简介:Fungalpathogenscausingpoplarcankerdiseasesarecosmopolitaninspecies,andhaveawiderangeofhosts.Thesepathogenshavediverseanamorphsandtheirmorphologyoverlapswitheachother;Theirteleomorphsarehardlydiscoveredinnature.Furthermore,theidentificationofthesepathogensisusuallylimitedbythegeography,hostandtaxonomicknowledge.Therefore,aculture-independentmethodusedtoidentifydeterminepathogensisexpectedtobedevelopedforfielddiagnostics.Throughamplifying,sequencingandanalyzingmultiplexnucleicacidtemplatesandgeneticmarkedtargetsequences,amultiplexPCRtechniquehasbeenestablishedandusedtodirectlydetectvariousenvironmentalsamples.Inthisstudy,fourpathogenstrainsandenvironmentalsampleswereamplifiedusingfungaluniversalprimersITS1/ITS4andEF1-728F/EF1-986RbygeneralPCRandmultiplexPCR.Theampliconsweresequenced,andthenalignedinGenBank.TheresultshowedthatthemultiplexPCRwasabletosuccessfullyamplifythetargetgeneandidentifythepathogensfromenvironmentalsamplesintheconditionofanannealingtemperatureof55.6℃andprimersfinalconcentrationof0.2μmol·L-1.ThemultiplexPCRcouldamplifythetargetattheconcentrationlevelofapproximatelylngofgenomicDNA.ThismethodwouldprovideausefultoolfortheidentificationofcankerpathogensbythemultiplexPCRandthehigh-throughputDNAmicroarraydetectionofenvironmentalsamples.
简介:一个直角的图案被用来作为模板优化SSR-PCR扩大系统usingPanax人参genomicDNA。五个因素(DNA模板,TaqDNApolymerase,Mg~(2+),教材,和dNTP)和退火的温度的四个层次在thissystem独立被测试了。结果证明反应效率被这些因素影响。放大aginsengSSR地点的基于的在结果,一个马厩,生产、可再现的PCR系统和骑车的节目被获得:包含1.0UTaqDNA聚合酶的20μL系统,2.0mmol·L~(-1)Mg~(2+),0.2mmol·L~(-1)dNTPs,0.3μmol·L~(-1)SSR教材,60ng·μL~(-1)DNA模板,用94的一个程序表现了为5的℃min,为30s的94℃,为30s在56.3℃退火,为1min的72℃,37个周期,为7min在72℃完成,并且在4℃存储。
简介:AllfactorsaffectingthePCRsysteminPinusmassonianaLambwereinvestigatedonebyone.TheresultsshowthattheoptimumPCRsystemofEST-SSRwere:2μL10×Buffer(Mg2+Free),30ngtemplateDNA,0.1875mmol/LdNTPs,3.75mmol/LMg2+,8pmolprimerpair,1.0UTaqDNApoly-meraseintotal20μLreactionsystem.Finally,atotalof11isolatesofP.massonianawasusedfortestingthestabilityofthePCRamplification.TheresultsprovethattheoptimumPCRsystemwasstable,reliable,highlyrepetitive.
简介:寒冷的冬日,爱好养花养草的你还在担心它们怎么过冬吗?那么现在不妨来看看下面这个产品——迷你型家庭温室。
简介:武汉钢铁(集团)公司绿化工作历经“六五”期间打基础,“七五”期间大发展,“八五”期间上台阶,“九五”期间创水平等四个重要阶段,先后进行了大力抓好基础绿化、实现黄土不露天目标、向园林化方向发展三大战役。进入21世纪以来,武钢掀起了更大规模的“拆房建绿”植树造林活动。武钢绿化在新世纪头两年实现了新的大跨越。拆房建绿迈大步武钢绿化历经20多年的发展,可绿化的空地已经所剩不多。武钢领导盯住多年遗留下来的各类有碍厂容观瞻的房屋及闲置房,从2001年开始实施“大步伐、大手笔、大气魄、大色块”绿化战略,开展大规模拆房建绿、填空补缺活动。2002年公司进一步加大了拆房建绿工作力度,提出更高的要求:不管是前方还是后方,凡是有碍厂容观瞻的建筑物、闲置房一律拆房建绿;凡是有空地的地方,一律进行植树绿化。科技广场是公司拆房建绿的重头戏,经过二年的建设,共完成三期施工任务,开辟绿地5万平方米,栽植各类乔灌木29420株,绿篱160多延长米,草坪约4.7万平方米,形成了乔灌树木搭配错落有致,四季花卉点缀其间,一年四季草坪翠绿的树木花卉博览园。一炼钢厂在32号路两侧拆房建绿,共开辟空地4.2万平方米,建成了钢厂最大的防护林带。两年内,公司...