简介:丝氨酸乙酰转移酶(serineacetyltransferase,SAT)是甲硫氨酸和半胱氨酸合成途径的关键酶,利用该基因提高作物中甲硫氨酸水平具有广阔的应用前景。为了研究拟南芥SAT1(ArabidopsisthalianaSAT1)基因的蛋白表达情况及相关功能,构建了带有His标签的AtSAT1基因原核表达载体pET-30b(+)-SAT1-His(6)。将其导入大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,经固定化金属离子亲和层析(IMAC)纯化获得了抗原蛋白SAT1-His(6)。该抗原蛋白经免疫兔子,成功制备了具有较高特异性和灵敏性的SAT1蛋白多克隆抗体。Westernblotting表明,该抗体可用来检测转AtSAT1基因的转基因玉米株系中SAT1蛋白的积累量,为后期对该基因开展进一步深入研究具有重要意义。
简介:为了探究LEC1基因对棉花体细胞胚胎发生的影响,本研究利用地塞米松(DEX)诱导型表达载体pINDEX3,通过农杆菌分别介导大叶落地生根短缺的LEC1(KdLEC1)在新海15号下胚轴以及棉花的两个LEC1基因家族(GbLEC1A,GbLEC1B)和KdLEC1在新陆早33号胚性愈伤组织中的遗传转化,体胚诱导及再生过程,获得KdLEC1、GbLEC1A、GbLEC1B转基因植株。同时以KdLEC1转基因新海15号胚性愈伤组织系为试材,分别进行DEX和无DEX的悬浮诱导处理,实时定量PCR分析KdLEC1的相对表达量。研究表明:经为期13个月的植株再生过程和PCR鉴定,获得了两棵KdLEC1转基因新海15再生植株;分别获得了一棵PCR鉴定正确的KdLEC1、GbLEC1A、GbLEC1B转基因新陆早33再生植株,其再生周期约为10个月。实时定量PCR分析显示,KdLEC1的相对表达量在2.5倍和23倍之间波动,表明pINDEX3可以在不同水平诱导外源基因KdLEC1的表达。本研究旨在为LEC1在棉花体胚发生过程中的功能研究提供良好的材料,从而为棉花种质创新提供理论指导。
简介:长链酰基辅酶A合成酶(longchainacyl-CoAsynthetase,LACS)是油脂代谢的重要催化酶。本研究采用RT-PCR技术,从花生(ArachishypogaeaL.)克隆到LACS1(GenBank登录号:KT932703),分析了该基因的结构组成,预测编码氨基酸与其他植物的同源性,采用实时Real-TimePCR技术对LACS1的组织表达进行研究。结果显示,花生LACS1基因全长2219bp,包含1992bp的ORF,编码663个氨基酸,有22个外显子和21个内含子。氨基酸序列比对显示花生LACS1有真核生物酰基辅酶A合成酶保守结构域,并含有保守的激活位点和绑定位点。同源性分析发现花生LACS1与大豆、野生大豆、鹰嘴豆、绿豆、甜橙等15种物种的氨基酸序列同源性在68%~86%之间,进化树分析显示,花生LACS1与鹰嘴豆等豆科植物亲缘较近。实时荧光PCR分析表明,花生LACS1在花生根、茎、叶、针、仁和花等组织均有表达,但差异明显,其中花的表达量最高,表达量大小顺序为花>针>叶>茎>根>仁,地上组织表达量高于地下组织。花生LACS1可能参与花生角质层的脂质合成。本研究结果为揭示植物脂肪酸代谢提供理论依据。
简介:Rice(Oryzasativa)issensitivetosalinity,butthesalttoleranceleveldiffersamongcultivars,whichmightresultfromnaturalvariationsinthegenesthatareresponsibleforsalttolerance.High-affinitypotassiumtransporter(HKTs)hasbeenproventobeinvolvedinsalttoleranceinplants.Therefore,wescreenedfornaturalnucleotidepolymorphisminthecodingsequenceofOsHKT1,whichencodestheHKTproteinineightVietnamesericecultivarsdifferinginsalttolerancelevel.Intotal,sevennucleotidesubstitutionsincodingsequenceofOsHKT1werefound,includingtwonon-synonymousandfivesynonymoussubstitutions.Furtheranalysisrevealedthatthesetwonon-synonymousnucleotidesubstitutions(G50TandT1209A)causedchangesinaminoacids(Gly17ValandAsp403Glu)atsignalpeptideandtheloopofthesixthtransmembranedomain,respectively.Toassessthepotentialeffectofthesesubstitutionsontheproteinfunction,the3DstructureofHKTproteinvariantswasmodelledbyusingPHYRE2webserver.Theresultsshowedthatnodifferencewasobservedwhencomparedthosepredicted3DstructureofHKTproteinvariantswitheachother.Inaddition,thecodonbiasofsynonymoussubstitutionscannotclearlyshowcorrelationwithsalttolerancelevel.Itmightbeinterestingtofurtherinvestigatethefunctionalrolesofdetectednon-synonymoussubstitutionsasitmightcorrelatetosalttoleranceinrice.
简介:晋超甜1号是山西省农业科学院玉米研究所2006年以TY32-111为母本、以TY37/7710为父本选育而成的超甜玉米新品种,2011年通过山西省农作物品种审定委员会审定,2014年通过国家农作物品种审定委员会审定。通过介绍该品种的特征特性,及其优质高效栽培技术,同时分析2009—2010年的生产试验、田间鉴定、抗病鉴定、品质评定。结果发现,该品种生育期较短、抗逆性好、品质优良、稳产高效,适宜在我国玉米种植区种植,且可以单种或复(套)种,春、夏、冬皆可播种,是目前鲜食玉米青穗直接出售或速冻、真空包装保鲜加工的理想品种,种植密度为45000~48000株/hm^2。
简介:测试了木薯加工废弃物生物发酵转化有机肥产品ZH-1、ZH-2在白菜薹上的应用效果设有机肥ZH-1(处理1)、有机肥ZH-2(处理2),并以高浓度复合肥(CK-1)、不施肥(CK-2)作为对照处理,通过田间栽培试验研究施用有机肥ZH-1和ZH-2对白菜薹经济性状、品质、产量及经济效益的影响。结果表明,3个施肥处理均起到促进白菜薹生长的效果,各指标测定结果显著或极显著优于不施肥处理(CK-2)。在施肥处理中,有机肥ZH-1和ZH-2处理白菜薹单位产量比同等养分条件下施用高浓度复合肥(CK-1)分别低6.92%和4.44%,但2个有机肥处理白菜薹的品质更好,商品质量更高,经济效益比施用高浓度复合肥(CK-1)分别提高32.32%和38.55%,其中有机肥ZH-2的综合施用效果尤为突出。因此,新型有机肥料产品ZH-1和ZH-2值得在白菜薹生产上应用推广。