简介:目的比较大鼠肾大部切除与肾结扎两种方法制备的5/6肾切除慢性肾功能不全模型的异同。方法雄性SD大鼠随机分为三组。A组行左肾2/3切除加右肾切除,B组行结扎左肾动脉2/3分支加右肾切除,C组为假手术组。分别于第二次手术后5周、9周及13周测血压,处死大鼠,留取24h尿及肾组织。检测尿蛋白,肾组织切片染色。用半定量法评价肾小球硬化指数。结果第5周时,B组大鼠的收缩压显著升高,而A组与C组相比无显著差异,第9周和13周A组和B组与C组大鼠相比,收缩压均显著升高。肾部分切除术后,尿蛋白随时间进行性增加。B组与A组相比,尿蛋白增加更为显著。A组和B组在各观察点均有不同程度肾小球硬化,B组较A组肾小球硬化程度重。结论肾大部切除和肾结扎两种方法制备的大鼠5/6肾切除模型表现有所不同。
简介:目的基于Masquelet诱导膜技术,比较内固定钢板、髓内针和外固定架三种固定方式建立的大鼠胫骨大段骨缺损(MTBD)模型及诱导膜形成特点,从而选择较优的模型构建方法。方法60只10周龄SPF级雄性SD大鼠随机分为3组:内固定钢板组(IFP)、髓内针组(IMP)和环形外固定架组(CEF)。在右侧胫骨中段构建4mm骨缺损模型,分别应用自制六孔不锈钢钢板、直径1mm克氏针、自制环形外固定架固定。记录造模用时、出血量及肢体肿胀持续时间;行X线检查,观察骨水泥、固定装置稳定情况;诱导膜行HE染色,观察组织形态结构特点。结果在造模用时、出血量及模型成功率方面,IMP和CEF两组明显优于IFP组(P<0.05)。②CEF组肿胀时间最短,但三组之间肿胀持续时间差异无显著性(P>0.05)。③IFP组出现1例螺钉松动和3例骨水泥松动,CEF组出现1例骨水泥松动,而IMP组固定良好。④在感染方面,IFP组出现3例钢板外露,IMP组出现2例脓性包块,而CEF组无感染发生。⑤诱导膜组织厚度在460~520μm,三组差异无显著性(P>0.05)。结论三种方式均可成功构建MTBD模型,但综合考虑CEF为模拟Masquelet技术构建大鼠MTBD模型较优的方式。
简介:目的探讨一种可溶性的外分泌因子midkine-a在斑马鱼胚胎心脏发育过程中的功能.方法在整体胚胎上做midkine-aRNA的原位杂交实验;利用原有的转基因斑马鱼系Tg(pmidkine-a:EGFP),动态观察胚胎从出生到心脏发育成形这一段时间心脏荧光表达情况;将原有的转基因斑马鱼体系Tg(phsp:midkine-a:EGFP)胚胎进行热休克而过表达midkine-a,观察胚胎心脏表型;利用Tg(pcmlc2:dsRed)鱼系胚胎的心肌细胞核带有红色荧光,能进行单个心脏心肌细胞计数这一特点,将杂合的Tg(phsp:midkine-a:EGFP)鱼系与纯合的Tg(pcmlc2:dsRed)鱼系交配,以得到Tg(phsp:midkine-a:EGFP/pcmlc2:dsRed)的杂合胚胎,对其进行热休克而过表达midkine-a,计算每个胚胎心脏内心肌细胞的总数;用吗啉寡聚核苷酸(morphonino,MO)阻碍新生胚胎内的midkine-amRNA表达,观察胚胎心脏表型.结果原位杂交试验证实midkine-a在胚胎48hpf(hourpostfertilization,受精后,用来标记斑马鱼胚胎年龄)大时表达于心脏;转基因Tg(pmidkine-a:EGFP)胚胎在72hpf时其EGFP表达于心脏;Tg(phsp:midkine-a:EGFP)胚胎在过表达midkine-a后心脏变小;吗啉寡聚核苷酸敲除midkine-a对胚胎心脏发育无影响;最后在Tg(phsp:midkine-a:EGFP/pcmlc2:dsRed)鱼系胚胎内过表达midkine-a导致其单个心脏内心肌细胞数目变少,与其小心脏外形吻合.结论midkine-a在斑马鱼胚胎发育过程中表达于胚胎心脏;过表达midkine-a导致胚胎心脏内心肌细胞总数减少及心脏变小;敲除midkine-a则对胚胎心脏发育无影响.
简介:由中国生理学会主办、青海大学医学院承办、成都泰盟软件有限公司协办的“中国生理学会新型生理学实验技术平台实验室主任培训班”于2012年7月17-22日在青海大学医学院如期举办。来自全国各地40多个单位的80多名生理学教学与科研工作者参加了此次学习。培训班学习内容经过精心设计安排,主要分为两个阶段,第一阶段是理论课,内容非常丰富,培训班荣幸的邀请到了南京大学生命科学学院王建军教授和北京大学医学部管又飞教授前来授课,为提升培训班的层次和水平增添了靓丽的色彩,深受老师们的热烈欢迎。王建军教授的报告讲座:“下丘脑对前庭核和小脑运动控制的调节作用”,充分反映了我国生理学家在小脑研究方面的新进展,科学性强,条理清晰,深入浅出,深受代表们的热烈欢迎。管又飞教授的报告讲座:“前列腺素E2受体与血压调节”,将科研理论用通俗易懂的语言讲给大家,使非从事此项研究的人也一样能够听得很明白。
简介:由中国生理学会继续教育工作委员会主办、山东生理学会和青岛大学承办的2012年中国生理学会“生理学实验和研究技术培训班”于2012年8月16-22日在山东省青岛市青岛大学国家生理学重点(培育)学科举行。来自全国14所高等院校的34位学员参加了此次培训。此外,青岛大学医学院一些相关专业的教师、研究生和本科生也参加了此次培训。本次培训包括:在体伏安法技术、膜片钳技术、在体电生理技术、常用分子生物学技术、激光扫描共聚焦显微镜及流式细胞技术、动物行为学技术等,内容涵盖了电生理、电化学、分子生物学及细胞形态及功能学等多个领域。培训由理论授课和实验操作两部分组成。首先由青岛大学生理学科的部分老师根据自己的研究专长向学员们介绍了各种实验技术的应用范围、实验原理及相关技术参数,并结合自身的科研内容具体讲解了实验的操作流程。随后,学员们根据自己的兴趣爱好和科研需要,分别选择不同的实验技术进行了动手操作。经过几天紧张、充分的学习交流和实践,学员们对各种常用的生理学实验和研究技术有了一定的了解并能初步运用到自身的科学研究中。
简介:由中国生理学会循环生理专业委员会和四川泸州医学院联合主办的第二届“细胞膜片钳实验技术培训班”于2012年7月8日至13日在四川泸州医学院心血管医学研究所成功举办。来自全国28个医学院、研究所和医院等50多位学员参加了培训班。本次培训班聘请了国内外在细胞膜片钳实验研究领域的知名专家、教授授课,其中包括中国生理学会循环生理专业委员会主任委员曾晓荣教授、日本德岛大学井上勋教授以及东乐科技有限公司技术总监刘振伟博士,同时还有教学与实验经验丰富的培训人员指导学员亲自进行实验操作,体验实验过程,熟悉方法和步骤。本次培训班的主要内容包括:膜片钳技术在医学领域的应用和发展趋势;离子通道的分类、结构和功能;Axon膜片钳放大器基本原理及参数设置和应用;pClamp膜片钳数据采集分析软件的使用:FundamentalsofElectrophysiology;细胞的分离准备;微管电极的制作以及电流的记录等内容。本次培训包括三天的集中授课和两天的实验操作,共计42学时,让学员对从细胞的分离准备到最终上机操作的细胞膜片钳实验的具体步骤有了感性认识。培训过程不仅包括对细胞膜片钳技术的系统理论指导,还包括对学员在实践过程中遇到的具体问题的解答。学员们普遍对此次培训班的成功举办表示满意。大家一致认为,通过此次培训,对膜片钳技术的理论知识有了系统的学习,对膜片钳实验技术操作有了更深入的了解,对相关软件的操作也有了较为熟悉的掌握。来自全国各地的学员在学习的过程中也借此契机进行了较多的学术交流,深入了了解,也为今后进一步的交流奠定了良好的基础。