简介:以硝酸纤维膜为固相载体,以猪瘟病毒为抗原,确定了Dot—PPA—ELISA检测猪瘟抗体的最佳反应条件。试验表明,猪瘟兔化弱毒经仔猪睾丸原代细胞培养纯化,以0.05mol/LpH9.5CBS缓冲液稀释至浓度为0.98~1.15mg/mL制备诊检抗原膜片;采用4%蛋清蛋白0.05mol/LpH9.5CBS封闭;检测反应稀释液应用0.01MPPBST(含0.1%PEG、0.05Tween-20),酶结合物工作浓度以1:30,底物选取4-氯1-萘酚等为检测猪瘟血清抗体的最佳反应条件。重复试验证明了其检测稳定性好。交叉试验、阻断试验证明了其特异性强.
简介:猪瘟(CSF)是由猪瘟病毒(CSFV)引起的高度接触性、致死性传染病,给养猪业造成巨大的经济损失。非典型、温和型猪瘟逐渐成为本病的主要流行形式。本文对猪瘟的流行病学、感染特点以及抗体变化进行了分析论述,以期为猪瘟的防控提供帮助。1CSF的流行情况根据目前各大洲和地区的生猪饲养量、猪与猪肉制品的国际贸易量以及该病的流行程度,可将猪瘟分为三大流行区,即中南美洲、东南亚和欧洲。中南美洲属疫情稳定区,疫病流行逐年减少;东南亚是老疫区,由于各种原因对CSF控制措施不力,疫情较重:欧洲属流行活跃区,特别是中西欧近年来仍然是欧洲猪瘟流行的中心。在东南亚国家中,猪瘟流行最严重的是中国、印尼、越南和菲律宾这4个国家,主要原因是这些地区防疫制度不健全和管理水平的参差不齐。
简介:以三氯硫磷为起始原料,经三步反应合成得到毒死蜱半抗原O-乙基O-(3,5,6-三氯-2-吡啶基)N-(3-羧丙基)硫逐磷酸胺(简称CHBu),此半抗原分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)用碳二亚胺法和混合酸酐法通过偶联反应得到免疫抗原和包被抗原,其结合比分别为14.6:1和6.2:1。用所得的免疫原免疫兔子获得了高效价(抗血清:2.56×10^4;冻干粉:2.56×10^6)、高亲和性、特异性好的多克隆抗体。交叉反应试验表明,该抗体与毒死蜱各结构类似物交叉反应率均小于4%;亲和性试验表明,在1-500ng/mL浓度范围内,抑制率与浓度呈线性关系,线性回归方程为Y=23.503lg(x)+28.556,r=0.9919,抑制中浓度I50=8.2ng/mL,最低检测限为1.0ng/mL。