简介:多重连接探针扩增技术(multiplexligation-dependentprobeamplification,MLPA)是一种高通量、针对待测核酸中靶序列进行定性和定量分析的新技术。该技术仅需20ng/μlDNA,即可通过简单的杂合、连接、PCR扩增及电泳步骤,在同一反应管中对四十多个不同的靶基因进行检测和定量分析。这一技术最先于2002年由荷兰的Schouten等[1]报道。如今短短几年中,该技术已被欧洲、亚洲等几十个实验室采用。迄今为止,已有150多篇不同领域采用该技术方法的报道在重要刊物上发表。
简介:摘要目的探讨黏附连接蛋白E-cadherin、β-catenin及紧密连接蛋白Claudin-2与腹泻型肠易激综合征(IBS-D)患者腹痛及症状持续时间之间的关系。方法根据罗马Ⅲ标准,收集26例IBS-D患者和26例健康对照的回盲部组织标本,记录肠易激综合征(IBS)症状持续时间、腹痛评分及每周排便的次数。20只SD大鼠随机分为两组,模型组和对照组各10只,采用结直肠扩张联合束缚应激的方法构建内脏高敏感大鼠模型,采用腹部收缩反射(AWR)评估大鼠敏感性,记录造模成功后1 h内大鼠排便颗粒数。分别采用蛋白印迹和免疫荧光法检测E-cadherin、β-catenin及Claudin-2的表达和分布,用透射电镜观察细胞间隙改变。结果IBS-D患者肠黏膜E-cadherin、β-catenin蛋白表达明显低于健康对照组(P=0.015和P=0.005),而Claudin-2蛋白表达明显高于健康对照组(P=0.000);免疫荧光观察和透射电镜可见IBS-D患者细胞间紧密连接和黏附连接结构破坏;E-cadherin、β-catenin低表达与IBS-D的腹痛评分呈负相关(分别为r=-0.463,P=0.017和r=-0.407,P=0.039),β-catenin低表达与IBS-D腹痛持续时间呈负相关(r=-0.458,P=0.019)。内脏高敏感大鼠肠黏膜E-cadherin、β-catenin蛋白表达明显低于对照组(P=0.004和P=0.003),而Claudin-2蛋白表达明显高于对照组(P=0.008);E-cadherin、β-catenin低表达与IBS大鼠的内脏高敏感呈负相关(r=-0.639,P=0.047和r=-0.888,P=0.001)。结论IBS-D患者和内脏高敏感大鼠的回盲部黏附连接和紧密连接的微观结构和蛋白表达发生改变,E-cadherin、β-catenin蛋白表达降低,其与IBS-D患者腹痛评分相关,和大鼠内脏高敏感相关,β-catenin更与IBS-D患者腹痛持续时间相关。黏附连接蛋白E-cadherin、β-catenin改变可能在IBS内脏高敏感及肠黏膜屏障障碍中发挥重要作用。
简介:摘要 : 实验动物是个复杂的有机体,个体间存在差异,不像物理化学实验能够精细定量,实验过程中有很多关键要素需要控制。对于胰岛素生物活性检测和效价检测除了饲养环境因素的控制、动物质量的选择、样品的精确稀释、人员操作的准确规范外,实验的一些关键时间点也必须控制好。
简介:摘要目的探讨肾盂输尿管连接部梗阻(UPJO)的手术治疗方法与效果。方法报告经手术治疗24例肾盂输尿管连接部梗阻患者的临床资料。肾盂输尿管连接部狭窄引起梗阻15例,纤维索带压迫1例,输尿管肾盂高位连接2例,异位血管压迫6例,行Anderson-Hynes离断式肾盂成形术20例,肾盂Y-V成形术1例,纤维条索松解术1例,异位血管切断肾盂复位术1例,肾切除1例。结果22例术后随访3—36个月,21例痊愈,1例发生再次狭窄,二次行肾盂成形术后痊愈。结论Anderson-Hynes离断式肾盂成形术是治疗肾盂输尿管连接部梗阻的主要方法。
简介:【摘要】在临床工作中,ERCP患者术后需要时常更换引流袋,鼻胆管管径小,常规的一次性引流袋接头粗大,无法满足鼻胆管连接的要求,通常是将一次性针管拆分开来,将针筒作为连接媒介,针筒连接的部分需要使用胶布粘捏,更换引流袋时需要将胶布撕扯下来。而这种连接方式存在诸多漏洞,胶布连接不可靠引流液容易从胶布连接处发生泄漏,事后撕扯胶布时胶布的粘液不易去除干净容易沾染污垢,从而导致连接管被污染,且在插入鼻胆管时操作过于繁琐,不方便临床使用。为此,我们设计制作了一种鼻胆管连接器来很好的解决了以上问题。该连接器包括:引流接头和连接装置,能够避免使用胶布粘贴连接管导致连接管发生泄漏和污染的情况,引流接头与连接装置的可拆卸连接以及收缩装置的设计,使得本实用新型可快速更换鼻胆管引流袋,使用方便。