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  • 简介:目的构建稳定过表达的miR-31转基因小鼠,检测其主要组织器官中miR-31的表达变化情况并对在体miR-31过表达的应用提供合格的工具鼠。方法使用Gatewaycloning技术构建miR-31过表达载体,使用DNA显微注射技术将构建好的载体注入受精卵内,随后转移至假孕母鼠内,待其自然生产。将新生小鼠提取尾部DNA,PCR及琼脂糖凝胶电泳鉴定miR-31过表达阳性小鼠,筛选阳性小鼠并饲养繁殖。另取阳性小鼠,提取主要组织器官的miRNA并使用RT-PCR检测其miR-31的表达量。同时对比阳性小鼠和野生型小鼠神经系统中Nestin的表达和神经干细胞的数量。结果成功构建了miR-31过表达转基因小鼠,并在屏障环境下饲养繁殖至14代以上。各主要组织器官miR-31的表达均升高且稳定表达。阳性小鼠Nestin的表达和神经干细胞数量均高于野生型小鼠。结论通过使用Gatewaycloning技术成功构建了miR-31过表达转基因小鼠,且在各代小鼠中miR-31的表达稳定,神经系统内的神经干细胞数量多于野生型小鼠,可为进一步研究miR-31过表达后在体内的功能和神经系统疾病的治疗提供良好的工具小鼠。

  • 标签: MiR-31 转基因 FVB小鼠
  • 简介:WRKY抄写因素响应关於生命、不能生活的压力有许多规章的角色。在这研究,我们孤立被稻瘟病真菌Magnaporthegrisea和植物生长素导致的米饭WRKY基因(OsWRKY31)。这基因编码211氨基酸的残余的多肽并且属于可能在单音的简易窄床和dicot植物的分叉以后发源的米饭WRKY基因家庭的亚群。OsWRKY31被发现对洋葱外皮房间的原子核局部性短暂地表示OsWRKY31-eGFP熔化蛋白质。与一个Gal4DNA有约束力的领域熔化的OsWRKY31和它的异种的分析显示OsWRKY31在酵母举办transactivation活动。OsWRKY31基因的Overexpression被发现与M对感染提高抵抗。grisea,和展出的转基因的线减少了侧根形成和延伸与相比野类型并且RNAi植物。线与在表示上显示出许多防卫相关的基因的组成的表示例如PBZ1和OsSci2,以及早植物生长素反应基因,例如OsIAA4和OsCrl1基因。而且,植物与对在高集中的外长地供应的IBA,NAA和2,4-D在表示上不太敏感,在OsWRKY31基因的表示上建议那可能改变植物生长素反应或运输。这些结果也建议OsWRKY31可能在米饭是在植物生长素反应和防卫反应的信号转导小径的一个普通部件。

  • 标签: 转基因水稻 抗病性 WRKY转录因子 基因表达