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  • 简介:目的:研究磷脂化修饰对重组人超氧化物歧化酶(SOD)进入人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)、人心肌细胞(HCM)能力影响。方法:分别运用流式细胞术和蛋白印迹分析磷脂化修饰超氧化物歧化酶(PC-SOD)和SOD与HCAEC、HCM结合能力,并用激光共聚焦显微术分析修饰前后SOD在细胞中定位。结果与结论:磷脂化修饰可显著增强PC-SOD与细胞亲和力,并可显著增强PC-SOD进入人冠状动脉内皮细胞和人心肌细胞能力。

  • 标签: 超氧化物歧化酶 磷脂化 细胞亲和力
  • 简介:基因芯片技术具有高通量、高度平行性、高度自动化特点。在对传染病病原体研究中,基因芯片技术已应用于耐药性相关遗传多态性分析、基因分型、生物种系遗传进化分析、宿主与病原体相互关系分析、病原体检测等。但在病原体检测方面,与检测细菌相比,基因芯片技术对病毒高通量检测难度较大。简要介绍了目前基因芯片技术在病毒性病原体检测中研究进展、所采用探针类型及设计原则、基因芯片杂交结果影响因素等。

  • 标签: 基因芯片 病毒 检测 鉴定
  • 简介:目前,生产转基因动物难度很大,成功率很低,这是因为制备转基因动物主要方法是向受精卵原核中注射DNA。这种方法有其弱点,首先作为外源基因受体细胞受精卵数量有限;其次外源基因整合和表达筛选工作不能在细胞水平上进行,只能在子代动物出生后,即在个体水平上进行选择,这就增加了工作量,而且周期长,成功率低,成本大,在大动物上实施起来尤其困难。这就要求我们找到一种更为有效而又简捷转基因动物制备方法。利

  • 标签: 精原干细胞 转基因动物 体内转染 外源基因 小鼠 曲细精管
  • 简介:目的:设计合成新型2-喹诺酮类Polo样激酶1(Plk1)抑制剂。方法:以Plk1抑制剂ON01910为先导化合物,利用生物电子等排原理设计一系列2-喹诺酮类衍生物,用Autodock软件将该类化合物与Plk1进行分子对接和虚拟筛选,计算结合自由能;以取代氯(溴)苄为起始原料,先后经巯基乙酸取代、双氧水氧化、与(对甲氧基)苯胺酰化,再经环合、水解制得目标化合物。结果:设计化合物大多数与Plk1结合自由能均比ON01910低,结合强度高、稳定性好;合成了16个2-喹诺酮类衍生物,产物结构经1H-NMR确证。结论:所得化合物中有15个为新化合物,化合物结构设计科学合理,虚拟筛选结果良好,为后续实体筛选和化合物结构优化提供了理论依据和参考。

  • 标签: Polo样激酶1(Plk1)抑制剂 2-喹诺酮类衍生物 分子对接 设计合成
  • 简介:目的:利用基因芯片技术,以细菌16SrDNA和23SrDNA为靶序列筛选引物和探针,建立快速、准确检测水产食品中肠道致病菌方法。方法:将致病菌16SrDNA和23SrDNA全序列进行软件比对,在可变区和恒定区分别设计特异性寡核苷酸探针和通用性引物,点样于玻片制成基因芯片。致病菌DNA经过通用引物扩增后与芯片上探针杂交,然后通过扫描图像对结果进行判断。对基因芯片检测灵敏度进行了评价,并对模拟污染样本进行了实际检测,以验证所建立方法。结果:设计4对通用引物在同一条件下能够扩增7种常见肠道致病菌。在均一杂交条件下能够同时检测单核细胞增生利斯特菌、副溶血性弧菌、霍乱弧菌、金黄色葡萄球菌、弗氏志贺氏菌、鼠伤寒沙门氏菌和肠出血性大肠杆菌O157∶H7;以鼠伤寒沙门氏菌为对象,本方法检测灵敏度可达到10^-3cfu/mL,实际检测模拟污染样本正确率达到100%。结论:建立基因芯片系统可以准确而稳定地实现对7种水产食品中常见致病菌通用检测,为食源性感染诊治与预防提供了有效技术手段和方法依据。

  • 标签: 基因芯片 食源性致病菌 水产食品
  • 简介:降钙素原是降钙素前体物质,作为炎性标志物越来越受到重视,它可作为多种疾病诊断和预后指标,现就降钙素原与某些疾病临床检测运用进行综述.

  • 标签: 降钙素原 感染 诊断 预后
  • 简介:流感是一种对人类危害极大传染病,接种疫苗被认为是预防流感有效手段。目前所用流感疫苗主要是根据现行流行株减毒或灭活病毒疫苗及基于流感血凝素和神经氨酸酶设计重组蛋白质疫苗。但流感病毒变异大,易逃逸机体免疫监视,有效疫苗须不断分离新流行株和不断更新疫苗免疫原。为解决这一问题,很多科学家一直在研究基于病毒高度保守性蛋白质、能够预防所有流感病毒毒株、可诱导持久保护性免疫通用流感疫苗。我们对基于基质蛋白M2、核蛋白等通用流感疫苗做一简要综述。

  • 标签: 通用流感疫苗 基质蛋白M2e 核蛋白
  • 简介:蛇毒是一类组成复杂生物毒素,不仅作为蛇捕食和防御武器,还在促凝、抗凝、镇痛、戒毒、抗肿瘤等医药领域中得以使用,同时蛇毒还是科学家研究生物进化良好模型。作者针对蛇毒组成多样性、蛇毒合成生物学机制以及蛇毒生物演化进行简要综述。

  • 标签: 蛇毒 合成机制 蛇毒演化
  • 简介:microRNA(miRNA)是在多种真核细胞和病毒中发现一类内源性非编码单链RNA,长约22个核苷酸,在进化上具有高度保守性。miRNA可以通过碱基互补与靶基因mRNA特定位点结合,抑制该蛋白合成或诱导该mRNA降解,在生物体生长、发育和疾病发生等过程中发挥着重要作用。我们简要叙述了miRNA特点和作用机制,并对miRNA在基因表达调控、胚胎干细胞调控及免疫调节等方面的最新进展进行了综述

  • 标签: MICRORNA 基因表达 干细胞 免疫 疾病
  • 简介:目的:探讨顶羽菊提取物抗氧化活性。方法:采用Folin-Ciocaheu法测定顶羽菊水提物和醇提物中多酚含量,并以芦丁为标准品测定其黄酮含量;通过总还原力测定法、Fenton法、改良邻苯三酚自氧化法、过氧化脂质测定、亚硝酸盐清除率测定和亚硝胺合成阻断率测定,分别对顶羽菊提取物总还原力、超氧阴离子自由基和羟自由基清除能力、脂质过氧化抑制作用、清除亚硝酸盐自由基和亚硝胺阻断率进行测定。结果:顶羽菊水提物和醇提物中含有以黄酮类为主要成分多酚类物质;具有较强还原性和清除超氧阴离子自由基、羟自由基活性,且醇提物作用高于水提物;二对脂质过氧化抑制率达47%以上;顶羽菊提取物具有较强清除亚硝酸钠和阻断亚硝胺合成能力,水提物对亚硝酸盐最大清除率为60.4%,醇提物对亚硝胺合成阻断率为86.6%。结论:顶羽菊醇提物可作为抗氧化剂和防癌剂,用于清除机体内自由基、抗脂质氧化、延缓机体衰老、预防心血管系统疾病和癌症发生。

  • 标签: 顶羽菊 提取物 自由基 抗氧化活性 亚硝胺阻断
  • 简介:目的:对毕赤嗜甲醇酵母工程菌inu-26高密度培养表达黑曲霉菊粉内切酶条件进行优化,找出最佳外源蛋白表达条件。方法:在摇瓶优化培养基础上进行发酵罐高密度培养,优化最佳产酶条件。结果:以葡萄糖为碳源、微量元素添加量100~200mL/L、甲醇浓度1g/L、pH6.0~7.0、诱导时间96h时酶表达量最高;摇瓶模拟高密度培养表明影响酵母生长最主要因素葡萄糖和硫酸铵最佳浓度分别为20~45和11.5g/L;利用培养基F1进行高密度培养优于其他培养基,工程菌生长符合指数生长曲线,细胞生长延迟期为1.36h,比生长速率μ为0.4846h-1。结论:以葡萄糖为碳源,采用葡萄糖-甲醇混合诱导和100%甲醇单一诱导相结合,在菌体鲜重约为280g/L时连续诱导96h,菌体生长良好,不会出现自溶,且酶表达量最高,为摇瓶培养3倍多,酶活最高可达540U/mL。

  • 标签: 毕赤嗜甲醇酵母 黑曲霉菊粉内切酶 高密度培养
  • 简介:慕课(MOOC)热带来了在线课程新体验,学生就此有了提高学术英语能力迫切要求,同时给高等教育大力倡导专用英语(ESP)发展创造了难得机遇。本文简述了慕课和ESP基本概念、特点及影响,以军医大学生物化学英语教学为例,从教学内容、教学方式、考核方式等方面探讨了目前生物化学英语教学现状,提出了生物化学英语ESP课程建设相关对策,建议选择贴近学习需求慕课课程、分阶段有侧重进行专业学术英语技能培训,此举将有助于慕课课程模式下ESP教学改革开展,促进国际化人才培养。

  • 标签: 慕课 军医大学 生物化学 专用英语 教学改革 学习需求
  • 简介:目的:探讨核酸适体KMF2-1a为基础乳腺癌细胞靶向化疗药物载体应用价值。方法:采用细胞仪检测人体乳腺癌MCF-1OAT1细胞内吞KMF2-1a药物载体作用,其结果以分光光度计检测。结果:核酸适体KMF2-1a及其药物载体可被MCF-1OAT1细胞特异性内吞。结论:核酸适体KMF2-1a可用于靶向治疗乳腺癌。

  • 标签: 乳腺癌细胞 KMF2-1a 靶向化疗
  • 简介:随着我国医疗水平不断提高,我国在糖尿病与糖尿病肾病上研究加深,对TLR4/P38Mapks信号通路与糖尿病肾病相关性研究更进一步,笔者在前人探究结果基础上,开展探究活动。糖尿病与糖尿病肾病患者TLR4/P38Mapks表达都高于健康人群,因此TLR4/P38Mapks表达与糖尿病肾病患者病情存在密切关系,且糖尿病与糖尿病肾病患者TLR4/P38Mapks表达与尿蛋白排泄率、尿素氮之间存在正相关,而DN组TLR4/P38Mapks表达又与患者血清中IL-6、IL-8之间也存在正相关关系。本文先是对MAPKs信号通路生化特征与糖尿病肾病相关性进行概述,又详细阐述了糖尿病肾病与TLR4相关性。

  • 标签: TLR4/P38Mapks 信号通路 糖尿病肾病 相关性 研究进展
  • 简介:腺相关病毒(AAV,AdenoassociatedVirus)是一类线状单股DNA微小病毒。腺相关病毒因共具有定点整合(19q13qter)及非病原性等特点而在基因转移与治疗中可望作为较为理想载体。其在宿主染色体DNA上整合需要辅助病毒共转染。根据Cavalier-Smith线状SSDNA分子复制模式,即复制过程中3′OH端作为引物在DNA聚合酶作用下合成另一姊妹股DNA分子,然后共价地连接到亲代未折叠5′端回纹末端而进行DNA复制。本文

  • 标签: 腺相关病毒 ITRs NEOMYCIN 染色体基因 DNA 末端反向重复
  • 简介:由于国际上对转基因产品安全性存在较大争议,因此对没有加施标签予以声明情况下大量进入中国市场转基因产品进行检测就显得十分迫切且意义重大.本研究以进口转基因抗草甘膦油菜籽和大豆为材料,通过比较分析外源CP4-EPSPS基因核苷酸序列和表达氨基酸序列,设计出两对不同引物,采用PCR方法分别对转基因油菜籽和大豆中外源CP4-EPSPS基因进行了检测.

  • 标签: 抗草甘膦油菜籽 抗草甘膦大豆 CP4-EPSPS PCR CP4-EPSPS基因 检测
  • 简介:目的:构建带Myc标签LC3B—PLA2基因真核表达质粒,获得LC3B—PLA2融合蛋白,并应用LC3B—PLA2研究Atg4B对LC3B切割作用。方法:以本实验室保存乳腺文库为模板,PCR扩增获得LCgB序列,与PLA2G]O拼接后插入pCMV—Myc载体,用构建重组质粒转染HEK293T细胞,Western印迹检测融合蛋白表达,用LC3B—PLA2与Atg4B共转染方法检测Atg4B对LC3B切割作用。结果:菌液PCR、重组质粒双酶切及测序均表明重组质粒构建成功,Western印迹结果表明融合蛋白在HEK293T细胞中获得表达,LC3B—PLA2真核表达蛋白能够应用于Atg4B对LC3B切割作用研究。结论:构建了pCMV—Myc—LC3B—PLA2真核表达质粒,LC3B—PLA2融合蛋白在Atg4B对LC3B切割作用研究中至关重要,为进一步研究Atg4B在自噬过程中作用奠定了基础。

  • 标签: LC3B-PLA2 Atg4B 自噬 重组质粒
  • 简介:作为研究甲醇代谢、过氧化物酶体稳态和硝酸盐吸收模式生物,多形汉逊酵母近年来在基础研究领域日益受到重视.在工程应用领域,利用多形汉逊酵母表达真核外源基因有特殊优势.譬如容易得到高拷贝,在含油酸培养条件下能够表达膜蛋白等.已有多种外源蛋白在多形汉逊酵母系统中得到表达.本文综述了多形汉逊酵母基本生物学性质、基础研究领域概况及其在外源基因表达方面的特点和进展.

  • 标签: 多形汉逊酵母 甲醇氧化酶 过氧化物酶体 外源基因表达
  • 简介:目的:探讨Ca2+和Na+诱导细胞凋亡最佳浓度及时间,并用甲基绿一派诺宁染色法检测凋亡细胞形态变化。方法:分别用不同浓度梯度及时间梯度Ca2+和Na+胁迫处理洋葱鳞茎内表皮细胞,得诱导最佳浓度及时间;用甲基绿一派诺宁染色法检测诱导凋亡洋葱鳞茎内表皮细胞、大蒜根尖细胞和鸡血红细胞形态特征变化。结果:诱导处理最佳Ca2+和Na+浓度为0.4mol/L,最适时间约为8h,且CaCl2诱导效果较NaCl好;经甲基绿一派诺宁染色,洋葱鳞茎内表皮细胞、大蒜根尖细胞、鸡血红细胞凋亡细胞细胞核均呈蓝紫色,细胞质呈红色。结论:找出了诱导细胞凋亡最适Ca2+和Na+浓度和时间,并检测到细胞凋亡。

  • 标签: 细胞凋亡 离子胁迫诱导 甲基绿-派诺宁 洋葱鳞茎内表皮 大蒜根尖 鸡血红细胞