简介:目的观察重组腺病毒载体Ad5-hOPG-EGFP转染的Beagle犬牙周膜细胞(PDLCs)体内和体外的骨化能力.方法将体外构建的携带人骨保护素(humanosteoprotegerin,hOPG)基因的腺病毒载体Ad5-hOPG-EGFP转染Beagle犬PDLCs,通过体外VonKossa染色实验、实时荧光定量PCR检测成骨指标的表达情况、酶联免疫检测RANKUL/OPG的值及裸鼠体内胶原膜成骨实验比较转染组和对照组的成骨能力.结果组织学和形态学结果显示,转染了重组腺病毒Ad5-hOPG-EGFP的Beagle犬PDLCs形成的矿化结节数目多且体积大、深染.转染组中犬碱性磷酸酶(alkalinephosphates,ALP)、骨钙素(osteocalcin,OC)、骨涎蛋白(bonesialoprotein,BSP)基因相对表达水平均高于空载体组和空白对照组(P<0.05).转染组中犬RANKL/OPG的值下降趋势最为明显.裸鼠体内实验中转染组胶原膜也体现出较好的成骨能力.结论重组腺病毒介导的hOPG基因可以促进PDLCs成骨.
简介:摘要目的以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因,观察干细胞生长情况及两者间生物相容性。方法WST-1法检测rMSCs增殖效应,Westernblot法检测hBDNF蛋白的表达。结果CD34、CD45、CD29、CD90阳性细胞比率分别为0.79%、6.8%、98.9%、99.9%。结论Ad5-hBDNF-EGFP能成功转染接种在水凝胶上的rMSCs,两者间具有良好的生物组织相容性。