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  • 简介:即时检测(POCT)是临床诊断领域新分支,与传统检测方法相比,具有操作简便,标本量小,快速得到结果等优势.我国糖尿病、心血管疾病等慢性病患者基数大,国民自我保健意识正在不断增强,因此未来POCT市场需求相当可观.但是由于我国POCT产业起步较晚,技术相对落后,相关法律制度不够健全,想要在国内乃至全球POCT市场占有一席之地,仍有许多问题亟待解决.

  • 标签: POCT 即时检测 社区卫生机构 家庭化检测
  • 简介:离子液体(ionicliquids)是在室温或室温附近完全由离子组成有机液体物质。它作为一类新型绿色介质,近年来获得了突飞猛进发展。推动离子液体研究迅速发展直接动力来源于国际社会对清洁生产、环境保护、循环经济强烈愿望,以及离子液体本身探索价值和应用潜力。

  • 标签: 离子液体 化学分析 绿色化学 储能材料
  • 简介:目的利用不同造血干细胞移植方式,探讨Exo-1基因缺失对端粒酶基因敲除小鼠造血干细胞植入效率影响。方法以CD45.1小鼠骨髓细胞或骨髓造血干细胞为供体,以端粒酶基因敲除小鼠或Exo-1基因和端粒酶基因双敲除小鼠为受体,在给予不同剂量X线照射或不照射情况下,重复进行静脉注射全骨髓细胞或分选骨髓造血干细胞(c-kit^+、Sca-1^+、lineage^-,KSL),于移植后1个月取外周血,流式分析嵌合率。结果未经X线照射及1Gy、2Gy照射情况下,端粒酶基因缺陷受体小鼠外周血中供体来源细胞嵌合率较低;6Gy照射后,供体来源外周血细胞嵌合率仍低于50%,而且端粒酶基因缺陷受体小鼠在移植后1个月内死亡较多;3Gy照射可形成较高嵌合率,Exo-1基因缺失对端粒酶缺陷小鼠造血干细胞植入效率影响不显著。结论以端粒酶缺陷小鼠作为衰老模型研究造血干细胞植入效率时,3GyX线照射能够有效地形成较高外周血供体细胞嵌合率,但是Exo-1基因没有进一步提高造血干细胞在端粒酶敲除小鼠植入效率。

  • 标签: 端粒酶基因缺陷 骨髓移植 造血干细胞 衰老
  • 简介:分子生物学理论与技术发展和应用已渗透到生命科学各各领域,动物营养学发展需要在分子水平上分析及解释营养素对动物机体生理、病理变化调控,如生长发育、新陈代谢、遗传变异、免疫与疾病等.本文综述了分子生物学在动物营养学中应用:利用分子生物学技术改造或生产动物性营养物质;从基因水平上研究如何提高动物生产性能及肉用性能:如肉质与瘦肉率等;在分子水平上研究营养与基因表达、调控关系,以从根本上阐明营养对机体作用机制;利用基因工程技术开发饲料资源.

  • 标签: 分子生物学技术 动物营养 基因表达调控 应用 发展前景
  • 简介:澳大利亚研究人员完成一项研究显示,无脊椎动物——一种珊瑚虫具有许多同脊椎动物人类相同基因。让研究人员更加感到意外是,在苍蝇和蠕虫这类动物身上并没有找到某些珊瑚虫和人类相同基因。新发现导致人们对利用苍蝇和蠕虫作为模式生物揭示人类基因某些研究提出了疑问。

  • 标签: 人类基因研究 苍蝇 蠕虫 模式生物 表达序列标记 基因丢失
  • 简介:第二代生物燃料指的是以麦秆、稻草和木屑等农林废弃物或藻类、纸浆废液为主要原料,使用纤维素酶或其他发酵手段将其转化为生物乙醇或生物柴油模式。第二代生物燃料与第一代最重要区别在于其不再以粮食作物为原料,从而最大限度地降低了对食品供应威胁。第二代生物燃料不仅有助于减少对传统化石能源依赖,也能减少温室气体排放,对实现全球可持续性发展具有重要作用。许多国家都制定了或是正在执行相关计划,大力发展第二代生物燃料。全球知名增长咨询公司Frost&Sullivan(弗若斯特沙利文)

  • 标签: 前景分析 燃料前景 生物燃料
  • 简介:很早以前,人们就认识到,人体健康或生命之所以不能维持,往往不是机体所有器官受到损害,而是由于部分组织或个别生命重要器官丧失功能所致,因而产生了更换受损组织或器官设想。为了实现用新器官替换功能低下器官愿望,19世纪欧洲即已开始尝试器官移植相关实验研究。然而,人源供体器官异常短缺,许多患者在等待器官过程中死亡,这使人们将目光转向了异种移植,

  • 标签: 异种移植 小型猪 器官移植 应用 人体健康 替换功能
  • 简介:microRNA(miRNA)对调控基因表达有着重要作用,病毒与宿主在miRNA水平存在着复杂"对话"。研究显示,人类免疫缺陷病毒(HIV)可能编码病毒miRNA(vmiRNA),通过维持病毒潜伏、保护感染细胞免于凋亡或外力刺激下细胞死亡等方式,在HIV病理过程中发挥重要作用。宿主miRNA则参与到了抗HIV防御性机制中,但也面临HIV调控相应宿主miRNA、编码RNA沉默抑制物等多种阻力。深入研究HIV与宿主间miRNA水平上动态相互作用,有助于进一步了解HIV致病机理,开发新治疗策略

  • 标签: MICRORNA 人类免疫缺陷病毒 病毒miRNA
  • 简介:分离和鉴定不同生物基因差异序列,有助于功能基因分离,揭开物种间进化规律,阐明某些疾病相关基因作用机理。本文简述了几种近年来常用筛选差异基因方法,特别是最新发表杂交监控差异分析法(HMDA)原理、适用范围及其特点,重点探讨了HMDA法在真核基因组差异序列筛选中技术性突破及其研究前景

  • 标签: 基因组 差异序列 杂交监控差异分析法
  • 简介:目的:探讨初始沙盘特征对患者社会功能缺陷诊断评估作用。方法:选择292例心理门诊患者为研究对象,对其初始沙盘特征进行编码,使用社会功能缺陷量表评估其社会功能程度,使用差异检验探讨不同初始沙盘特征患者社会功能之间差异。结果:292例患者,在空白领域是否过大,沙盘是否存在分裂,是否存在无功能桥、船等其他工具以及是否具有隔离空间栅栏等维度上,社会功能缺陷差异显著(P〈0.05)。结论:患者初始沙盘特征能够反映患者社会功能缺陷程度。

  • 标签: 初始沙盘 社会功能 差异检验
  • 简介:目的(1)建立RT-PCR方法,定性测定SIV感染猴血浆中病毒RNA,比较其与传统血浆病毒分离方法敏感性;(2)建立DNA-PCR方法,检测SIV感染猴外周血淋巴细胞(PBMCs)中前病毒DNA.(3)检验DNA-PCR和RNA-PCR方法在猴SAIDS模型应用中实用性和可操作性.方法用SIVmac251静脉感染恒河猴,定期采血,从血浆中提取病毒RNA,以RNA为模板通过RT-PCR法扩增,凝胶电泳定性;从感染猴PBMC中提取带有整合SIV前病毒DNA细胞基因组DNA,巢式PCR扩增,凝胶电泳定性.结果DNA-PCR和RNA-PCR经两轮扩增后均得到一长度为477bp特异条带,测序鉴定确为目的片段.9只实验猴感染SIV后7d,RNA-PCR结果为7/9阳性,DNA-PCR结果为100%阳性,而血浆病毒分离只有5/9阳性;此后一直到感染后42d,RNA-PCR和DNA-PCR结果一直为100%阳性,而血浆病毒分离阳性率在感染后35d下降到4/9,到42d时下降为零.结论PCR方法比病毒分离方法敏感性高.尤其是DNA-PCR,既可检测具有活跃病毒复制受感染细胞,又可检测那些携带病毒处于转录休眠期细胞,所以在感染早期和中后期--血浆病毒水平较低情况下或病毒处于潜伏感染阶段,它作为猴艾滋病(SAIDS)模型病毒学指标之一有其必要性和重要性.这个指标的检测方法应该是较血浆病毒RNA检测更为敏感.

  • 标签: 猴免疫缺陷病毒(SIV) RT-PCR 巢式PCR 外周血淋巴细胞(PBMCs) 病毒分离
  • 简介:目的以基因工程技术制备猴免疫缺陷病毒(SIV)SIV30蛋白作为抗原诊断试剂,建立免疫梳方法(IC)用于特异性检测实验猴血清中抗SIV抗体IgG。方法应用原核表达载体pGEX-4T-1构建SIVSIV30基因重组表达质粒,并在感受态细胞BL21中表达,将该重组蛋白纯化后作为诊断抗原,建立免疫梳标准化检测程序,并应用于临床检测。结果最佳抗原包被量为0.02mg/mL;制备好IC均能够特异性检测到相应SIV阳性血清而不与其他病毒血清间发生交叉反应,表明该检测方法特异性强;敏感性分析结果表明,SIV30蛋白能够敏感地检测到1∶400倍稀释SIV阳性血清;稳定性和重复性试验结果表明,同一样品重复检测3次,变异系数(CV)均小于10%;利用该检测方法在对10份可疑猴血清样品进行检测,IC与ELISA检测结果

  • 标签: 猴免疫缺陷病毒 SIV30蛋白 免疫梳 快速检测方法 抗体
  • 简介:目的(1)建立RT-PCR方法,定性测定SIV感染猴血浆中病毒RNA,比较其与传统血浆病毒分离方法敏感性;(2)建立DNA-PCR方法,检测SIV感染猴外周血淋巴细胞(PBMCs)中前病毒DNA。(3)检验DNA.PCR和RNA-PCR方法在猴SAIDS模型应用中实用性和可操作性。方法用SIVmac251静脉感染恒河猴,定期采血,从血浆中提取病毒RNA,以RNA为模板通过RT-PCR法扩增,凝胶电泳定性;从感染猴PBMC中提取带有整合SIC前病毒DNA细胞基因组DNA,巢式PCR扩增,凝胶电泳定性。结果DNA-PCR和RNA-PCR经两轮扩增后均得到一长度为477bp特异条带,测序鉴定确为目的片段。9只实验猴感染SIV后7d,RNA-PCR结果为7/9阳性,DNA-PCR结果为100%阳性,而血浆病毒分离只有5/9阳性;此后一直到感染后42d,RNA-PCR和DNA-PCR结果一直为100%阳性,而血浆病毒分离阳性率在感染后35d下降到4/9,到42d时下降为零。结论PCR方法比病毒分离方法敏感性高。尤其是DNA-PCR,既可检测具有活跃病毒复制受感染细胞,又可检测那些携带病毒处于转录休眠期细胞,所以在感染早期和中后期——血浆病毒水平较低情况下或病毒处于潜伏感染阶段。它作为猴艾滋病(SAIDS)模型病毒学指标之一有其必要性和重要性。这个指标的检测方法应该是较血浆病毒RNA检测更为敏感。

  • 标签: 猴免疫缺陷病毒 PCR技术 RT-PCR方法 外周血淋巴细胞 RT-PCR法 病毒DNA
  • 简介:目的正向遗传筛选斑马鱼肝脏、肠和胆囊发育缺陷突变体.方法ENU诱变野生型斑马鱼并开展经典F2代筛选,以lfabp为探针全胚原位杂交、BES-H2O2-Ac荧光染料分别检测斑马鱼早期胚胎肝脏、肠和胆囊表型.结果在128个突变基因组中筛选获得了源自14个F2家族斑马鱼消化器官发育缺陷突变体品系23个,并按表型划分为6类.结论斑马鱼肝脏、肠和胆囊发育调控机制有相似性和差异性.

  • 标签: 斑马鱼 消化器官 遗传筛选 突变体
  • 简介:传统认为只有真核生物才有蛋白质糖基化修饰现象,虽然在原核生物细胞中发现糖蛋白存在已经有数十年,但是没有引起我们足够重视。最近,在细菌中发现了蛋白质糖基化修饰系统,最具代表性是空肠弯曲弧菌Ⅳ-糖基化修饰系统、脑膜炎奈瑟球菌和绿脓杆菌0-糖基化修饰系统。这些糖基化修饰系统已成功地转移到大肠杆菌中,并且独立发挥其糖基化修饰作用。寡糖转移酶在修饰过程中起关键作用,且寡糖转移酶对糖底物特异性要求非常低,这使得按照我们需求来“定制糖蛋白”成为可能,并标志着“原核生物糖基工程”到来,这将为糖结合疫苗发展提供良好契机。

  • 标签: 糖基工程 蛋白糖基化 空肠弯曲弧菌 脑膜炎奈瑟球菌 绿脓杆菌 糖结合疫苗
  • 简介:近海潮间带植物生境微生物是最富有生物多样性海洋种群,其生境独特性决定了该区域微生物较高药用价值。文中介绍了我国南北方海域近海潮间带植物生境和微生物特性及药用前景,为该区域微生物开发利用提供参考。

  • 标签: 潮间带盐生植物 微生物 药用前景
  • 简介:应用多聚酶链反应(PCR),直接从SIV感染猴艾滋病(SAIDS)模型猴外周血淋巴细胞总DNA中扩增出767bpSIV核心蛋白P27基因片段。扩增产物经EcoRI及SalI双酶切后,克隆入相同酶切表达质粒pBV^220中,获得含SIV核心蛋白基因片段重组质粒pBVSG.并进行DNA序列分析,用该重组质粒转化大肠杆菌DHBa经筛选,增殖及42℃温度诱导,SDS—PAGE表明外源基因表达蛋白含量占菌体总蛋白14.5%,Western-blot证实表达产物能被SIVP27单克隆抗体及SAIDS模型猴血清中特异性抗体识别。

  • 标签: 猴免疫缺陷病毒 核心蛋白基因 大肠杆菌 表达
  • 简介:目的:构建能介导结缔组织生长因子(CTGF)基因RNA干扰复制缺陷型腺病毒表达载体。方法:以大鼠CTGF基因为靶序列,设计并合成含编码短发夹RNA序列寡核苷酸,构建腺病毒穿梭质粒P-shuttle-CTGF,酶切及测序分析正确后,与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转染AD-293细胞,进行病毒包装,得到腺病毒载体Ad.H1-CTGF,用该载体感染HSC-T6细胞,观察其对CTGF基因表达抑制效果。结果:构建腺病毒穿梭质粒p-shuttle-CTGF经酶切、测序分析证实正确;包装病毒载体滴度为4×1010PFU/mL,感染HSC-T6细胞后,Western印迹证实CTGF表达显著减少。结论:构建腺病毒载体Ad.H1-CTGF可有效抑制HSC-T6中CTGF表达,为抗纤维化研究提供了有力工具。

  • 标签: 结缔组织生长因子 RNA干扰 腺病毒载体
  • 简介:在大肠杆菌中,利用新构建含T7g-10LRBS以及λ-PR启动子新型原核表达载体,通过表达gag-pol基因片段,获得了具有天然序列的人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)核心蛋白p24高效表达。克隆gag-pol基因片段在其阅读框架移位区域插入了4bp碱基,其表达病毒蛋白酶在阅读框架上与gag一致,从而实现了对gag-pol融合蛋白有效加工,产生成熟核心蛋白p24及其它产物。重组p24以可溶形式存在,可以被抗p24单克隆抗体特异识别。测定N端8个氨基酸序列与从病毒纯化p24完全一致。在使用硫酸铵沉淀后,采用两步离子柱层析,可将重组蛋白纯化到95%以上纯度。结果表明,纯化p24可以作为特异性很强试剂而用于HIV感染诊断及病情预后,并可用于p24生化及结构分析。

  • 标签: HIV-1 核心蛋白 表达 纯化 鉴定