简介：

简介：目的研究阻断CD40-CD40L共刺激信号通路对移植皮肤免疫排斥反应的影响。方法通过RT-PCR技术克隆了呈可溶性表达的CD40L分子胞外区（sCD40L）,利用K14启动子构建了sCD40L皮肤特异性表达载体,并利用该载体制备了转基因小鼠。结果所克隆的CD40L胞外区片段其大小及序列符合预期;以哺乳动物表达载体PCI为骨架,通过DNA重组,获得了含K14启动子和sCD40L编码区的皮肤特异性表达载体K14-sCD40L;通过显微注射和胚胎移植,PCR筛选检测：49只G0代小鼠有1只小鼠扩增出特异性条带,阴性对照无条带。结论成功建立sCD40L转基因阳性小鼠。

简介：Apoptosismanifestsintwomajorexecutionprogramsdownstreamofthedeathsignal:thecaspasepathwayandorganelledysfunction.Animportantantiapoptosisfactor,Bcl-2protein,contributesincaspasepathwayofapoptosis.Calcium,animportantintracellularsignalelementincells,isalsoobservedtohavechangesduringapoptosis,whichmaybeaffectedbyBcl-2protein.WehavepreviouslyreportedthatinHarringtonine(HT)inducedapoptosisofHL-60cells,there'schangeofintracellularcalciumdistribution,ovingfromcytoplastespeciallyGolgi'sapparatustonucleusandaccumulatingtherewiththehighestconcentration.Wereportherethatcaspase-3becomesactivatedinHT-inducedapoptosisofHL-60cells,whichcanbeinhibitedbyoverexpressionofBcl-2protein.NosignofapoptosisorintracellularcalciummovementfromGolgi'sapparatustonucleusinHL-60cellsoverexpressingBcl-2ortreatedwithAc-DEVD-CHO,aspecificinhibitorofcaspase-3.Theresultsindicatethatactivatedcaspase-2canpromotethemovementofintracellularcalciumfromGolgi'sapparatustonucleus,andtheprocessisinhibitedbyAc-DEVD-CHO(inhibitorofcaspase-3),andthatBcl-2caninhibitthemovementandaccumulationofintracellularcalciuminnucleusthroughitsinhibitiononcaspase-3.Calciumrelocalizationinapoptosisseemstobeirreversible,whichisdifferentfromtheintracellularcalciumchangescausedbygrowthfactor.

简介：试验用SSR分子标记对60份宁夏粳稻种质资源进行遗传多样性分析。103对SSR引物表现多态性的有58对,共扩增出212条多态性条带,等位变异范围为2～9,平均每对引物3.7个;多态性信息含量（PIC）变幅为0.032～0.788,平均为0.403;高多态性位点主要发生在3号、6号和11号染色体上,而无多态性或低多态性位点主要发生在1号和10号染色体上;成对供试材料的遗传相似系数GS值变幅为0.642～0.958,平均为0.790,单个供试材料的平均GS值变幅为0.710～0.816,平均为0.781,亲缘关系较近;UPGMA聚类表明,在遗传相似系数约0.785处,供试材料可被分为11类,大部分材料被聚在一类中。

简介：Theeventsofcelldeathandtheexpressionofnuclearmatrixprotein(NMP)havebeeninvestigatedinapromyelocyticleukemiccelllineHL-60inducedwithetoposide.BymeansofTUNELassay,thenucleidisplayedacharacteristicmorphologychange,andtheamountofapoptoticcellsincreasedearlyandreachedmaximunabout39%aftertreatmentwithetoposidefor2h.NucleosomalDNAfragmentationwasobservedaftertreatmentfor4h.ThemorphologicalchangeofHL-60cells,thus,occurredearlierthantheappearanceofDNAladder.Totalnuclearmatrixproteinswereanalyzedby2-dimensionalgelelectrophoresis.Differentialexpressionof59nuclearmatrixproteinswasfoundin4hetoposidetreatedcells.Westernblottingwasthenperformedonthreenuclearmatrixacssociatedproteins,PML,HSC70andNuMA.TheexpressionofthesuppressorPMLproteinandheatshockproteinHSC70weresignificantlyupregulatedafteretoposidetreatment,whileNuMA,anuclearmitoticapparatusprotein,wasdownregulated.Theseresultsdemonstratethatsignificantbiochemicalalterationsinnuclearmatrixproteinstakeplaceduringtheapoptoticprocess.

简介：皮肤癌是一种常见的恶性肿瘤,大部分是基底细胞癌和鳞状细胞癌,85%以上的基底细胞癌好发于颜面部[1].皮肤癌好发于暴露部位,尤以头面部居多[2].我院与2012年1月份为一例99岁左面部皮肤癌患者行放疗,取得了理想的效果.临床上的皮肤癌以放射性治疗为治疗首选,皮肤癌位置表浅,边界清楚,直视下照射定位精确,对放射线特别敏感,而且皮肤耐受性较高,但考虑到患者99岁的高龄并因骨折行动不便,肿瘤放疗风险大,几家医院均未收治.现为病人的整个放疗过程护理做如下的报道.

简介：来自“自古多儒士”的江浙水乡，却曾观关外景色五载；自幼家教淡泊宁静，却曾历经动荡起伏冰雪风霜；唯“济生”明志，图国粹弘扬，视门下如子，为学会尽心。这就是韩济生院士!

简介：TodeterminecancerpathwayactivitiesinninetypesofprimarytumorsandNCI60celllines,weappliedaninsilicoapproachbyexamininggenesignaturesreflectiveofconsequentpathwayactivationusinggeneexpressiondata.SupervisedlearningapproachespredictedthattheRaspathwayisactivein～70%oflungadenocarci-nomasbutinactiveinmostsquamouscellcarcinomas,pulmonarycarcinoids,andsmallcelllungcarcinomas.Incontrast,theTGF-β,TNF-α,Src,Myc,E2F3,andβ-cateninpathwaysareinactiveinlungadenocarcinomas.WepredictedanactiveRas,Myc,Src,and/orE2F3pathwayinsignificantpercentagesofbreastcancer,colorectalcarcinoma,andgliomas.OurresultsalsosuggestthatRasmaybethemostprevailingoncogenicpathway.Additionally,manyNCI60celllinesexhib-itedagenesignatureindicativeofanactiveRas,Myc,and/orSrc,butnotE2F3,β-catenin,TNF-α,orTGF-βpathway.Toourknowledge,thisisthefirstcom-prehensivesurveyofcancerpathwayactivitiesinninemajortumortypesandthemostwidelyusedNCI60celllines.The“geneexpressionpathwaysignatures”wehavedefinedcouldfacilitatetheunderstandingofmolecularmechanismsincan-cerdevelopmentandprovideguidancetotheselectionofappropriatecelllinesforcancerresearchandpharmaceuticalcompoundscreening.

简介：人类的寿命一直呈现出稳步延长的趋势，据科学家预测，一旦抗衰老新科技研制成功，到2050年，人类寿命至少能延长20年，百岁寿星将不再稀罕。不过，这个福音的背后却包含着许多人们意想不到的变化，到时候，西方工业国家的退休年龄至少要顺延至85岁。

简介：目的：构建汉滩病毒包膜糖蛋白基因的真核表达载体，并加入可增强免疫应答效应的细胞因子CD40L基因，检测其可否在真核细胞中表达。方法与结果：参照GenBank中汉滩病毒M基因和小鼠CD40L的全基因序列设计引物，通过聚合酶链反应（PCR）获得M和CD40L基因片段，将其与pCI—neo载体相连，测序证实该载体构建成功后，将此真核表达载体以脂质体转染法转染至哺乳动物细胞CHO—K1中，利用间接免疫荧光法（IFA）检测发现M基因和CD40L基因可以同时表达于CHO-K1细胞中。结论：构建了带有CD40L基因的汉滩病毒包膜糖蛋白重组质粒并获得表达，为深入研究汉滩病毒感染后包膜糖蛋白引起的特异性免疫应答规律奠定了实验基础。

简介：通过论述循证医学对浅部真菌病的中医临床研究意义,回顾其在中医药治疗浅部真菌病临床研究中的现状和存在问题。中医对浅部真菌病的认识由来已久,已知具有抗真菌作用的中药有很多,但由于中药单方和复方成分复杂的特点,这类相关研究的数量不多且质量不高,一定程度限制了临床工作者和研究者的整体科研设计思路。该文介绍了澳大利亚抗真菌药物——茶树油的研发历程,探索中医药治疗浅部真菌病的循证医学之路(Evidence-BasedMedicine,EBM),结合提供思考与设想,也为浅部真菌病的中医药规范化诊疗提供借鉴。

简介：目的：利用Red系统构建肠出血性大肠杆菌O157：H7的sRNA基因E40缺失突变株。方法：选取本实验室预测并经过实验验证的sRNA基因，根据NCBI上相应的序列，设计2对引物分别扩增该sRNA基因的上下游分别长464和455bp的同源臂，经PCR扩增，构建到相应的载体，最后以构建好的含上下游同源臂和卡那霉素抗性基因的长约2500bp的线性片段作为打靶片段，在Red重组系统的作用下与sRNA基因E40的上下游同源区域发生同组，从而把sRNA基因从基因组上置换下来，之后利用质粒pCP20将FRT位点间的卡那霉素抗性基因消除。结果与结论：构建了出血性大肠杆菌O157：H7的sRNA基因E40的缺失突变株，为进一步研究sRNA基因在出血性大肠杆菌O157：H7生长及致病过程中所起的功能奠定了良好的基础。

简介：暴光荏苒，转眼2006年已近岁末。在历史的长河中，这也许只是短短的，寻常的又一年。然而，对于正在崛起的中国，2006年则是至关重要的时期，它必将成为我国科技发展史上的又一个里程碑——作为第十一个五年计划的开局之年，今年颁发了社会主义市经济条件下制定的第一个中长期科学发展规划《国家中长期科学和技术发展规划纲要》，

简介：cAMPmediatedsignalingmayplayasuppressiveroleinimmuneresponse.WepreviouslyfoundthatthecAMP-elevators(CTxand8-Br-cAMP)inhibitedIL-12,IL-la,IL-6geneexpression,butincreasedthetranscriptionallevelsofIL-10andIL-1RainLPS-treatedmurineperitonealmacrophages.ThepresentstudyexaminedapossiblemolecularmechanisminvolvedincAMPelevators-inducedinhibitionofIL-12p40expressioninresponsetoLPS.OurdatademonstratedthatcAMPelevatorsdownregulatedIL-12p40mRNAexpressionandIL-12pT0productioninmurineperitonealmacrophages.SubsequentstudiesrevealedthatcAMP-elevatorsblockedphosphorylationofp38MAPK,butdidnotaffecttheactivityofNF-κBbindingtoIL-12promoter(-136/-112).ThisisthefirstreportthatcAMPelevatorsinhibitLPS-inducedIL-12productionbyamechanismthatisassociated,atleastinpart,withp38-dependentinhibitionbycAMPsignalingpathways.

简介：选择60Coγ射线5Gy照射后第7天的人胚肺成纤维细胞(HELF),采用聚阳离子脂质体LipofectAMINE介导的基因转染法将人TGFβ1正、反义基因表达载体pMAMneo-TGFβ1和pMAMneo-AntiTGFβ1转入HELF,转染细胞经G418抗性筛选出来.提取培养细胞的染色体DNA,用DNA斑点印迹分析表明,它们能与neo基因特异杂交.用neo基因特异的PCR引物能从转染细胞扩增出276bp的阳性片段,而未转染细胞则扩增阴性.

简介：利用蛋白质转导结构域(PTDs)可以将与之融合表达的蛋白质直接送入细胞中.将通过筛选噬菌体展示锌指文库得到的特异作用于SV40启动子上9bp序列的三锌指结构的序列插入含有TAT蛋白的蛋白质转导结构域的表达载体pET-TAT-NLS中,构建融合蛋白的表达载体pET-TAT-NLS-clone3.融合蛋白在E.coliBL21(DE3)中得到了可溶性表达,含量约占总蛋白的18%;并通过镍亲和凝胶层析柱得到了较好的纯化融合蛋白.

简介：