简介:目的探讨卵母细胞玻璃化冷冻后解冻行体外受精-胚胎移植的临床结局。方法回顾性分析2010年1月至2014年10月北京大学第三医院生殖医学中心68例不孕症患者卵母细胞玻璃化冷冻后解冻行体外受精-胚胎移植(invitrofertilization-embryotransfer,IVF-ET)的复苏率、2PN受精率、胚胎着床率、流产率和分娩率等临床结局。结果解冻玻璃化冻存的卵母细胞756枚,复苏率80.69%(610/756),其中MII卵母细胞519枚,2PN受精率53.56%(278/519)。68例患者中,12例无胚胎形成,占17.65%。56例患者共移植66个周期,其中新鲜胚胎移植51个周期,解冻胚胎移植15个周期。新鲜胚胎移植51个周期的临床妊娠率为54.90%(28/51),活胎分娩率为45.10%(23/51)。解冻胚胎移植15个周期的临床妊娠率为60.00%(9/15),活胎分娩率为46.67%(7/15)。累积妊娠率为55.88%(38/68)。每解冻一枚卵母细胞获得活胎分娩率为5.03%(38/756)。结论卵母细胞玻璃化冷冻技术在取卵日不能获得精子的患者中应用,可以获得良好的妊娠结局。
简介:“玻璃化转变”定义是指非晶聚合物的力学性质随温度变化,出现玻璃态与高弹态之间的转变。对应的转变温度即为玻璃化转变温度Tg。事实上,玻璃化转变并非是高聚物特有的现象,范围广泛的许多其它物质也呈现同样的玻璃化转变现象^[7],比如脱和冷冻食品基质经常显示出典型的无定形聚合物转变。食品中无定形基质包括单糖、低聚糖、多糖、蛋白质、水、盐等。它们的物理状态决定了食品的物理性质和质构,并在食品加工和贮藏中影响食品的物理和化学变化,而这些无定型基质的玻璃化转变则是影响食品物理状态的重要因素。食品中的很多疸,包括脱干燥食品贮藏过程中常见的发粘、结块、塌陷、褐变、结晶等品质下降现象,冷冻食品中常见的氧化、冷冻变性、结晶,微胶囊包裹中的发粘、油脂溢出、风味散失等现象,以及面包老化、糖果的发烊、返砂问题等,实质上都是食品中无定形基质发生玻璃化转变而引起的结果。
简介:摘要目的评价取卵日取精失败周期进行卵母细胞冷冻是否影响胚胎质量及发育潜力。方法收集2014年1月至2017年12月在浙江大学医学院附属邵逸夫医院生殖中心因男方严重少弱精子症或者无精子症取卵日取精失败或者无法获得足够精子而行卵母细胞玻璃化冷冻的30例患者作为冷冻组。选取同期的220例新鲜卵母细胞的患者作为新鲜组。回顾性比较两组的受精率、优胚率、妊娠率、着床率及活产率。结果卵母细胞复苏存活率为91.4%(180/197)。冷冻组中24例行胚胎移植,妊娠14例,新鲜组31例行胚胎移植,妊娠18例。冷冻组两原核(2PN)的受精卵数、胚胎数及优质胚胎数明显少于新鲜组,分别为:(3.7±2.5比7.3±4.8)、(3.3±2.5比7.2±4.8)及(1.2±1.8比2.9±2.7)(均P<0.05)。冷冻组受精率77.2%(115/149)和优质胚胎率36.6%(37/101)均低于新鲜组,分别为:77.6%(1 637/2 109)及40.9%(651/1 591)(P>0.05)。冷冻组妊娠率58.3%(14/24)高于新鲜组58.1%(18/31),每成熟卵母细胞着床率和每成熟卵母细胞活产率为10.8%(15/138)和10.8%(15/138),均高于新鲜组9.6%(21/218)及8.7%(19/218),差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论卵母细胞玻璃化冷冻保存可能导致胚胎的质量有所下降,但是胚胎的发育潜力仍是可观的,并可能获得比新鲜组更高的妊娠率、着床率和活产率。
简介:摘要目的探讨玻璃化冷冻和程序化冷冻对猕猴卵巢组织的冷冻保存效果。方法取新鲜的猕猴卵巢组织随机分成对照组(新鲜卵巢组织)、玻璃化冷冻组和程序化冷冻组,分别进行HE染色、窦前卵泡的分类计数及免疫染色,比较3组卵巢组织内卵泡形态学、各级卵泡正常率及磷酸化组蛋白H3(PHH3)的表达量的差异。结果①HE染色:3组中,始基卵泡、初级卵泡正常率差异均无统计学意义(P均>0.05);程序化冷冻组单层次级卵泡正常率[40.6%(28/69)]均低于玻璃化冷冻组[53.5%(38/71)]、对照组[60.7%(34/56)],3组间差异有统计学意义(P=0.044),但玻璃化冷冻组、对照组间差异无统计学意义(P>0.05);玻璃化冷冻组、程序化冷冻组多层次级卵泡正常率[23.4%(11/47),16.7%(7/42)]均明显低于对照组[57.3%(39/68)](P均<0.001),玻璃化冷冻组多层次级卵泡正常率高于程序化冷冻组,但差异无统计学意义(P>0.05)。②分离卵泡比较:玻璃化冷冻组、程序化冷冻组初级卵泡正常形态率均接近对照组,差异无统计学意义(P>0.05);玻璃化冷冻组和程序化冷冻组次级卵泡正常率[38.2%(34/89),23.7%(23/97)]明显较低,与对照组[56.4%(61/108)]比较差异均有统计学意义(P均<0.001);玻璃化冷冻组的次级卵泡正常形态率明显高于程序化冷冻组,差异有统计学意义(P<0.001);③ PHH3染色:玻璃化冷冻组颗粒细胞PPH3的阳性表达率接近对照组(P>0.05),程序化冷冻组卵泡颗粒细胞PHH3阳性表达率(58.72%±12.31%)明显低于对照组(67.58%±8.45%,P=0.04)和玻璃化冷冻组(62.87%±9.94%,P=0.03)。结论玻璃化冷冻和程序化冷冻均能有效地保存卵巢组织,但玻璃化冷冻对卵巢组织冷冻和复融过程中各级卵泡及颗粒细胞形态学的损伤明显低于程序化冷冻,更适合下一步人类卵巢组织的冷冻保存的研究。
简介:目的探讨人卵裂期胚胎和囊胚玻璃化冷冻解冻后复苏效果及妊娠结局。方法回顾性分析434个卵裂期胚胎(卵裂组)和102个囊胚解冻周期(囊胚组)的临床资料,比较采用玻璃化冷冻解冻后的复苏率及妊娠结局。结果囊胚组患者的临床妊娠率和胚胎种植率分别为63.73%(65/102)和45.79%(87/190),卵裂组分别为42.82%(185/432)和24.17%(241/997),两组比较,差异均有统计学意义(P均〈0.05);囊胚组患者的复苏率、流产率和异位妊娠率分别为98.45%(190/193)、12.31%(8/65)和0(0/65),卵裂组分别为97.55%(997/1022)、13.51%(25/185)和2.16%(4/185),两组比较,差异均无统计学意义(P均〉0.05)。卵裂组中,卵裂球完全存活患者的临床妊娠率和胚胎种植率分别为44.62%(170/381)和25.57%(224/876),非完全存活者分别为29.41%(15/51)和14.05%(17/121),两组比较,差异均有统计学意义(P均〈0.05)。结论囊胚解冻移植的妊娠结局优于卵裂期胚胎,卵裂期胚胎解冻后胚胎的完整性影响胚胎种植。
简介:摘要目的对比载杆玻璃化冷冻法与程序冷冻法对人早期胚胎冷冻复苏的效果。方法收集并整理人早期胚胎冷冻复苏的相关资料,根据冷冻法的不同把他们分成研究组A和研究组B,研究组A采用载杆玻璃化冷冻法,研究组B采用程序冷冻法,周期数依次为122、64个。对比两组胚胎复苏的相关指标。结果研究组A的胚胎复苏率、胚胎完整率依次为97.1%、94.5%,研究组B依次为75.1%、70.8%,研究组A都比研究组B高;研究组A的胚胎丢失率的1.5%,研究组B是3.8%,研究组A比研究组B低,对比差异都较大(P<0.05)。研究组A的胚胎植入率、临床妊娠率分别是29.1%、59.8%,研究组B分别是18.0%、37.1%,研究组A都比研究组B高,对比差异较大(P<0.05)。结论载杆玻璃化冷冻法对人早期胚胎冷冻复苏的效果优于程序冷冻法,可明显提升胚胎植入率与妊娠率,更值得推广。
简介:摘要目的探讨玻璃化冷冻和组织移植对小鼠卵巢组织的影响。方法将雌性ICR小鼠分为3组:正常对照组(卵母细胞体外培养及受精,n=9)、新鲜移植组(卵巢组织移植后卵母细胞体外培养及受精,n=9)、冷冻移植组(卵巢组织玻璃化冷冻复苏-移植、卵母细胞体外培养及受精,n=9)。同时,为了更为直接地说明玻璃化冷冻对于卵泡数量的影响和卵巢移植后内分泌功能的改变情况,本研究还设置了冷冻复苏组(卵巢组织玻璃化冷冻复苏,n=6)和卵巢去势组(卵巢组织切除,n=6)。卵巢组织移植3周后,通过苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色计算各组小鼠的卵泡数量、CD31免疫组织化学染色观察卵巢组织新生血管形成、Masson染色观察卵巢组织纤维化、酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清性激素水平,并统计获卵数、体外受精数量和形成囊胚数量。结果新鲜移植组和冷冻移植组小鼠的卵巢组织中总卵泡数量均较正常对照组明显减少(均P<0.001),且都明显少于冷冻复苏组(均P<0.001);新鲜移植组小鼠卵巢组织CD31阳性率明显高于正常对照组(P=0.044),冷冻移植组小鼠高于正常对照组,但差异无统计学意义(P=0.162);新鲜移植组和冷冻移植组小鼠卵巢组织纤维化面积百分率均明显高于正常对照组(P=0.004;P=0.005);新鲜移植组和冷冻移植组小鼠血清雌二醇水平均明显低于正常对照组(P=0.005;P=0.001),但明显高于卵巢去势组(P=0.011;P=0.035),血清卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)水平均明显高于正常对照组(P=0.040;P=0.012),但明显低于卵巢去势组(P=0.001;P=0.004);新鲜移植组和冷冻移植组小鼠的获卵数均较正常对照组明显减少(均P<0.001),新鲜移植组小鼠的获卵数高于冷冻移植组,但差异无统计学意义(P=0.272);新鲜移植组和冷冻移植组卵母细胞的体外受精数量和囊胚数均明显低于正常对照组(均P<0.001)。新鲜移植组和冷冻移植组小鼠在总卵泡数量、CD31阳性率、纤维化面积百分率、血清雌二醇和FSH水平、受精数和形成囊胚数上差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论小鼠卵巢组织在接受玻璃化冷冻复苏-移植后能够恢复卵泡生长、内分泌功能以及生育功能,证实利用玻璃化冷冻技术进行卵巢组织冻存可以作为女性生育力保存的一个有效手段。玻璃化冷冻和组织移植均会造成卵巢组织中的卵泡损失并影响生育能力,移植后阶段是卵巢组织冷冻复苏-移植过程中卵泡损失的主要阶段,组织移植是影响卵巢组织冷冻复苏-移植效果的主要因素。