简介:摘要目的构建肺移植心死亡猪动物模型,揭示体外肺灌注技术在肺损伤修复中的作用。方法将巴马小型猪随机分为供体组和受体组各8只,供体组再随机分为实验组(即体外肺灌注组)和对照组各4只(购自东莞松山湖明珠实验动物科技有限公司)通过气管插管后脱氧的办法诱导缺氧并导致心死亡,实验组供体猪肺获取后经低温保存10 h取出,连接管道并建立体外肺灌注系统,监测氧合指数,气道压力,肺血管阻力,肺顺应性,左房压力等指标了解灌注效果并最终移植到受体猪中,评价体外肺灌注技术对供体肺的修复作用。运用t检验、Kruskal-Wallis检验、χ2检验完成统计学分析。结果体外肺灌注期间,实验组氧合指数明显升高,1 h及4 h的氧合指数分别为(279.0±17.0)、(442.5±17.5) mmHg(1 mmHg=0.133 kPa,t=15.176,F=0.146,P<0.01);肺血管阻力明显下降,1 h及4 h分别为(571.43±57.14)、(314.29±28.58) dynes/s/cm5(t=9.258,F=2.455,P<0.01);肺动脉压力明显下降,1 h及4 h分别为(14.0±1.0)、(8.5±0.5) mmHg(t=12.011,F=0.158,P<0.01);气道压力明显下降1 h及4 h分别为(17.0±1.0)、(12.5±0.5) cmH2O(1 cmH2O=0.098 kPa,t=8.878,F=0.158,P<0.01)。移植后实验组氧合指数表现稳定,对照组氧合指数在120 min后出现下降,而且实验组氧合指数基线较对照组高。结论该方法可构建出重复性强的体外肺灌注心死亡猪动物模型。
简介:摘要目的通过建立大鼠心死亡供肾常温机械灌注(normothermic mechanical perfusion,NMP)模型,探讨空气氧合NMP和氧气氧合NMP对心死亡供肾损伤修复的影响。方法取12只12~14周龄的健康雄性SD大鼠,建立大鼠心脏死亡供体器官捐献(donation after cardiac death,DCD)模型。大鼠肾脏在热缺血损伤30 min并冷保存8 h后,采用随机数字表法随机分为使用氧气氧合NMP(O组,6只)、空气氧合NMP(A组,6只)2 h。另取相同数量大鼠,采用随机数字表法随机平分为开腹即获取肾组织的假手术组(C组,6只)和心死亡后仅静态冷保存8 h的心死亡肾脏静态保存组(SCS组,6只)作为O组和A组的对照。微板法检测肾灌注液损伤指标肌酐(Cr)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH)水平变化,HE染色评定肾组织中肾损伤指标,免疫组织化学和蛋白质印迹法检测髓过氧化物酶(MPO)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达,酶联免疫吸附法检测TNF-α和IL-6水平,硫代巴比妥酸和WST-8法测定脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。采用t检验和单因素方差分析比较组间变量的差异。结果氧气氧合NMP体系(O组)的肾动脉处灌注液氧分压为(576.3±68.2)mmHg,空气氧合NMP体系(A组)氧分压为(137.0±39.1)mmHg,组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色结果显示,SCS组、O组和A组的病理损伤评分分别为(7.0±0.1)分、(5.0±0.9)分和(2.5±0.5)分,SCS组肾损伤评分显著高于后两组,组间差异均有统计学意义(P均<0.05);A组评分亦较O组显著降低,差异亦有统计学意义(P<0.05)。O组供肾NMP前后灌注液的△Cr、△AST、△LDH分别为(43.9±52.8)μmol/L、(532.3±52.8)U/L和(9998.0±2014.4)U/L,A组上述指标分别为(12.6±3.5)μmol/L、(49.1±50.4)U/L和(1477.0±810.4)U/L,均较O组显著降低,且差异均有统计学意义(P均<0.05)。O组灌注后肾组织中MDA含量和SOD活力分别为(0.192±0.018)mmol/g和(0.6±0.3)×103 U/g,A组为(0.162±0.023)mmol/g和(1.7±0.4)×103 U/g;O组TNF-α和IL-6水平分别为(124.376±19.635)ng/g和(4.038±1.026)×103 ng/g,A组为(89.331±13.123)ng/g和(1.774±0.518)×103 ng/g。与O组相比,A组肾组织中MDA含量及TNF-α和IL-6水平降低、SOD活力升高,组间差异均有统计学意义(P<0.05)。半定量分析结果显示,A组MPO和ICAM-1组织表达均较O组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论大鼠空气氧合NMP,可有效模拟肾灌注氧气压力的生理状态,降低氧化应激和炎症损伤,更有利于DCD供肾缺血损伤的修复。
简介:摘要目的探讨体外膜肺氧合(ECMO)技术对控制型心死亡模型猪供体小肠移植后早期肠道功能的影响。方法选取体质量22~25 kg白色杂种猪48只,按数字表法随机分为正常对照组(LD组)、心死亡供体组(DCD组)、ECMO支持1 h组(E1组)和ECMO支持3 h组(E3组)共4组,每组12只;每组再随机分为供体组和受体组2个亚组,每个亚组各6只。LD组的供体亚组常规截取移植用小肠;DCD组的供体亚组先建立DCD模型,然后截取移植用小肠;E1、E3组的供体亚组,先建立DCD模型,再分别采用ECMO支持1、3 h后,截取移植用小肠。各受体亚组行小肠移植手术。分别于肠移植前、移植后再灌注1 h及移植后第1、3、5、7天经移植肠造口活检钳切取各受体亚组移植肠组织制备病理切片,采用Park/Chiu评分系统评估肠组织损伤程度,透射电镜下观察移植术后第7天小肠黏膜超微结构,免疫组织化学染色观察移植术后再灌注1 h时肠黏膜细胞凋亡因子caspase-3表达水平。分别于移植前和移植术后第1、3、5、7天采集各受体亚组猪颈外静脉血,检测血清D-乳酸水平评估肠黏膜受损情况及肠道通透性;移植术后第7天检测血浆D-木糖最大浓度评估移植肠吸收能力。结果(1)各受体亚组组织病理学评分:小肠移植术前,各组移植肠均有肠黏膜损伤,其中E3组肠黏膜损伤最重,肠黏膜损伤程度Park/Chiu评分E3组高于LD组、DCD组及E1组,差异均有统计学意义(P值均<0.05),而LD组、DCD组、E1组间Park/Chiu评分比较,差异均无统计学意义(P值均>0.05)。小肠移植术后再灌注1 h和术后第1天时,DCD组Park/Chiu评分最高,明显高于LD组、E1组、E3组,差异均有统计学差异(P值均<0.05);而LD组、DCD组、E1组Park/Chiu评分比较,差异均无统计学意义(P值均>0.05)。术后第3、5、7天,LD组、DCD组、E1组、E3组Park/Chiu评分差异均无统计学意义(P值均>0.05)。(2)各受体亚组肠黏膜超微结构:术后第7天各组移植肠超微结构示基本恢复正常,LD组与E1组、E3组紧密连接结构与微绒毛改变无明显差异,而DCD组紧密连接结构相对较短、间隙较大。(3)各受体亚组肠黏膜细胞凋亡因子caspase-3表达水平:小肠移植术后再灌注1 h时,DCD组、E3组caspase-3相对表达水平分别高于LD组和E1组,差异均有统计学意义(P值均<0.05);而DCD组与E3组以及LD组与E1组比较,差异均无统计学意义(P值均>0.05)。(4)各受体亚组血浆D-乳酸水平:术后第1天和第3天,DCD组、E3组血浆D-乳酸水平分别高于LD组和E1组,差异均有统计学意义(P值均<0.05);DCD组与E3组、LD组与E1组相比,差异无统计学意义(P值均>0.05)。术后第5、7天,DCD组血浆D-乳酸水平高于LD组、E1组及E3组,差异均有统计学意义(P值均<0.05),LD组、E1组、E3组血浆D-乳酸水平差异均无统计学意义(P值均>0.05)。(5)各受体亚组移植肠吸收功能:肠移植术后第7天各组血浆D-木糖最大浓度由高至低依次为LD组、E1组、E3组和DCD组,4组间的比较,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论ECMO支持1 h可改善移植后早期移植肠吸收功能,减轻移植肠缺血再灌注损伤;降低再灌注时移植肠黏膜caspase-3蛋白表达、减少细胞凋亡可能是其保护机制之一。
简介:这事看上去不像谋杀,至少不像一般的谋杀。乔治是偶然发现这事的。这天,乔治到医院来探望一位病人。乔治在警察局工作了三十年,其中二十三年都在凶杀组工作,如今年纪大了,已经正式退休。他正在走廊上慢慢走着时,突然一位护理小姐从旁边的房间里冲出来,一脸的惊慌不安,顺着走廊跑了。乔治感到好奇,他推开护理小姐留下的半掩的门,走进那个病房。
简介:很多年前,我十七岁的时候,有个晚上又黑又冷.风从几百里外的海面上刮过来,在空荡荡的马路上盘旋呼啸,穿透路边的林木发出巨大声响.露水在枝干上蒸腾、流淌,它们不断砸在树洼的积水上,好像下着阵雨让人畏惧.四际无人.这些我们都知道.但这是一条必由之路.我们从饭馆暖和的靠背椅上站起来,揉着惺忪的眼睛,肩并肩地走了两站路,故意从一堵矮墙上跳进刚刚开张不久的足底按摩院.
简介:在年度摄影佳作巡回展上,一幅题为'投入死亡'的照片引起了观众的极大关注。照片上是一个正在划火柴的小姑娘,蜡烛旁摆着许多漂亮的礼物,背后却有一个美丽的少妇,面对照相机,正从窗外飞身下落。照片下有这样一段说明:'这张惊人的照片,由巴特·肯尼迪于某日晚上9时30分摄于其布鲁克林的摄影室。当肯尼迪先生按下快