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  • 简介:应用酵母双杂交技术构建重组人雌激素受体基因酵母,用以检测类,抗雌激素化合物和环境样品的类,抗雌激素活性.采用多聚酶链反应(PCR)法扩增人雌激素受体(hER)基因,构建诱饵质粒pGBKT7-ERLBD;分别提取并纯化两种含有ER共激活因子基因的靶质粒pGADg24-GRIP1和pGAD424-SRC1;诱饵质粒和靶质粒同时转染酵母细胞Y187,于营养缺陷型培养基(SD/-Trp/-Leu)上筛选阳性菌落,分别构建两种ER双杂交酵母ER+GRIP1和ER+SRC1.考察双杂交酵母与不同激素:17β-雌二醇(E2)、二氢睾酮(DHT)、孕酮(PG)以及三碘甲状腺原氨酸(T3)的结合情况,并考察了雌激素受体拮抗剂4-羟基他莫昔芬(4-OHT)与酵母的相互作用.结果表明:ER+GRIP1和ER+SRC1酵母均能够专一性的和E2结合,并存在显著的剂量-效应关系,E2对ER+GRIP1和ER+SRC1酵母β-半乳糖苷酶活性诱导的EC50值分别为7.3×10^-11mol·L^-1和1.5×10^-10mol·L^-1,其中ER+GRIP1酵母细胞诱导产生的酶活性值明显高于ER+SRC1-酵母细胞.4-OHT能够抑制E2诱导ER+GRIP1酵母细胞产生的酶活性,并存在显著的剂量-效应关系,IC50值为1.0×10^-7mol·L^-1.表明重组人雌激素受体基因酵母可以用于检测化合物和环境样品的类,抗雌激素活性.

  • 标签: 酵母双杂交 人雌激素受体 重组基因酵母 抗雌激素活性
  • 简介:微量元素不仅是人和动物必需的营养元素,也是植物生长发育不可缺少的元素。酸盐在水体中溶解度高于其他环境介质,导致水生生物对无机酸盐)有更高的利用率。藻类能吸收无机,可将无机有效地转化为有机形态。藻体内的主要以蛋白、核酸、多糖等生物大分子以及代半胱氨酸和代蛋氨酸等生物小分子有机化合物存在。在水生生态系统中,藻类是的主要吸收者。富藻类通过食物链将传递至浮游动物、贝和鱼等动物体内,能提高其抗氧化能力,从而导致其对重金属耐受性增强。本文综述了藻类在自然界生物有机化中的地位和作用,藻类对的富集方式及代谢途径,在藻类中的生物学效应,富藻类的开发利用现状及今后的发展方向,较全面地综述了富藻类研究进展。

  • 标签: 藻类 富硒
  • 简介:(Se)是生物必需的一种微量元素,其生物学功能主要是以蛋白的形式表现的,植物蛋白具有抗氧化、抗癌、提高免疫力等功能.综述了在植物中的存在形态、蛋白的分类及提取方法,并提出今后的研究方向.参21.

  • 标签: 硒蛋白 提取 植物
  • 简介:为提高发酵啤酒糟高蛋白产量.以一次发酵的黑曲霉和木霉双菌发酵的啤酒糟为原料.粗蛋白含量为指标.对饲料酵母和枯草芽孢杆菌进行二次混菌发酵.其对应的最佳条件为温度33.73℃.接种量16.51%.酵母菌和枯草芽孢杆菌接种量比为5∶1.添加硫酸铵5.00%.尿素添加量2..00%.发酵时间4d.理论粗蛋白质含量43.38%.表明通过二次混菌发酵能显著提高啤酒糟粗蛋白含量.图1.表6.参12.

  • 标签: 啤酒糟 混菌 二次发酵 响应面分析 高蛋白