简介：

简介：摘要目的基于微滴式数字PCR（ddRCR）技术建立EGFR-T790M突变检测方法，并对该方法进行系统性优化及评估。方法针对T790M突变，设计相关的探针引物，建立ddPCR反应体系，确立最佳退火温度并进行基本的性能验证。于2019年1至10月在山东第一医科大学附属肿瘤医院收集了72例NSCLC患者的循环游离DNA（cfDNA）样本并进行临床验证，利用Kappa检验分析与伯乐ddPCR产品的一致性。结果建立并优化ddPCR反应体系，线性评估示R2>0.99，空白检测限为突变微滴数目≥2，特异性良好，灵敏度分析示突变检测下限可达到0.05%，重复性及批间精密度变异系数（CV）<20%，准确度相对偏差在±10%范围内。对72例NSCLC患者的cfDNA样本进行验证，与伯乐ddPCR产品的一致性为91.67%（66/72，Kappa=0.749；P<0.001）。结论应用ddPCR成功建立非小细胞肺癌EGFR-T790M突变检测方法。

简介：摘要目的应用微滴式数字化(droplet digital)PCR方法检测McCune-Albright综合征(MAS)患儿GNAS已知热点突变，并探讨其在MAS诊断中的应用价值。方法研究对象为122名就诊于上海交通大学医学院附属瑞金医院儿科的MAS患儿，针对MAS致病基因GNAS的已知突变热点(R201H/C)，分别采用ddPCR技术、实时荧光焦磷酸解激活聚合反应技术(PAP)及二代测序方法检测其是否存在基因突变，并结合临床进行关联分析。结果122例MAS患儿中共89例完善了GNAS基因检测，发现存在突变者共57例。ddPCR、PAP及二代测序阳性率分别为77.42%、29.03%及56.25%。完善检测的经典三联征患者均检测出GNAS基因突变。其中，ddPCR方法在典型及不典型患儿外周血中阳性率分别为100%及73.1%，明显高于其余两种方法。性早熟合并骨病变患者GNAS突变检出率高于性早熟合并皮肤病变者，提示骨纤维结构不良伴性早熟是儿童MAS的临床诊断的重要依据。结论儿童MAS的内分泌表现以性早熟最为多见。骨纤维结构不良伴性早熟是临床诊断的重要权重因素。ddPCR灵敏度高，可为MAS的分子诊断提供帮助。

简介：摘要近年来数字PCR技术发展迅速，与传统PCR技术相比数字PCR可以对核酸分子进行绝对定量检测，并且具有高准确、高灵敏的优点。广泛应用于分子生物学领域和临床检测上，在癌症早期诊断、产前诊断、感染性疾病的早期检测、器官移植后监测等方面都有着重要的作用。

简介：1．@成报：调查发现，80％的新业务都要在同一个人打五次电话后才能谈成。48％的销售员在第一次电话后放弃；25％在打第二次电话后放弃；12％在打第三次后放弃：还有10％继续打电话，直到成功为止。

简介：1．3公里铁路＋20公里马路，是矿工刘焱华每周从矿上走回家的路程。因工资少舍不得坐车，周末休息时，他都会步行7个多小时，回家里种庄稼、照顾妻儿。这一走就走了20余年，

简介：微尺度流动能够一步到位地制备不同结构和功能、尺寸在微米量级的复合液滴.文章回顾了几种常见的基于复合液滴的微尺度流动方法,包括同轴电雾化、复合流动聚焦、微流控芯片、玻璃微毛细管等,并对各种技术的原理和进展进行了简要概括和分析.在这类流动中,不同种类的流体在一定的几何结构通道或外力场作用下平稳地拉伸成微细射流并最终破碎成复合液滴.在同轴电雾化和复合流动聚焦技术中,从毛细管流出的流体能够形成稳定的锥-射流结构,当外力作用改变时能够形成不同的流动模式.在微流控芯片和玻璃微毛细管技术中,流体被约束在固定管道内,不同管道构型下能够形成不同的流动形态.这些方法都采用纯物理机理,过程稳定、易于操作,制备的复合液滴粒径可控,单分散性好,微观结构可设计,在科学研究和工程实际中具有重要的应用价值.

简介：摘要荧光定量PCR检测方法具有灵敏度高、精确度高、检测范围宽、重复性好优势，本文就其方法对水体中的微囊藻进行检测。

简介：食物——最＂长寿＂的汉堡一个汉堡究竟可以放多久？答案恐怕只有试了才知道.美国一男子在不经意间就做了这个试验.1999年,他在麦当劳购买了汉堡,但随后就把它遗忘在了大衣的口袋里.前段时间,该男子惊讶地发现,这个汉堡竟然还完好无损!要知道它距离购买的时间已经14年了!

简介：爸爸是一位水利工程师，被派往一个干旱的地方研究如何节约用水。暑假里，我随妈妈去探望久别的爸爸。几个小时以后，飞机降落了，跟着妈妈下了飞机，我发现机场跑道周围是碧绿的草坪，草坪上还有星星点点的野花。出了机场，我又发现道路两旁栽着许多绿色植物。我真纳闷，这里不是干旱吗？怎么花呀、草呀都长得这么好呢？到了爸爸的住处，我发现这里家家门口都有一个圆球装置，厨房和卫生问里的水龙头旁有一些我看不懂的符号。爸爸看出我的疑惑，先向我和妈妈简单介绍了屋里的生活设施，然后说：“晶晶，爸爸明天让你参观‘一滴变三滴’系统。”一滴变三滴？我猜想这个系统应该和水有关。

简介：【摘要】目的：分析数字PCR及实时荧光定量PCR技术在新型冠状病毒感染核酸检测中的差异。方法：对本院2022年12月-2023年9月30日的100例疑似新型冠状病毒感染患者进行研究，以数字PCR及实时荧光定量PCR技术进行检测，分析两种技术的准确度、特异性与灵敏度。结果：两种技术检测方式的阳性例数、准确度与灵敏度差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：在低病毒载量的样本中，数字PCR检测价值更高，提高敏感性，减少假阴性，对于初期感染者，快速精准将其隔离，对疫情防控起着决定性意义。

简介：摘要目的探讨微滴式数字聚合酶链反应（ddPCR）在检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血循环肿瘤DNA（ctDNA）中表皮生长因子受体（EGFR）突变的应用价值。方法收集山西省肿瘤医院2018年8月至2019年3月就诊的63例NSCLC患者外周血标本，采用ddPCR检测患者外周血EGFR敏感突变，并与对应组织扩增阻滞突变系统PCR（ARMS-PCR）检测结果比较。采用Kappa检验对两种检测方法一致性进行分析。结果63例患者中，ddPCR共检测到EGFR敏感突变31例（49.2%），包括第18号外显子G719X突变1例（1.6%）、第19号外显子缺失（E19-Del）12例（19.0%）、第20号外显子T790M突变（T790M）11例（17.5%）、第21号外显子L858R突变（L858R）7例（11.1%）；31例突变患者中7例（22.6%）为双突变。ARMS-PCR检出上述4种突变26例（41.3%），依次有0例、12例（19.0%）、6例（9.5%）、8例（12.7%）；26例突变患者中双突变5例（19.2%）。1例患者ARMS-PCR检测L858R阳性而ddPCR检测L858R阴性。两种检测方法一致率为90.3%（κ=0.8，P<0.05）。31例ddPCR检测突变患者外周血ctDNA EGFR突变中位丰度1.7%（0.04%~23.60%），其中E19-Del中位丰度为2.5%（0.35%~22.70%），T790M突变中位丰度为0.6%（0.04%~14.00%），L858R突变中位丰度为2.3%（0.20%~23.60%）；ddPCR检测EGFR基因突变丰度<1%者10例，占所有突变者的32.6%（10/31），ARMS-PCR仅检出其中5例。接受酪氨酸激酶抑制剂（TKI）治疗且发生获得性耐药的19例患者中，ddPCR检出T790M突变11例（57.9%），而无TKI用药史患者均未检测出此突变。11例T790M突变患者中，突变丰度<0.1%者1例，0.1%~2.0%者7例，>2.0%者3例。结论ddPCR检测NSCLC患者外周血ctDNA中EGFR基因突变无创、快捷、灵敏度高且可绝对定量，为取样困难或因获得性耐药需重复取样肺癌患者进行EGFR-TKI靶向治疗提供了一个新的检测途径，个体化靶向治疗提供重要依据。

简介：

简介：流动的液体是本案例的创作原点。设计师利用大量的曲线及不平衡的线条，营造出个流动的空间，令人在视觉上也能感受节奏的变化。用作摆放货品的层架上亦布满雨点通花，一列射灯透过这些雨点通花，使雨点的影子看来仿如从天降到地面，不仅增强了视觉效果，更增添了万千女儿味。

简介：摘要：砂型3D打印技术作为一种新型成型工艺技术，有效解决了手工砂型生产效率低、尺寸精度不高且成型结构简单的问题。本文对自研微滴喷射大型砂型3D打印装备的工艺参数调节、多喷头打印墨路系统、国产树脂砂成分配比等进行了研究，通过打印大型砂型，得到了满足铸造技术要求的砂型零件，并浇铸出满足工程化应用要求的镁合金铸件，进而验证自研大型砂型3D打印装备的打印性能。

简介：摘要目的探讨利用免疫磁珠富集技术联合巢式RT-PCR。方法检测非小细胞肺癌患者(NSCLC)手术前后外周血微转移的预后价值。方法应用免疫磁珠联合巢式LUNX-mRNART-PCR检测80例NSCLC患者手术前后外周血微转移，研究其与临床和病理特征的相关性和预后价值。结果手术前和手术后，LUNX表达阳性率分别为41例（51.3%）和28例（35.0%）；手术前LUNX表达阳性率与病理分期有关。手术后LUNX表达阳性率与病理分期、病理类型、体重减轻和KPS评分有关。手术前LUNX表达阳性和阴性患者的4年生存率分别为26.8%和35.9%；手术后LUNX表达阳性和阴性患者的4年生存率分别为17.8%和38.5%；多因素分析显示，手术后LUNX表达阳性是一独立不良预后因素。结论免疫磁珠富集技术联合巢式RT-PCR方法是检测NSCLC患者外周血微转移的敏感方法，手术后检测微转移有预后价值；微转移阴性患者比阳性患者预后好

简介：用含卡那霉素的培养基首先对转几丁质酶基因烟草种子和烟苗进行初步筛选鉴定,再用WesternBlot进一步证实抗卡那霉素的转基因烟苗中外源转几丁质酶基因的表达.然后研究半嵌套式PCR(Semi-nestedPCR)检测转几丁质酶基因烟草植株及其烤后烟叶中的所转目的基因;利用限制性内切酶HindⅢ对半嵌套式PCR产物进行酶切,从而验证半嵌套式PCR产物是否为真正的目的基因.研究结果表明,半嵌套式PCR是一种快速、灵敏的检测转几丁质酶基因烟草植株及烤后烟叶的方法.

简介：在人教版高中《生物·选修3·现代生物科技专题》关于PCR的教学中，有几个问题会经常困扰教师和学生。下面就列举这些问题并作以解答。

简介：时间嘀嗒嘀嗒在不知不觉中就过去了，如果我们忽视培养孩子的时间观念，那么孩子日后的各种集体和社会生活都会受到影响。做到合理利用时间和遵守规则都是必须的，家长们可以采用一些形象的方法逐步帮助孩子形成良好的生活习惯，相信“小拖拉”“小磨蹭”也会越来越少的。

简介：摘要数字PCR（dPCR）是近年迅速发展起来的一种绝对定量的技术，该技术将含有DNA模板的反应体系分配到大量独立的反应单元中进行PCR，根据泊松分布和统计阳性信号来计算DNA拷贝数。与传统的qPCR相比，dPCR不依赖于扩增曲线，不受扩增效率的影响，具有较高的准确度和重复性，可以实现绝对定量。本文综述了数字PCR发展历史以及在感染性疾病分子诊断、肿瘤液体活检、产前诊断等方面的应用进展，并展望了该技术的应用前景。