简介：摘要目的检测NCSTN基因稳定沉默的人永生化角质形成细胞（HaCaT）增殖活性及相关分化蛋白的改变，初步探索反常性痤疮发病的可能机制。方法构建慢病毒介导shRNA沉默NCSTN基因的HaCaT细胞模型（shRNA组），转染空载慢病毒的HaCaT细胞作为阴性对照组，实时定量PCR和Western印迹法检测NCSTN基因的沉默效率。CCK8法检测HaCaT细胞增殖活性，实时定量PCR和Western印迹法检测HaCaT细胞角蛋白（CK1、CK5、CK7、CK10、CK14、CK16、CK17、CK18、CK19、CK20）及其他分化分子（内披蛋白、兜甲蛋白）mRNA和蛋白的表达。两组计量资料的比较采用两独立样本t检验。结果shRNA组NCSTN mRNA及蛋白表达（0.42 ± 0.19、0.30 ± 0.07）均显著低于阴性对照组（1.00 ± 0.34、1.00 ± 0.26；t = 5.196、2.637，P < 0.001、< 0.05），基因沉默效率达70%。与阴性对照组相比，shRNA组HaCaT细胞明显增殖活跃，CK16、CK19蛋白表达显著下调（t = 3.787、3.817，P < 0.01、< 0.05），终末分化分子内披蛋白表达明显降低（t = 2.904，P < 0.05）。结论稳定沉默NCSTN基因表达会引起HaCaT细胞异常增殖分化，为后续探究NCSTN基因突变引起反常性痤疮提供新思路。

简介：目的观察地塞米松对体外培养的人牙髓细胞增殖和分化的影响。方法收集拔除的无龋坏、无牙周疾病的健康前磨牙及第三磨牙，获得牙髓，酶消化联合组织块法体外培养人牙髓细胞（Humandentalpulpcells，hDPCs），扩增后取第4代生长状态良好的细胞用于实验。分为两组，实验组hDPCs在含2％胎牛血清（Fetalbovineserum，FBS）的aMEM培养基中加入10^-8mol／L地塞米松（Dexamethasone，Dex）培养，对照组单纯使用含2％FBS的aMEM培养基培养。在细胞培养第1、3、5天检测细胞增殖情况；细胞培养的第1、5、10天分别进行AIP染色及ALP定量分析检测细胞分化情况：细胞培养第10天进行茜素红染色观察钙化结节形成情况。结果细胞增殖活性检测显示，实验组培养第3天及第5天可见hDPCs增殖活性得到显著抑制，与对照组相比有统计学差异；AIP染色及定量测定：培养10d后，地塞米松实验组ALP活性明显高于对照组：茜素红染色结果：培养10d后两组细胞茜素红染色均为阳性。表明实验组与对照组均有钙化结节形成．但是实验组钙化结节形成数量较多。结论酶消化联合组织块法可以成功体外培养hDPCs。10^-8mol／L地塞米松可显著抑制hDPCs的增殖活性，提高hDPCs的ALP活性及矿化能力。

简介：目的：观察巴戟天寡糖（MorindaOfficinalisHowOligosacchalide，MOO）对成肌细胞增殖分化的影响。方法：采用离体纯化培养乳鼠双侧后肢骨骼肌成肌细胞的方法，制成浓度为1×10^5／mm3的成肌细胞悬液，接种到25ml培养瓶中培养。实验分为5组：空白对照组5．氮杂胞苷（5-Aza）（10μmol／mL）对照组；MOO小、中、大剂量（100μg／ml、300μg／ml、500μg／m1）组；并检测以下指标：1．成肌细胞形态学变化。2．免疫细胞化学法鉴定结蛋白（Desmin）。3．免疫细胞化学法测定转化生长因子β1（TGF—β1）和增殖细胞核抗原（PCNA）。4．四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测巴戟天寡糖对成肌细胞增殖的影响。5．绘制生长曲线。结果：1．倒置显微镜下，成肌细胞培养24h后，可见大量折光率强的圆形细胞贴壁，且有极少量细胞有小突起；48h后，细胞呈梭形并出现单个细胞核；72h后，成肌细胞变得细长，并相互拉网，从单核期进入合体细胞阶段；继续培养，成肌细胞相互融合，形成多核性长管状初生肌管；培养第5天后，可观察到分化状态较好的肌管有自发性搏动的收缩；用desmin抗体对分裂增殖4～5天的成肌细胞进行间接免疫酶染色，细胞核外周及胞浆呈棕黄色的desmin阳性反应，表明培养的细胞为成肌细胞；成肌细胞生长曲线显示原代成肌细胞生长培养48h后开始增生，早期增殖较快，倍增时间为5d，6～7d进入平稳期。

简介：众所周知,吸烟会加速牙周病的破坏进程,延缓牙周病愈合.我们前期研究证实尼古丁作为香烟的主要成分,能够通过小分子RNA（miRNA）调控抑制牙周膜干细胞的再生.该研究中,我们假定吸烟者牙周病愈合迟缓是由于其牙周膜干细胞再生能力受影响.我们分别从吸烟者和不吸烟者拔除的牙齿中获取牙周膜干细胞并培养.在吸烟者的牙周膜干细胞培养中,我们发现其增殖速率和迁移能力明显下降.

简介：从被发现到能够得到大量天然或基因重组产物,细胞因子在多种生物学过程中所扮演的重要的调节分子的角色正日益引起人们的重视.消化管,如同机体的其他器官,其发生是一个复杂而有序的过程,但具体机制至今尚未明了.已有文献报道胚胎期胃肠的发生与间充质的作用有关[1],并认为这种相互作用除了上皮细胞与间充质细胞直接作用外,也与基膜成分、激素、多种生长因子有关[1],是一个细胞与细胞、细胞与分子、分子与分子相互作用的复杂网络调节过程.因此,对各种绌胞因子在胃肠发生过程中定位与表达时相的研究,对绌胞因子与受体相互关系的研究,将有助于阐明胃肠发育的机理.本文现就胃肠上皮增殖与分化过程中的主要相关细胞因子的研究进展综述如下.

简介：目的牛骨胶原蛋白肽（collagenpeptides,CP）化合物能够显著增加股骨骨密度,并改善股骨的微结构,在骨质疏松症的预防和治疗中发挥重要的作用,它通过口服给药的形式吸收入肠.然而,此过程的分子机制尚不清楚.因此,本研究以阐明牛骨CP化合物血清对成骨细胞增殖与分化的影响.方法制备牛骨CP化合物大鼠血清,牛骨CP化合物处理的实验组和未经处理的对照组大鼠血清浓度为3%、6%、10%,加到无血清的DMEM溶液中,用MTT法和流式细胞术分别检测牛骨CP血清对MC3T3-E1细胞增殖和细胞周期的影响.茜素红矿化染色检测牛骨CP血清对成骨细胞矿化,用ProPlus6图像软件定量分析茜素红染色的含量.结果MTT结果表明,3%、6%及10%的CP化合物含药血清与对照组相比,能够显著促进MC3T3-E1细胞增殖（P〈0.05）.然后将3%CP化合物含药血清,对照组（control,CN）血清分别作用于MC3T3成骨细胞,培养3d,流式细胞术测定细胞周期.结果表明,与3%CN血清相比,3%CP血清组G1期比例显著减少,G2/S期比例显著增加（P〈0.01）,表明牛骨CP通过促进G2/S期的百分含量而促进细胞的增殖.矿化染色结果表明CP血清处理21d后能显著促进成骨细胞的矿化（P〈0.05）.结论牛骨CP血清在成骨细胞增殖与分化中起重要作用,为骨质疏松症的防治提供了理论依据.

简介：摘要成人角膜内皮细胞失去增殖能力，损伤后无法正常再生。当CECs密度下降到一定程度时，就会引起角膜基质水肿，角膜混浊和视力下降。临床上针对角膜内皮失代偿首选角膜内皮细胞移植，但体外培养角膜内皮存在增殖过于缓慢，且易分化为间质细胞等问题，很难达到长期稳定传代的目的。越来越多研究表明，一些信号通路参与了调控角膜内皮增殖与分化的过程，通过干预这些信号通路有望获得长期稳定传代的角膜内皮细胞。本文就这些信号通路进行综述。

简介：目的：为揭示对－壬基酚（p-NP)是否具有发育毒性及毒作用提供实验依据。方法：采用微团培养观察了不同浓度的对－壬基酚（p-NP)对体外培养的Wistar大鼠胚胎中脑细胞增殖和分化的影响。结果：p-NP对体外培养的Wistar大鼠胚胎中脑细胞的增殖和分化均有抑制作用。表现为染毒组神经细胞集落形成数量减少，细胞毒性试验吸光度值下降，并呈现出明显的剂量－反应关系，p-NP对中脑细胞的50％增殖抑制浓度（IP50）和50％分化抑制浓度（ID50）为27．35ug/ml和8．93ug/ml，结果：按照Renault等人推荐的体外致畸分类标准，p-NP属于阳性致畸物。

简介：摘要目的探讨并分析淫羊藿苷对人牙周膜细胞增殖及骨向分化的影响。方法体外进行人牙周膜细胞的培养，基于矿化诱导这一条件下，把第三代细胞和六个不同浓度淫羊藿苷进行互相作用，即浓度为零（对照组）、浓度为10mg/L、1mg/L、0.1mg/L、0.01mg/L、0.001mg/L，借助于BSP表达水平、噻唑蓝比色法以及ALP活性测定，就其对于人牙周膜细胞增殖与骨向分化的影响进行分析。结果作用24个小时后，不同药物浓度都可使人牙周膜细胞增殖；48小时后，淫羊藿苷在1-0.001mg/L区间，对于人牙周膜细胞增殖能力的强化较为显著，在10mg/L时影响较小；72个小时后，淫羊藿苷浓度在0.1-0.001mg/L区间时，增殖能力较为显著；作用72个小时后，浓度在1-0.001mg/L区间的组数推动人牙周膜细胞骨向分化，相对于对照组而言，所存差异具有统计学意义，即P＜0.05，而10mg/L组和对照组之间所存差异不具统计学意义，即P＞0.05。结论基于一定的浓度范围内，利用淫羊藿苷不仅可以推动人牙周膜细胞的增殖，同时还可进一步推动其骨向分化。

简介：目的探讨MesenPRORSMedium对人脂肪干细胞增殖与分化的影响。方法应用MesenPRORSMedium与DMEM＋10％FBS两种培养基培养人脂肪干细胞，比较两者在细胞形态、体外增殖能力、成纤维细胞集落形成（CFU—F）能力及多向分化潜能的差异。结果MesenPRORSMedium培养的人脂肪干细胞具有良好的细胞形态，在增殖速度、细胞集落，以及成脂、成骨及成软骨能力等方面均优于DMEM＋10％FBS。结论MesenPRORSMedium是人脂肪干细胞优良的培养基。

简介：1精原干细胞的一般特性精原干细胞（Spermatogonialstemcell，SSC）位于睾丸曲细精管基膜上，细胞及核大，多呈圆形，核仁位于中央；胞质中有核糖体，线粒体丰富靠近核膜，呈圆形或椭圆形，内有板层状线粒体嵴，其余细胞器并不发达。它可分为A、B两型。在体内，A型精原细胞有3种命运：一是保持为A型精原干细胞；二是分化为中间型和B型精原细胞；三是发生凋亡。非灵长目哺乳动物的As（Asingle）精原细胞是干细胞，它可通过有丝分裂产生两个新的干细胞，也可以胞质不完全分裂形成通过细胞间桥成对存在的Apr（Apaired）精原细胞.

简介：神经干细胞具有自我更新和多向分化潜能的特点,在理想状态下,其是中枢神经损伤后修复的重要来源之一,可修复及补充受损的神经细胞,增强神经突触之间的联系,建立新的神经环路,被广泛用于细胞移植和基因载体治疗的研究,为神经干细胞的临床应用、神经退行性疾病和中枢神经系统损伤等提供了新的治疗途径.因此,探索中药对神经干细胞增殖分化的诱导及调控作用已成为当今的研究热点,同时也为中药的现代化研究提供了新的思路.

简介：神经干细胞（neuralstemcells，NSCs）是一类来源于中枢神经系统的干细胞，具有自我更新能力及分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的潜能，为中枢神经系统损伤和退行性疾病的治疗提供了新的治疗选择。但如何让NSCs在复杂的信号网络调控中实现有序的增殖、分化，修复受损的神经组织，目前研究还未完全清楚。本文对涉及NSCs增殖和分化相关信号通路的最新进展做一综述。

简介：的:探究Notch信号通路抑制剂DAPT在体外对人牙周膜间充质干细胞(hPDLSCs)增殖及成骨分化能力的影响。方法:体外培养扩增hPDLSCs,流式细胞术检测间充质干细胞特异性标记物CD73、CD90和造血干细胞特异性标记物CD34、CD45的表达。选取第二代生长良好的hPDLSCs,随机分为3组:空白组使用人间充质干细胞培养基,对照组使用人间充质干细胞成骨诱导培养基,实验组使用含1μmol/LDAPT的人间充质干细胞成骨诱导培养基进行体外培养。CCK8检测hPDLSCs增殖能力,绘制增殖曲线;实时定量RT-PCR检测碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原(COL-Ⅰ)、骨钙素(OCN)、骨桥蛋白(OPN)、Runt相关转录因子2(Runx2)等成骨相关基因及Notch信号通路下游基因(Hes-1、Hey-1)和Notch信号通路配体JAG1的表达;茜素红染色显示矿化结节形成情况。结果:原代培养hPDLSCs表面标记物表达CD73(94.49%)、CD90(98.74%)、CD34(2.07%)、CD45(0.62%);实验组在各检测点的细胞增殖能力与对照组之间无明显差别,两组结果无统计学差异(P>0.05);实验组成骨分化相关基因的表达水平升高(P<0.05),Notch信号通路下游基因表达降低,配体表达升高(P<0.05),细胞染色见实验组矿化结节增多增大。结论:DAPT可提高hPDLSCs体外成骨分化能力,但对增殖无明显影响。

简介：本实验采用病毒直接感染细胞的混合培养的方法,　　实验采用PCR检测技术检测干细胞中的HCMV-DNA的结果在各培养体系中HCMV感染组均能检测到相应的阳性扩增带,HCMV-AD169株能直接感染脐血造血干细胞抑制其增殖和分化

简介：目的研究三种材料，材料一：β-磷酸三钙支架（β—TCP）；材料二：明胶／1氐结晶度羟基磷灰石涂层-磷酸三钙支架（gel／lc—HA．β-TCP）；材料三：明胶／高结晶度羟基磷灰石涂层-β-磷酸三钙（gel／he-HA-β-TCP）。三种材料的细胞毒性及兔骨髓基质细胞（BMSCs）与材料共培养增殖的情况。方法取兔股骨骨髓腔细胞，进行贴壁培养BMSCs。在成骨诱导液中诱导BMSCs。将诱导后的BMSCs与三种支架材料在培养板内共培养1、3、5、7、9d。采用形态学观察、MTT法及ALP检测试剂盒等方法检测材料的BMSCs细胞毒性及BMSCs细胞在材料表面的增殖和分化能力。结果光镜及电镜下观察各组无显著差异。细胞毒性在0-1级。与细胞共培养，β-TCP组在第7．9天与阴性对照组差异有统计学意义。ALP检测，β-TCP组在第7、9天与阴性对照组差异有统计学意义（P〈0．05），gel／lc—HA-β-TCP在第9天与阴性对照组差异有统计学意义（p〈0．05）。结论新型明胶／高结晶度羟基磷灰石涂层-β-磷酸三钙支架和明胶／低结晶度羟基磷灰石涂层-β-磷酸三钙支架与BMSCs生物相容性好，适合作为支架材料负载BMSCs构建组织工程骨。

简介：探索内皮细胞对小鼠骨髓造血细胞的刺激和诱导分化作用.人脐静脉内皮细胞取自剖腹产后12hr以内的脐带.按Jaffe法进行培养,建立内皮细胞体外培养模型,收集原代培养的内皮细胞上清液(HECS).按本室常规方法制备骨髓有核细胞.在造血细胞半固体和液体培养体系中加入不同组合的重组造血因子,分为三组:①粒系培养组加GM-CSF(德国BM公司),终浓度为20ng/ml.②红系培养组加入IL-3(美国SIGMA公司)与EPO(德国BM公司),终浓度分别为20ng/ml和2u/ml.③实验组加入内皮细胞培养上清液,以RPMI-1640为对照组.将上述体系接种于24孔板中,每孔1ml,培养7d,收集细胞,作细胞计数,台盼蓝拒染活力检测.细胞表面标记分析:选用抗红系或粒系的单克隆抗体CD71和CD13(美国Coulter公司)作细胞表面标记检测.培养后细胞经PBS洗涤,取细胞悬液2～5×105细胞),加抗体1μl,4℃孵育30min,用PBS洗去没有标记上的抗体和FITC,重新悬浮细胞,用流式细胞仪(CoulterEliteEsp,美国Coulter公司)进行分析.用T检验分析实验数据以x±SD表示.结果:HECS对小鼠骨髓细胞形成各类造血祖细胞集落具有明显的刺激作用,能够提高BFU-E,CFU-E,CFU-GM集落产率,分别为43.04±5.80,148.75±32.20,104.67±9.92(P＜0.05);HECS诱导细胞7d后,细胞表面表达CD13为93.75±5.38,CD71为59.95±7.10(P＜0.05).实验组与阳性对照组基本一致,阴性对照组无集落形成和抗体表达.内皮细胞不但能够促进造血干祖细胞的增殖并且能够诱导其定向分析.以往对骨髓细胞的体外培养均采用琼脂或甲基纤维素半固体培养的方法,在用流式细胞仪进行分析时,由于难以去除琼脂或甲基纤维素对实验的干扰,造成对细胞表面抗原标记的困难,影响了实验的准确性.本实验将小鼠骨髓细胞进行体外液体培养,同时加入不同组合的重组造血生长因子,诱导造血干祖细胞向红系和粒系分析,为流式细胞仪分

简介：目的观察瞢密钙片及马鹿角多肽对鼠胚成骨细胞MC3T3-E1的增殖分化作用及细胞内OPG、RANKLmRNA的表达。方法采用MEM（10％FBS）培养液培养细胞，细胞计数法描绘成骨细胞生长曲线；MTT法检测瞢密钙片（0、50、100、500、1000μg／m1）、马鹿角多肽（0、5、50、500μg／m1）和钙尔奇D对照组对鼠胚成骨细胞MC3T3-E1增殖的作用；瞢密钙片（0、50、100、500、1000μg／ml）、马鹿角多肽（0、5、50、500μg／ml）和钙尔奇D对照组干预鼠胚成骨细胞MC3T3-E172h后，比色法检测细胞内碱性磷酸酶（alkalinephosphatase，ALP）的含量，RT—PCR法检测骨保护蛋白（osteoprotegerin，OPG）、核因子KB激活受体配体（receptoractivatorofNK-KBligand，RANKL）mRNA的表达。结果瞢密钙片及马鹿角多肽作用于MC3T3-El成骨细胞72h后，可促进其增殖，OD值增加（P〈0．05），增加ALP的含量，促进OPGmRNA表达，同时抑制RANKLmRNA表达。结论瞢密钙片及马鹿角多肽促进MC3T3-E1成骨细胞增殖分化，可能与促进成骨细胞OPGmRNA表达、抑制RANKLmRNA表达有关，从而促进骨形成，抑制骨吸收。

简介：摘要肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导蛋白（TWEAK）是肿瘤坏死因子（TNF）超家族成员，通过作用于唯一受体成纤维细胞生长因子14 （Fn14）调控细胞的增殖、分化和迁移等多种生命活动。近来研究表明，TWEAK/Fn14信号可以作用于多种干细胞，如肝干细胞、神经干细胞和间充质干细胞等，通过影响其增殖与分化的能力，干预组织的修复与再生。对该领域的研究进行综述，将有助于揭示TWEAK/Fn14信号调控干细胞增殖与分化的作用与机制，并为干细胞在疾病发生机制等基础研究、细胞治疗和组织工程等临床医学研究提供新的方向。

简介：目的：研究巴戟天寡糖（MorindaofficinalisHowoligosaccharides，MOO）诱导成肌细胞增殖、分化的机制并观察其是否可诱导心肌细胞标志物的表达，为临床探索运用心脏组织工程学治疗心肌梗死提供更有效的依据。方法：采用出生1～3d的SD大鼠乳离体差速贴壁法纯化培养双侧后肢骨骼肌成肌细胞的方法，用24h后的原代成肌细胞进行试验。实验分5组：空白对照组、5-氮杂胞苷（10μmol／ml）阳性药对照组、MOO各剂量（100gg／ml、300gg／ml、500μg／m1）组。分别检测以下指标：（1）观察加药前后成肌细胞形态学改变。（2）Desmin（结蛋白）鉴定。（3）加药前后成肌细胞对异丙肾上腺素（Isoprenaline，IP）的反应。（4）采用RT-PCR法检测成肌细胞中TGF-β1、GATA-4mRNA的表达。结果：（1）与空白对照组相比，MOO诱导48h后成肌细胞生长密集，胞浆丰富，增殖明显，具有较好的折光性。并呈一定方向性的长轴平行排列，细胞融合的肌管增多，分化良好，有明显自发性搏动的收缩现象，生长状态明显好于空白对照组。（2）与空白对照组相比，IP对阳性药对照组和MOO小剂量组成肌细胞正性变时作用不明显（P〉0．05）；而IP对MOO中剂量组和大剂量组成肌细胞正性变时作用显著（P〈0．05）。