基础。

  • 标签: NOTCH信号 胶质细胞瘤 真核表达
  • 简介:目的构建arhgap39基因核过表达载体并初步研究arhgap39蛋白表达的相关问题。方法提取小鼠海马组织总RNA,逆转录合成cDNA,根据GeneBank中基因信息设计引物,高保真PCR扩增arhgap39基因的编码区,随后将其转移到核载体上,转染NG-108细胞并观察其在细胞内的表达情况。结果经酶切和测序鉴定表明成功构建arhgap39基因的相关核过表达载体;将其转染NG-108细胞,免疫印迹试验证实arhgap39成功过表达,arhgap39的分子量约为140kD。结论我们的实验结果确认了arhgap39蛋白的分子量,并对其可能存在的存在形式做了验证性研究,可以为进一步的研究提供理论基础和研究工具。

  • 标签: arhgap39基因 过表达载体 剪切体 分子量 小鼠
  • 简介:对国内外护理专业核心能力的概念及内涵进行分析,综述了护理教学领域在教学模式、课程设置、教学策略与评价方法等不同层面“以核心能力为”进行的研究与实践。

  • 标签: 护理专业 核心能力 护理教学
  • 简介:护理管理是医院管理的重要组成部分。对一个医院来说,护理只有与医疗、检验等其他专业协调发展才能全面提高医疗服务质量。院长是否能够把护理工作放在一个重要的位置,以及院长对护理工作的管理思路直接影响医院护理工作质量和护理专业的发展。在5·12护士节来临之际,本刊编辑部精心组织了一组文章,献给广大的护理同仁。其中有医院院长撰写的文章,也有本刊记者的独家访谈。内容涉及护理管理理念、护理学科建设、护理管理体制、护士人文关怀等诸多方面。希望帮助广大护理管理人员、医院管理人员拓宽管理思路,提高管理水平。

  • 标签: 护理管理体制 市人民医院 医院院长 医院管理人员 护理工作质量 医疗服务质量
  • 简介:目的:指南旨在为急性自发性脑出血的诊断和治疗提供最新的综合性推荐意见。方法:通过Medline正式检索截止2006年8月的相关文献,并将撰写委员会已知相关问题的其他论文作为补充,用证据表合并资料。采用美国心脏协会卒中委员会的证据水平分级标准对每项推荐意见进行分级。由5位同行评议专家和卒中委员会领导委员会成员对指南草案进行发表前审阅。预期指南在3年内完全更新。结果:本文陈述了脑出血的诊断、动脉血压和颅内压增高的处理、脑出血内科并发症的治疗以及复发性脑出血的预防等方面的循证指南。对重组Ⅶ因子延缓早期出血的近期试验进行了讨论。对自发性脑出血治疗的各种外科手术方法提出了推荐意见。最后,对脑出血患者的撤销治疗和临终问题进行了分析。

  • 标签: AHA科学声明 脑出血 治疗