简介:摘要采用水蒸气蒸馏法对海风藤(Piperkadsura(Choisy)Ohwi)挥发油进行提取,并运用GC-MS对其成分进行分析和鉴定。结果分离出35个峰,确定了24种化合物,按峰面积归一化法计算各组成化合物的相对百分含量。所鉴定化合物的含量占全油的86.77%,其主要成分为十六醇(36.87%)、花生酸甲酯(12.78%)、(Z,Z)-9,12-十八碳二烯酸(12.39%)、α,α,4-三甲基-3-环己烯-1-甲醇(4.67%)、(R)-4-甲基-1-异丙基-3-环己烯-1-醇(4.07%)、(Z)-11-十六烯-1-醇(3.55%)、2,4-环辛二烯-1-醇(2.84%)和棕榈酸(1.95%)。
简介:摘要目的探讨海风藤提取物(KPSE)对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的软骨细胞损伤的保护作用及其机制。方法采用IL-1β处理大鼠软骨细胞建立软骨细胞损伤模型。0.1、1.0、10.0 mg/ml浓度KPSE与10 ng/ml IL-1β处理细胞(分别记为KPSE-L+IL-1β组、KPSE-M+IL-1β组、KPSE-H+IL-1β组)。将anti-miR-con、anti-miR-499a、miR-con、miR-499a mimics转染至软骨细胞并加入10 ng/ml的IL-1β培养(分别记为IL-1β+anti-miR-con组、IL-1β+anti-miR-499a组、IL-1β+miR-con组、IL-1β+miR-499a组)。分别将anti-miR-NC、anti-miR-499a转染至软骨细胞后加入10 mg/ml的KPSE及10 ng/ml的IL-1β培养(分别标记为anti-miR-NC+KPSE-H+IL-1β组、anti-miR-499a+KPSE-H+IL-1β组)。噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞活力,酶联免疫吸附法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、IL-6表达,蛋白质印迹法检测裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(cleaved-Caspase-3)表达,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测微小核糖核酸-499a(miR-499a)表达。两组间比较行t检验,多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用SNK-q检验。结果KPSE+L+IL-1β组、KPSE+M+IL-1β组、KPSE+H+IL-1β组细胞吸光度值显著高于IL-1β组(0.50±0.05、0.73±0.07、0.79±0.08比0.38±0.03),cleaved-Caspase-3表达(0.71±0.07、0.57±0.05、0.48±0.04比0.83±0.08)、细胞凋亡率[(22.43±2.17)%、(16.38±1.54)%、(9.85±0.91)%比(27.86±2.61)%]、TNF-α[(61.02±6.23)、(40.56±3.57)、(30.15±2.86) pg/ml比(86.37±8.12) pg/ml]、IL-1β[(516.76±41.05)、(362.45±32.87)、(214.59±20.54) pg/ml比(637.15±53.32) pg/ml]和IL-6表达[(531.52±51.68)、(418.36±40.53)、(246.28±21.08) pg/ml比(584.11±55.05) pg/ml]显著低于IL-1β组,差异有统计学意义(F=83.568、70.682、103.211、291.687、402.183、250.447,P<0.05)。KPSE+L+IL-1β组、KPSE+M+IL-1β组、KPSE+H+IL-1β组细胞miR-499a表达显著高于IL-1β组(0.53±0.05、0.78±0.07、0.93±0.09比0.34±0.03),差异有统计学意义(F=130.619,P<0.05)。IL-1β+miR-499a组细胞吸光度值显著高于IL-1β+miR-con组(0.78±0.06比0.37±0.02),cleaved-Caspase-3表达(0.37±0.03比0.82±0.09)、细胞凋亡率[(11.56±1.04)%比(26.91±2.45)%]、TNF-α[(43.05±4.06) pg/ml比(85.61±8.17) pg/ml]、IL-1β[(317.81±27.54) pg/ml比(637.01±58.68) pg/ml]、IL-6表达[(264.59±24.13) pg/ml比(578.30±51.04) pg/ml]显著低于IL-1β+miR-con组,差异有统计学意义(t=24.431、14.653、20.178、12.297、10.563、17.138,P<0.05)。anti-miR-499a+KPSE+H+IL-1β组细胞吸光度值显著低于anti-miR-NC+KPSE+H+IL-1β组(0.38±0.04比0.78±0.06),cleaved-Caspase-3表达(0.78±0.07比0.46±0.04)、细胞凋亡率[(19.63±1.52)%比(10.23±1.01)%]、TNF-α[(63.22±6.24) pg/ml比(32.57±3.16) pg/ml]、IL-1β[(456.97±43.81) pg/ml比(204.61±18.26) pg/ml]、IL-6表达[(398.74±34.12) pg/ml比(257.19±22.41) pg/ml]显著高于IL-1β+miR-con组,差异有统计学意义(t=16.133、12.041、17.599、13.431、15.125、25.022,P<0.05)。结论KPSE可降低IL-1β诱导的软骨细胞损伤,其机制可能与上调miR-499a表达有关。
简介:海风亲吻我的面颊,它清凉而咸咸的气味,净化着我呼吸的空气;海风轻抚我的肌肤,它柔情的触摸,温存而大胆,就像一个情人;海风拂动我的发丝,它永远不息的运动,澄清我的大脑并赋予我平静;海风驱散我心中的阴霾,带给我无穷的快乐和鼓舞,就像大海宽广的胸怀;