简介:目的:基于大肠杆菌质粒pMMB207,构建贝氏柯克斯体穿梭载体,建立贝氏柯克斯体转化系统。方法:利用PCR分别扩增eGFP基因、Kan~R抗性基因、贝氏柯克斯体组成型表达启动子P311和P1169等4段序列,然后用融合PCR技术将4段序列融合为P311-eGFP-P1169-Kan~R串联序列,经KpnⅠ和XhoⅠ酶切后,连接至经同样双酶切的pMMB207骨架上,构建穿梭载体p207-GK;将穿梭载体电转化至贝氏柯克斯体,用ACCM-2培养基进行传代培养或感染BGM细胞;利用倒置荧光显微镜观察eGFP基因的表达,传代至eGFP基因高表达时,用半固体平板培养法克隆分纯贝氏柯克斯体转化株。结果:构建了贝氏柯克斯体穿梭载体,获得了稳定表达eGFP的贝氏柯克斯体转化株,并完成了克隆分纯。结论:建立了完整的贝氏柯克斯体转化系统,为后续用遗传学方法研究贝氏柯克斯体奠定了基础。
简介:摘要目的探讨厄贝沙坦联合双氢克尿噻治疗原发性高血压的临床疗效。方法临床统计了120例原发性高血压患者,对120例患者每天行厄贝沙坦150mg口服,同时行双氢克尿噻25mg口服治疗。在治疗的过程中,分别在2周、4周、8周的时候统计记录所有患者的血压和心率,比较治疗中的降压疗效。在治疗过程中记录患者的不良反应。结果经过8周的治疗,120例患者中显效66例,有效48例,无效6例,总有效率为95%。不良反应出现2例,治疗过后,心率、肾功能、肝功能、血糖、血脂、电解质、血尿酸等均没有明显变化。结论厄贝沙坦联合双氢克尿噻治疗原发性高血压的疗效显著,不良反应少,值得临床进一步推广使用。